Рабочая тетрадь освоения лабораторно-практических навыков по биологии. Часть I. Цитология с основами молекулярной биологии
..pdfГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ
«РОСТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ»
МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Кафедра медицинской биологии и генетики
Рабочая тетрадь освоения лабораторно-практических навыков по биологии. Часть I.
Цитология с основами молекулярной биологии.
Методические рекомендации к лабораторным занятиям для студентов 1 курса, обучающихся по специальности 060101 - Лечебное дело, 060103 Педиатрия, 060105 Медико-профилактическое дело, 060101 Лечебное дело очно-заочная форма обучения
Факультет _______________________________________________________________
Группа № _____________
Ф.И.О. ____________________________________________________________________
Ростов – на - Дону
2020
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА №1
Тема: Устройство светового микроскопа и техника микроскопирования. Клеточный уровень организации биологических систем.
Цель занятия:
1.Изучить устройство светового микроскопа и технику микроскопирования.
2.Научиться изготавливать временные микропрепараты.
3.Знать сходство и различия между клетками про- и эукариот, растительной
иживотной.
Материально-техническое обеспечение:
1.Микроскоп.
2.Учебные таблицы.
3.Оборудование для приготовления временных микропрепаратов: чашки Петри, скальпели, ножницы, пинцеты, препаровальные иглы, салфетки, предметные и покровные стёкла, вода, раствор йода.
4. Материал для временных микропрепаратов: элодея, волос человека, плёнка лука.
5. Постоянные микропрепараты: кровь лягушки, кровь человека. 6. Цветные карандаши.
Вопросы для самоподготовки
1.Микроскоп. Виды микроскопии.
2.Строение светового микроскопа механическая, оптическая и осветительная части.
3.Техника работы с микроскопом.
4.Понятие о временных и постоянных препаратах.
5.Основные положения клеточной теории.
6.Типы клеточной организации. Основные отличия эукариотической и прокариотической клеток.
7.Определение органелл и включений клетки, их строение и функции.
8.Основные отличия растительной и животной клеток.
Задания для студентов
Задание 1. Устройство светового микроскопа
Изучите основные части микроскопа: механическую, оптическую и осветительную (рис.).
Кмеханической части относятся: штатив, подвижный предметный столик, тубус, револьвер, микро- и макрометрический винт.
Коптической части относятся: окуляр, объектив. Окуляры бывают х7, х10, х15 и х25 кратного увеличения. Различают объективы малого увеличения
(х8, х9, х10), большого увеличения (х40) и иммерсионный объектив
(х90, х100).
1
Общее увеличение микроскопа равно произведению показателя окуляра на показатель объектива. Например, увеличение окуляра х7 х увеличение объектива х8 =56 крат, т.е. общее увеличение микроскопа 56 раз. Диаметр поля зрения малого увеличения (х8) больше, чем поле зрения большого увеличения (х40). Поэтому при переводе с малого на большое увеличение необходимо проводить центровку препарата.
Изображение в микроскопе обратное. Например, если объект на микропрепарате виден в левом верхнем углу, то на предметном стекле он расположен в нижнем правом.
К осветительной части относятся: зеркало, конденсор с ирисовой диафрагмой. Зеркало имеет две поверхности – плоскую (используется при ярком освещении) и вогнутую (используется при слабом искусственном свете). Конденсором регулируют освещенность поля зрения, при его опускании – уменьшается, при поднятии – увеличивается. Диафрагма помогает регулировать количество света проходящего через конденсор на изучаемый объект.
Задание 2. Обозначьте основные детали микроскопа на рисунке:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
Рис. Строение микроскопа
Задание 3. Правила работы с микроскопом
Перепишите и выучите правила работы с микроскопом.
Подготовка микроскопа к работе
1.Поставьте микроскоп штативом к себе, предметным столиком от себя, примерно на 10 см от края стола (на ширину ладони).
