6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Исследование_агрегации_тромбоцитов

Проблема стандартизации

•Ни один из вышеперечисленных методов не является унифицированным и стандартизованным

•Каждой лаборатории рекомендуется устанавливать свои референсные пределы, в зависимости от прибора и реагентов

•В 1999-2007 г. Кочетовым А.Г. и соавт. была проведена работа по стандартизации данного метода на агрегометре БИОЛА

Исследование функциональной активности тромбоцитов

Без добавления индуктора агрегации

Исследование

агрегации

Индуцированная

агрегация

Спонтанная

агрегация

Спонтанная с холодовой активацией

АДФ

(4 разведения)

Коллаген

Ристомицин

Оценка агрегационной

чувствительности

тромбоцитов

Оценка агрегационной активности тромбоцитов

Оценка

выраженности

эндотелиальной

деструкции

Стандартные агрегатограммы, характеризующие агрегационную активность тромбоцитов

	10	%	60
	8		50
		R	40
	6	Cлияние фазы
		высвобождения с фазой	30
		индуцированной агрегации
	4
			20
	2		10
	0		0
		АДФ 10 мкг/мл-индуцированная
		агрегация

Референсные значения: амплитуда кривой светопропускания 50-80%, кривая однофазная, необратимая (наличие фазы высвобождения, слияние ее с фазой индуцированной агрегации)

	10
			50
	8
			40
	6	Фаза
			30
		высвобождения
	4
			20
	2	Фаза индуцированной
		агрегации	10
	0		0
		АДФ 5 мкг/мл-индуцированная
		агрегация
		Референсные значения: амплитуда
		кривой светопропускания 50-80%,

кривая двухфазная (реже однофазная), необратимая (наличие фазы высвобождения,)

Стандартные агрегатограммы, характеризующие агрегационную чувствительность тромбоцитов

		20
1.0	R
0.8		15
0.6		10
0.4
		5
0.2		%
0		0
Спонтанная агрегация

Референсные пределы: амплитуда R-кривой не более 1,5 у.е., кривой светопропускания – не более 5 %.

10
8	Фаза дезагрегации
6
4	R
2	%
0
	АДФ 1,25 мкг/мл-

индуцированная агрегация

Референсные пределы: амплитуда кривой светопропускания 10-40 %, кривая однофазная, резкообратимая (отсутствие фазы высвобождения)

20	15
			30
15			25
	10
			20
10
			15
		Фаза
	5	индуцированной	10
5		агрегации
			5
0	0		0

АДФ 2,5 мкг/млиндуцированная агрегация

Референсные пределы: амплитуда кривой светопропускания 10-40 %, кривая однофазная, (не)обратимая (отсутствие фазы высвобождения)

Стандартные агрегатограммы, косвенно характеризующие функцию эндотелия

8.0	70
	60
6.0	50
	40
4.0	30
2.0	20
	10
0	0
Ристомицин-индуцированная
агрегация
Косвенно характеризует активность фактора
Виллебранда
Референсные пределы: амплитуда кривой
светопропускания 50-80%, кривая
однофазная,	необратимая

	35
8	30
	25
6	20
4	15
	10
2	5
0	0
	Коллаген-индуцированная агрегация

Характеризует целостность эндотелиального слоя Референсные пределы: амплитуда кривой светопропускания 30-60 %, кривая однофазная, необратимая

Агрегатограммы, характеризующие ПОВЫШЕННУЮ агрегационную ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ тромбоцитов

25

20

15

10

5

0

АДФ 1,25 мкг/мл-

40	5.0
30	4.0
	3.0
20
	2.0
10
	1.0
0
	0
	АДФ 2,5 мкг/мл-

		20
	2.5
40
	2.0	15
30
	1.5	10
20	1.0
		5
10	0.5
0	0	0

Низкотемпературная

	индуцированная агрегация	индуцированная агрегация	активация
	Однофазная СЛАБОобратимая	Однофазная необратимая с	Повышение амплитуды
			обеих кривых
	с малой степенью	повышенной степенью
	светопропропускания без	светопропропускания
	фазы стабилизации

Агрегатограммы, характеризующие ПОВЫШЕННУЮ агрегационную АКТИВНОСТЬ тромбоцитов

	80
3.0
2.5	60
2.0
1.5	40
1.0
	20
0.5
0	0
	АДФ 10 мкг/мл –
	высокая концентрация

ПОВЫШЕНА –повышение амплитуды кривой светопропускания

3.5	80
3.0
2.5	60
2.0
	40
1.5
1.0	20
0.5
0	0
	АДФ 5 мкг/мл – средняя
	концентрация
	ПОВЫШЕНА - повышение
	амплитуды кривой
	светопропускания, слияние
	фазы высвобождения с
	фазой индуцированной
	агрегации

3.5	70
3.0	60
2.5	50
2.0	40
1.5	30
1.0	20
0.5	10
0	0
	АДФ 2,5мкг/мл – низкая

концентрация

ПОВЫШЕНА – выраженное повышение амплитуды кривой светопропускания, наличие фазы высвобождения, слияние ее с фазой индуцированной агрегации

Агрегатограммы, характерные для состояния эндотелиальной дисфункции (деструкции)

8.0	60
	50
6.0	40
4.0	30
	20
2.0
	10
0	0
	Коллаген-индуцированная
	агрегация
	ПОВЫШЕНА – повышение
	амплитуды кривой
	светопропускания

2.5
	80
2.0
	60
1.5
1.0	40
0.5	20
0	0
	Ристомицин-
	индуцированная агрегация

ПОВЫШЕНА – повышение амплитуды кривой светопропускания

Антиагрегатные

препараты

Ингибиторы циклооксигеназы (ЦОГ)

Ацетилсалициловая кислота (аспирин, тромбо-асс, ацекардол, кардиомагнил, кардиаск), индобуфен, трифлюзал

Ацетилсалициловая кислота – «золотой стандарт» антитромбоцитарной терапии

ТРОМБОЦИТ

	ЦОГ
Арахидоновая	Ацетилсалициловая
кислота	кислота
	Эндоперекиси

Тромбоксан А2