3 курс / Фармакология / Диссертация_Ромодановский_Д_П_Разработка_требований_для_оценки_фармакокинетики

У мужчин не эквивалентные результаты были получены в 4 исследованиях (40 %), у женщин в 2 исследованиях (20%). Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ каптоприла,

выполнили, используя точный критерий Фишера, для чего построена таблица сопряженности

(см. таблицу 63). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00 %, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (Fр= 0,384; р>0,05).

Таблица 63. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов исследований каптоприла.

	Биоэквивалентные	Не биоэквивалентные
	n=14	n=6
Мужской пол	6	4
n=10
Женский пол	8	2
n=10

Примечание: n – количество наблюдений.

Препараты каптоприла не являются высоковариабельными, при планировании и оценке результатов исследований БЭ следует руководствоваться принципами, описанными в Приложении №2.

Лизиноприл

Лизиноприл – ингибитор АПФ третьего поколения, не является пролекарством. Время достижения максимальной концентрации в среднем составляет 7 часов. Лизиноприл не подвергает метаболизму. Период полувыведения при многократном приеме составляет 12,6 часов22.

Проведенный анализ 22 исследований БЭ показал, что во всех рассмотренных исследованиях был выбран стандартный простой перекрёстный дизайн с приёмом исследуемых препаратов натощак. Препаратом сравнения в большинстве исследований был референтный препарат Ирумед®, изучались дозировки 10 и 20 мг. Период отмывки в большинстве исследований составил 7-14 дней, длительность отбора и количество временных точек отбора значительно варьировало в различных исследованиях. Количество субъектов, включённых в статистический анализ параметров ФК, варьировало от 18 до 36 добровольцев (Приложение №1).

Во всех исследованиях в крови определяли в качестве аналита – лизиноприл. В качестве биоаналитического метода определения аналитов в большинстве исследований использовали высокоэффективную жидкостную хроматографию с масс-спектрометрической или тандемной масс-спектрометрической детекцией аналитов, НПКО варьировал в диапазоне 0,1 – 10 нг/мл

22 Диротон®. Инструкция по медицинскому применению [Электронный ресурс] // Государственный реестр лекарственных средств. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/InstrImg/0001426312/%D0%9F_N011426_01-

311018[2018]_1.pdf (дата обращения: 11.05.2020).

151

(Приложение №1).

В результате анализа значений концентраций лизиноприла были рассчитаны ФК

параметры Cmax, AUC0-t, tmax. (см. таблицу 64 и рисунок 26).

Таблица 64.

Усредненные фармакокинетические параметры лизиноприла.

№	Cmax T, нг/мл	Cmax R, нг/мл	AUC0-t T, нг*ч/мл	AUC0-t R, нг*ч/мл	tmax T, ч	tmax R, ч
1	46,34	46,53	590,37	585,51	7,56	7,67
2	403,11*	408,07*	7176,39*	7446,53*	7,25	7,28
3	87,43	93,87	1274,75	1338,58	6,75	6,83
4	59,87	61,45	665,67	701,40	7,22	7,17
5	105,33	106,99	1446,19	1487,30	6,58	6,10
6	75,74	75,26	1234,39	1151,30	8,16	7,08
7	47,11	42,28	583,47	517,90	6,10	6,00
8	466,28*	484,00*	2881,99*	3032,67*	5,91	6,04
9	41,75	43,49	507,43	516,33	7,50	7,67
10	79,06	77,11	990,56	983,67	6,00	6,44
11	47,77	52,64	713,33	751,69	6,40	6,30
12	108,53	116,99	1624,39	1789,43	6,41	6,23
13	94,70	91,78	1563,26	1594,80	7,00	6,80
14	46,57	43,79	809,08	767,75	6,50	6,17
15	45,60	44,11	518,73	553,15	7,17	7,72
16	51,36	48,20	804,39	770,07	7,00	7,00
17	82,96	76,71	1148,90	1126,55	6,60	6,80
18	139,13	140,38	1201,13	1219,71	6,70	6,70
19	64,59	70,14	649,98	661,65	7,80	7,80
20	31,95	32,06	508,03	482,07	7,00	6,83
21	62,30	63,97	959,73	969,16	6,21	6,21
22	70,40	75,93	1151,69	1240,34	6,00	6,61
СРЗНА	69,42	70,18	947,27	960,42
Ч**					6,81	6,79
СО**	27,35	28,50	363,98	392,17	0,62	0,58