2.Поднимите с помощью макрометрического винта объектив над предметным столиком примерно на 0,5 – 1,0 см. Откройте диафрагму, поднимите конденсор до уровня предметного столика.
Правила работы с микроскопом на малом увеличении (7 х 8)
1.Установите в рабочее положение объектив малого увеличения (х8), повернув револьвер до щелчка, фиксация объектива над отверстием в
2
предметном столике. Запомните, что изучение любого объекта начинается с малого увеличения.
2.Глядя в окуляр левым глазом, направляют вогнутую поверхность зеркала на источник света, пока поле зрения не будет освещено ярко и равномерно.
3.Положите на предметный столик микропрепарат покровным стеклом вверх. Объект должен находился в центре отверстия предметного столика.
4.Переведите глаз с окуляра на объектив (смотреть сбоку микроскопа) и медленно опустите тубус с помощью макрометрического винта, чтобы объектив находился на расстоянии 2-3 мм от микропрепарата.
5.Смотрите в окуляр и одновременно медленно поднимайте тубус (только на себя) с помощью макрометрического винта до тех пор, пока в поле зрения объектива не появится изображение объекта. Запомните, что фокусное расстояние для малого увеличения равно примерно 5 мм. Далее вращая в ту или другую стороны макровинт добиваются четкого изображения.
Правила работы с микроскопом на большом увеличении (7 х 40)
1.При рассмотрении объекта на большом увеличении необходимо центрировать препарат (поместить его в центр поля зрения объектива). Для этого, глядя в окуляр, передвигайте препарат с помощью винтовпрепаратоводителей либо рукой, пока объект не займёт нужное положение. Если объект не отцентрировать, то при переводе объектива с малого на большое увеличение он окажется вне поля зрения.
2.Вращая револьвер, переведите в рабочее положение объектив большого увеличения (х40). Помните, что фокусное расстояние для объектива большого увеличения равно примерно 1 мм. Будьте осторожны! Можно
раздавить препарат и повредить объектив микроскопа.
3.Для тонкой фокусировки используйте только микрометрический винт, вращая его не более чем на пол-оборота.
Правила работы с иммерсионным объективом (7 х 90).
1.На большом увеличении центрируют интересующий участок микропрепарата.
2.Поворотом револьвера смещают объектив большого увеличение в свободное (нефиксированное) состояние.
3.На покровное стекло микропрепарата наносят каплю иммерсионного масла. 4.Фиксируют иммерсионный объектив над объектом.
5.Наблюдая в окуляр, с помощью микрометрического винта добиваются четкого изображения объекта.
6.Для зарисовки препарата смотрите в окуляр левым глазом, а в альбом правым глазом.
Завершение работы с микроскопом
1.Поднимите тубус на 2–3 см от предметного столика.
2.Переведите на объектив с малым увеличением.
3.Уберите микропрепарат.
4.При транспортировке микроскопа в шкаф, держите его правой рукой за штатив, а левой поддерживайте основание микроскопа (подставку).
3
Устранение ошибок, встречающихся при работе с микроскопом
1. При наведении света:
а) часть поля зрения затенена, так как объектив не зафиксирован на оптической оси микроскопа. Для устранения затенения повернуть револьвер до щелчка; б) в поле зрения видны предметы окружающей обстановки: переплеты
оконных рам, светильники). Для устранения помех опустить конденсор до исчезновения изображения предметов.
2. При переходе с малого увеличения на большое:
а) объектив упирается в предметное стекло препарата. Причина – препарат лежит на предметном столике покровным стеклом вниз; б) микроскоп не фокусируется на большом увеличении. Проверить на малом
увеличении: - центрирование объекта; -не положен ли препарат покровным стеклом вниз.