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; tmax – время достижения максимальной концентрации; T – исследуемый препарат; R – референтный препарат; СРЗНАЧ – среднее арифметическое; СО – стандартное отклонение; * - крайне высокие значения (низкая чувствительность аналитического метода); ** - расчеты проведены без учета данных исследований 2 и 8.

Рисунок 26.

152

Усредненные фармакокинетические профили лизиноприла.

а

б

153

в

г

Примечание: а) фармакокинетические профили воспроизведенных препаратов; б) фармакокинетические профили препаратов сравнения; в) фармакокинетические профили воспроизведенных препаратов без учета «выбросов»; г) фармакокинетические профили препаратов сравнения без учета «выбросов»; Т1-Т22 и R1-R22 – нумерация исследований биоэквивалентности, вошедших в анализ.

Полученные результаты позволяют судить о том, что tmax лизиноприла находиться в диапазоне 6-7,5 часов после приема, средние значения Cmax находились на уровне 50-100 нг/мл в зависимости от чувствительности аналитического метода и дозировки (10-20 мг) (см. Приложение №1). В исследованиях с наибольшей чувствительностью аналитического метода средние Cmax были на уровне 50 нг/мл.

Аналитическую методику определения лизиноприла следует планировать с учетом НПКО менее 2,5-5 нг/мл в зависимости от дозировки. В проанализированных исследованиях НПКО варьировал в диапазоне 0,1 – 10 нг/мл, таким образом правило 5% от Cmax не было соблюдено в ряде исследований.

Период полувыведения лизиноприла, по данным референтного препарата, составляет 12,6 часов, поэтому при выборе точек забора образцов крови для ФК анализа препаратов с

154

немедленным высвобождением следует учитывать общую длительность 72 часа. Более частый отбор образцов крови следует планировать в диапазоне времени достижения Сmах около 6-7,5

часа. Период отмывки с учетом длительности периода полувыведения должен быть 7 дней.

В таблице 65 приведены данные оценки внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax и AUC0-t 22 исследований БЭ лизиноприла. Показано, что только в 1 случае была выявлена высокая внутрииндивидуальная вариабельность Cmax и AUC0-t.

Таблица 65.

Внутрииндивидуальная вариабельность лизиноприла.

№	СVintra AUC0-t, %	СVintra Cmax, %
1	14,92	11,89
2	15,11	10,40
3	19,39	20,40
4	15,44	13,32
5	28,21	27,32
6	22,81	25,65
7	25,93	18,83
8	12,42	9,38
9	13,97	13,38
10	13,13	13,41
11	19,47	22,16
12	20,72	21,30
13	12,03	15,20
14	6,47	14,05
15	15,38	14,26
16	17,54	18,66
17	21,41	20,57
18	18,67	15,90
19	22,29	14,86
20	25,07	22,67
21	22,61	19,25
22	28,37	30,67*
CVpooled, %	19,80 (20,40)	19,18 (19,77)

(верхняя граница ДИ)

Примечание: MSE – среднеквадратичная ошибка; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови; CVintra – коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности; CVpooled - усредненное («пулированное») значение коэффициента внутрииндивидуальной вариабельности; ДИ – доверительный интервал; * - значения, превышающие

30%.

На основании полученных данных можно сделать вывод об отсутствии высокой внутрииндивидуальной вариабельности лизиноприла. Результаты «пулирования» данных 22

исследований лизиноприла показали, что значение CVpooled Cmax составило 19,18% (верхняя граница доверительного интервала 19,77%) и CVpooled AUC0-t составило 19,80% (верхняя граница доверительного интервала 20,40%), что говорит о том, что для расчета размера выборки в исследования БЭ, следует ориентироваться на значение коэффициента внутрииндивидуальной

155

вариабельности 20%.

Также были рассчитаны коэффициенты внутрииндивидуальной вариабельности лизиноприла для отдельных популяций субъектов мужского и женского пола (см. таблицу 66).

Всего в исследованиях 22 в статический анализ были включены данные от 481 субъекта, из которых 288 было мужского пола и соответственно 193 женского.

Таким образом, в исследованиях лизиноприла участвовало 60% субъектов мужского пола и 40% женского пола. В 7 исследованиях лизиноприла участвовали только субъекты одного пола,

поэтому в дальнейший анализ эти данные не вошли. В 15 оставшихся исследованиях,

участвовали 136 мужчин и 152 женщины. В этих исследованиях были получены значения CVintra

ФК параметров более 30% у мужчин в 1 исследовании и в 1 исследовании у женщин.

Таблица 66. Данные о внутрииндивидуальной вариабельности лизиноприла у мужчин и женщин.

	М	Ж		М			Ж		Ж/М	Ж/М
			Cmax, %		AUC0-t, %	Cmax, %		AUC0-t, %	Cmax	AUC0-t
1	7	11	10,34		11,65	11,91		14,99	1,15	1,29
2	6	12	16,96		18,23	5,65		12,60	0,33	0,69
4	6	12	14,22		12,78	11,70		13,94	0,82	1,09
6	12	12	25,34		18,81	25,37		24,98	1,00	1,33
7	8	10	16,02		29,78	19,09		21,30	1,19	0,72
8	14	10	11,06		14,22	6,63		9,53	0,60	0,67
9	5	13	16,53		10,97	12,98		15,07	0,79	1,37
10	8	10	15,35		17,05	12,52		10,62	0,82	0,62
14	9	9	14,99		8,23	13,04		4,01	0,87	0,49
15	6	12	14,09		9,45	14,81		18,34	1,05	1,94
17	14	4	18,82		17,89	24,98		22,41	1,33	1,25
19	10	8	14,68		29,81	16,68		11,11	1,14	0,37
20	13	5	22,98		23,29	12,83		28,32	0,56	1,22
21	5	19	25,36		35,71*	18,12		19,05	0,71	0,53
22	13	5	29,00		27,13	43,59*		39,77*	1,50	1,47
СРЗНАЧ			17,71		19,00	16,66		17,73	0,92**	1,00
СРГЕОМ			16,97		17,32	14,73		15,66
МАКС			29,00		35,71	43,59		39,77
МИН			10,34		8,23	5,65		4,01
СО			5,50		8,41	9,29		8,83

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж – женщины, Ж/M – отношение значений внутрииндивидуальной вариабельности фармакокинетического параметра у женщин к соответствующему значению у мужчин, СРЗНАЧ – среднее арифметическое значение, СРГЕОМ – среднее геометрическое значение, МАКС – максимальное значение, МИН – минимальное значение, СО – стандартное отклонение, * - значения, превышающие 30% (высокая вариабельность), ** - значения демонстрируют превышение внутрииндивидуальной вариабельности у женщин в сравнении с мужчинами.

В связи с невысокой частотой выявления значений CVintra, превышающих 30%, изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением частоты высокой внутрииндивидуальной вариабельности ФК параметров не проводили.

Средние значения вариабельности Cmax в исследованиях лизиноприла были выше у

156

мужчин (17,71±5,50 и 16,66±9,29, соответственно). Значения отношений внутрииндивидуальной вариабельности между женщинами и мужчинами во всех исследованиях составило – 0,92, что говорит о незначительно большей внутрииндивидуальной вариабельности у мужчин. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров Cmax у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (U=88.000; p=0,325).