Задание 4. Сравнительная характеристика про- и эукариотической клеток
Заполните табл.1, указав особенности строения прокариотических и эукариотических клеток.
|
|
Таблица 1 |
Сравнительная характеристика про- и эукариотической клеток |
||
|
|
|
Признаки |
Прокариотическая клетка |
Эукариотическая клетка |
Размер клетки |
|
|
Ядро |
|
|
Молекула ДНК |
|
|
Деление клетки |
|
|
Клеточная стенка |
|
|
Клеточная |
|
|
мембрана |
|
|
Цитоплазма |
|
|
ЭПР |
|
|
Аппарат Гольджи |
|
|
Митохондрии |
|
|
Вакуоли |
|
|
Цитоскелет |
|
|
Центриоль |
|
|
Рибосомы |
|
|
Лизосомы |
|
|
Задание 5. Временные микропрепараты клеток растений
Микропрепарат - это биологический или иной объект, заключённый в капле воды или канадского бальзама между покровным и предметным стеклом. Препараты бывают временными и постоянными.
Временный микропрепарат - исследуемый объект заключённый в капле воды между предметным и покровным стеклом.
Постоянный микропрепарат – биологический объект, прошедший фиксацию «предохранение от разрушения ткани», окрашивание на выявление различных структур и локализацию химических компонентов клетки,
4
просветление толуолом или ксилолом и заделку в канадский бальзам. Постоянные микропрепараты хранятся в специальных закрывающихся коробочках, защищающих их от света и случайных механических повреждений. Постоянные микропрепараты хранятся длительное время.
Изучите строение эукариотических клеток на примере:
А) Клетки пленки лука
Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1-клеточную стенку; 2-цитоплазму; 3-ядро; 4-ядрышко; 5-вакуоль
Клетки плёнки лука |
Клетки плёнки лука |
7 х 8 |
7 х 40 |
Б) Хлоропласты в клетках листа элодеи
Зарисуйте несколько клеток при большом увеличении микроскопа и обозначьте: 1-клеточную стенку; 2-цитоплазму; 3-хлоропласты
Хлоропласты в клетках листа элодеи |
Хлоропласты в клетках листа элодеи |
7 х 8 |
7 х 40 |
|
5 |
Задание 6. Постоянные микропрепараты клеток крови человека и лягушки
Изучите постоянные микропрепараты на примере крови человека и лягушки. Зарисуйте и запишите различия между микропрепаратами.
Задание 7. Электронограммы органоидов эукариотической клетки
Изучите на электронограммах строение органоидов эукариотической клетки и определите эти органоиды (табл. 2).
Таблица 2
|
Электронограммы органоидов эукариотической клетки |
Органоид |
Электронограмма |
1.
6
2. |
|
|
|
|
|
3. |
гладкая |
гранулярная |
|
|
|
|
|
|
4. |
|
|
|
|
|
|
|
7 |
5.
6.
7.
Список литературы для подготовки к занятию:
1.Биология. Т. 1: учебник в 2-х т.: для студентов вузов/ В.Н. Ярыгин, В.В. Глинкина, И.Н. Волков [и др.]; под ред. В.Н. Ярыгина. – М.: ГЭОТАР-
Медиа, 2011. - 725 с.
2.Биология. Том 1: учебник в 2-х томах: для студентов вузов/ под ред. В.Н. Ярыгина. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2015. - 725 с.
3.Пехов А.П. Биология. Медицинская биология, генетика и паpазитология. учебник для медицинских вузов: учебник/ А.П. Пехов. - М.: ГЭОТАР-
Медиа, 2011. - 656 c.
8
4. Гигани О.Б. Биология: руководство к лабораторным занятиям [Электронный ресурс] : учебное пособие / под ред. Гигани О.Б. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 272 с.
5. Маркина В.В. Биология : рук. к практ. занятиям [Электронный ресурс] / Маркина В.В., Оборотистов Ю.Д., Лисатова Н.Г. и др. / под ред. В.В. Маркиной - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 448 с.
6. Чебышев Н.В. Биология: учеб. пособие для студентов медицинских вузов и постдипломного образования врачей [рек. УМО] / Н.В. Чебышев, Г.Г. Гринева. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 416 с.
9