В отношении параметра AUC0-t была обнаружена аналогичная тенденция для средних значений (19,00±8,41 и 17,73±8,83, соответственно). Отношение значений вариабельности между женщинами и мужчинами составило 1,00. Анализ сравнения внутрииндивидуальной вариабельности параметров AUC0-t у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий (t=0,401; p=0,708).

Можно судить о том, что внутрииндивидуальная вариабельность параметров ФК лизиноприла у мужчин незначительно выше, чем у женщин, однако, различия статистически не значимы.

Таблица 67 демонстрирует, отношение средних T/R для мужчин и женщин в проведенных исследованиях БЭ и случаи выявленной клинически значимой разницы отношений средних T/R

у мужчин и женщин. Значения, превышающие разницу 20% (0,2) сигнализируют о наличии взаимосвязи «пол-лекарственная форма». Выявлено 6 случаев наличия взаимосвязи «пол-

лекарственная форма» в 4 исследованиях из 15 (27%).

Анализ сравнения отношений геометрических средних T/R ФК параметров у мужчин и женщин не выявил статистически значимых различий для Сmax (U=109,000; p=0,902) и для AUC0- t (U=110,000; p=0,935).

Таблица 67. Клинически значимые различия отношений геометрических средних воспроизведенного и

референтного препаратов лизиноприла у мужчин и женщин.

		М			Ж		Разница М-Ж
	T/R		T/R	T/R		T/R	Cmax	AUC0-t
	Cmax		AUC0-t	Cmax		AUC0-t
1	1,11		1,12	0,94		0,95	0,16	0,17
2	0,92		0,85	1,03		1,03	-0,11	-0,18
4	1,07		0,99	0,95		0,94	0,12	0,05
6	0,96		1,01	1,10		1,16	-0,15	-0,16
7	1,23		1,33	1,06		1,09	0,17	0,24*
8	0,97		0,97	0,97		0,93	0,00	0,04
9	0,94		0,96	0,98		1,00	-0,04	-0,04
10	0,96		0,95	1,06		1,02	-0,10	-0,07
14	1,22		1,09	0,94		1,02	0,28*	0,07
15	1,10		0,97	0,99		0,95	0,12	0,03
17	1,17		1,23	0,87		0,76	0,30*	0,47*
19	0,91		0,96	0,96		1,02	-0,04	-0,06
20	0,90		0,95	1,14		1,32	-0,24*	-0,37*
21	0,92		0,89	0,98		1,01	-0,06	-0,12
				157

AUC0-t

		М			Ж		Разница М-Ж
	T/R		T/R	T/R		T/R	Cmax	AUC0-t
	Cmax		AUC0-t	Cmax		AUC0-t
22	0,90		0,96	0,96		0,90	-0,06	0,06

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови, AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови, М – мужчины, Ж - женщины, М-Ж разница значений T/R у мужчин и женщин, T/R – отношение средних фармакокинетических параметров исследуемого (T) и референтного препарата (R), * - значения превышающие порог ±0,2.

Сравнительный анализ средних логарифмированных значений ФК параметров Cmax и

лизиноприла у мужчин и женщин показал, что в 3 из 15 исследований (13%), были обнаружены статистически значимые различия по параметрам Cmax и/ или AUC0-t (у женщин средние значения были выше) (см. таблицу 68).

										Таблица 68.
		Гендерные различия фармакокинетики лизиноприла (норм. распр.).
			Пол	Количест во	Среднее	Станд. отклонен ие	Станд. средняя ошибка	Т критерий	Степени свободы	значимос ть (двухстор онняя)
			мужской	16	4,232	0,197	0,049	-2,496	34	0,018
		LnCmax
			женский	20	4,412	0,228	0,051
	№10
		LnAUC0-t	мужчины	16	6,777	0,225	0,056	-2,146	34	0,039
			женщины	20	6,941	0,229	0,051
		LnAUC0-t	мужчины	20	6,383	0,293	0,065	-2,115	34	0,042
	№19
			женщины	16	6,551	0,136	0,034
			мужчины	26	4,034	0,533	0,104	-2,358	34	0,024
		LnCmax
			женщины	10	4,468	0,367	0,116
	№22
		LnAUC0-t	мужчины	26	6,807	0,513	0,100	-2,967	34	0,005
			женщины	10	7,330	0,338	0,107

Примечание: Ln – натуральный логарифм; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; Cmax – максимальная концентрация в крови.

С помощью полученных в результате нашего анализа значений внутрииндивидуальной вариабельности и точечной оценки, рассчитали симуляционные 90% доверительные интервалы для 15 исследований воспроизведённых препаратов лизиноприла при допущении, что количество субъектов мужского и женского пола будет приравнено к значению общей исходной выборки.

Как видно из таблицы 69, в результате проведенных расчетов, в 7 из 15 исследований у мужчин и в 4 из 15 у женщин получены доверительные интервалы, не укладывающиеся в допустимый диапазон 80,00-125,00 %.

Таблица 69. 90 % доверительные интервалы для отношения геометрических средних исследуемого и

референтного препаратов лизиноприла у мужчин и женщин.

			Cmax М		AUC0-t М			Cmax Ж			AUC0-t Ж
	N	L		U	L	U	L		U	L		U
1	18	1,04		1,17	1,04	1,20	0,88		1,01	0,87		1,03
2	18	0,83		1,01	0,77*	0,95	0,99		1,06	0,96		1,11
4	18	0,98		1,16	0,92	1,07	0,89		1,02	0,86		1,02
						158

			Cmax М		AUC0-t М			Cmax Ж		AUC0-t Ж
	N	L		U	L	U	L		U	L	U
6	24	0,85		1,08	0,92	1,11	0,97		1,25	1,03	1,32*
7	18	1,12		1,35*	1,12	1,58*	0,95		1,18	0,97	1,23
8	24	0,92		1,02	0,90	1,04	0,94		1,00	0,89	0,98
9	18	0,85		1,03	0,90	1,02	0,91		1,05	0,91	1,09
10	18	0,88		1,05	0,86	1,05	0,98		1,13	0,96	1,09
14	18	1,12		1,33*	1,04	1,14	0,87		1,01	0,99	1,04
15	18	1,02		1,20	0,92	1,03	0,91		1,08	0,85	1,05
17	18	1,05		1,31*	1,11	1,37*	0,75*		1,00	0,67*	0,86
19	18	0,84		0,99	0,81	1,13	0,87		1,05	0,96	1,09
20	18	0,79*		1,03	0,83	1,08	1,06		1,23	1,12	1,55*
21	24	0,82		1,04	0,75*	1,06	0,90		1,07	0,92	1,11
22	18	0,76*		1,06	0,82	1,12	0,75*		1,22	0,72*	1,12

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в плазме крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; N – количество субъектов; М – мужчины; Ж – женщины; L – нижняя граница 90% доверительного интервала; U – верхняя граница 90% доверительного интервала; * – значения, не укладывающиеся в диапазон 80,00-125,00%.

У мужчин не эквивалентные результаты были получены в 7 исследованиях (47%), у женщин в 4 исследованиях (27%). Изучение ассоциации между принадлежностью к определённому полу и выявлением неэквивалентных результатов исследований БЭ лизиноприла,

выполнили, используя критерий χ2 с поправкой Йейтса для чего построена таблица сопряженности (см. таблицу 70). Анализ влияния фактора гендерной принадлежности на частоту результатов выявления доверительных интервалов, не укладывающихся в диапазон 80,00-125,00

%, показал отсутствие статистически значимой взаимосвязи (χ2=0,574; р>0,449).

Таблица 70. Ассоциация между полом субъектов и частотой выявления не биоэквивалентных

результатов исследований лизиноприла.

	Биоэквивалентные	Не биоэквивалентные
	n=29	n=11
Мужской пол	8	7
n=15
Женский пол	11	4
n=15

Примечание: n – количество наблюдений.

Препараты лизиноприла не являются высоковариабельными, при планировании и оценке результатов исследований БЭ следует руководствоваться принципами, описанными в Приложении №2.

Периндоприл

Периндоприл – является пролекарством, активный метаболит периндоприлат. Максимальная концентрация периндоприла в крови достигается через 1 час, периндоприлата

159

через 3-4 часа; период полувыведения периндоприла 1 час, периндоприлата 3-5 часов23.

Проведенный анализ 19 исследований БЭ показал, что во всех рассмотренных исследованиях был выбран стандартный простой перекрёстный дизайн. Препаратом сравнения в большинстве исследований был референтный препарат Престариум® или Престариум А®,

изучались различные дозы от 4 до 8 мг. Период отмывки составил от 7 до 31 дня, длительность отбора и количество временных точек отбора значительно варьировало в различных исследованиях. Количество субъектов, включённых в статистический анализ параметров ФК,

варьировало от 18 до 36 добровольцев (Приложение №1).

Вкрови определяли в качестве аналита – периндоприл и его метаболит периндоприлат. В качестве биоаналитического метода определения аналитов в большинстве исследований использовали высокоэффективную жидкостную хроматографию с масс-спектрометрической или тандемной масс-спектрометрической детекцией аналитов, НПКО периндоприла и периндоприлата варьировал в диапазоне 0,05 – 3 нг/мл (Приложение №1).

Врезультате анализа значений концентраций периндоприла и периндоприлата были рассчитаны фармакокинетические параметры Cmax, AUC0-t, tmax (см. таблицы 71 и 72). На рисунках

27 и 28 представлены усредненные ФК профили периндоприла и периндоприлата.

Таблица 71.

Усредненные фармакокинетические параметры периндоприла.

№	Cmax T, нг/мл	Cmax R, нг/мл	AUC0-t T, нг*ч/мл	AUC0-t R, нг*ч/мл	tmax T, ч	tmax R, ч
1	42,66	42,01	75,97	76,08	1,25	1,28
2	53,04	52,79	94,96	95,06	1,25	1,25
3	35,42	35,80	42,11	41,28	0,76	0,65
4	56,63	55,88	65,23	69,98	0,64	0,78
5	53,78	52,79	97,26	95,06	1,36	1,25
6	168,22	157,75	213,25	200,60	0,72	0,69
9	166,00	158,00	256,00	251,00	0,75	0,82
10	86,78	86,74	96,43	97,42	0,64	0,71
11	94,01	86,34	112,42	106,17	0,71	0,77
12	46,43	45,74	54,57	54,05	0,68	0,82
14	112,96	108,89	143,21	156,44	0,83	0,92
15	106,48	111,66	164,17	153,78	0,92	0,94
17	82,00	88,50	99,84	104,57	0,88	0,86
18	223,21	229,81	458,48	450,22	0,75	0,72
Mean	94,83	93,76	140,99	139,41	0,87	0,89
SD	56,24	55,85	109,38	106,36	0,24	0,22

Примечание: Cmax – максимальная концентрация в крови; AUC0-t – площадь под кривой «концентрация время» в интервале времени от 0 до момента t отбора последней пробы крови; tmax – время достижения максимальной концентрации; T – исследуемый препарат; R – референтный препарат; Mean – среднее арифметическое; SD – стандартное отклонение.

23 Престариум®. Инструкция по медицинскому применению [Электронный ресурс] // Государственный реестр лекарственных средств. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/InstrImg/0001429847/%D0%9B%D0%A1%D0%A0- 000257_08-250319[2019]_1.pdf (дата обращения: 11.05.2020).

160