иммунология и аллергология
.pdfколичество лейкоцитов; если количество лейкоцитов снижается более чем на 1 • 109/л, тест положительный
5. Иммунологическое обследование: радиоаллергосорбентный тест (PACT) и ИФА для определения специфических IgE-антител к различным аллергенам; метод ПРИСТ для определения концентрации общего IgE; тест Шелли; тест дегрануляции тканевых базофилов; реакция лейкоцитолиза; тест повреждения нейтрофилов; реакция торможения миграции лейкоцитов; реакция бластной трансформации лимфоцитов; определение концентрации гистамина и гистаминазы, гистаминопексической активности сыворотки крови, триптазы (специфического протеолитического фермента базофилов, выделяемого при их дегрануляции и др.)
183. Роль исследования системы HLAантигенов в диагностике внутренних болезней.
МНС (Major Histocompatibility Complex - главный комплекс гистосовместимости, у человека он же HLA - Human Leukocyte Antigen – человеческий
лейкоцитарный антиген) – трансплантационные (тканевые) АГ, выполняющие ряд функций:
1) участвуют в межклеточных взаимодействиях при реализации иммунного ответа, т.е.с помощью молекул HLA
осуществляется презентация чужеродного АГ для последующего распознавания Т-клеточным антигенраспознающим рецептором
2) определяют иммунологическую реакктивность организма в целом – обусловлена существованием в HLA-регионе специального гена иммунного ответа (Ir -гена), наличие которого определяет способность данного организма развивать иммунный ответ на конкретный АГ; эта же функция HLA-региона связана с предрасположенностью к ряду заболеваний.
Обозначение HLA-специфичностей включает три компонента: 1) аббревиатуру всей системы; 2) локус, содержащий данную специфичность; 3) номер антигена (например HLA-B12). В том случае, когда генетическая позиция антигена еще недостаточно ясна или недостаточно уточнена, перед его порядковым номером ставят символ "w" (workshop).
Гены HLA-системы расположены на коротком плече хромосомы 6 и разделены на три группы:
класс I, класс II и класс III; также сгруппированы и молекулы (антигены), которые контролируются этими генами.
Взаимосвязь АГ HLA с предрасположенностью к ряду заболеваний.
В процессе изучения АГ системы HLA
установлена достоверная связь между развитием болезней и локусами А, В HLA-1 и DR HLA-2.
Для объяснения механизмов включения продуктов HLA-комплекса в патогенез заболеваний выдвинуто несколько гипотез:
а) рецепторная гипотеза – определенные АГ системы HLA являются рецепторами для вирусов, облегчающими
их фиксацию и проникновение в клетку
б) гипотеза молекулярной "мимикрии" –
некоторые микроорганизмы несут поверхностные специфичности,
идентичные HLA-структурам макроорганизма хозяина, поэтому развивается толерантность к данным микроорганизмам, не происходит их распознавание иммунной системой и развивается заболевание
в) гипотеза о модификации (изменении) собственных АГ - модифицированный аутологичныи АГ распознается иммунной системой как чужеродный, что приводит к срыву толерантности
г) гипотеза о влиянии гипотетического Irгена на предрасположенность к заболеваниям – приводит к нарушению селекции антигенных детерминант, наличию "дыр" в репертуаре Т-лимфоцитов, нарушению Т-лимфоцит-опосредованной супрессии
д) гипотеза о влиянии "неклассических" HLA-генов, картирующихся в пределах МНС
- гены HSP, недостаточность С4а и С2 ассоциируется с СКВ и пиогенной инфекцией и др.
Ряд ревматических заболеваний (болезнь Бехтерева, синдром Рейтера, РА) имеют общий генетический маркер- HLA-B27, ряд аутоиммунных поражений связано с аллелями HLA DR2, DR3, DR4 (синдром Гудпасчера, целиакия, зоб Хашимото, рассеянный склероз, тяжелая миастения, вульгарный псориаз, СКВ, витилиго, герпетиформный дерматит, обыкновенная пузырчатка и др.) и т.д.
Определение HLA-фенотипа.
На мембране клеток организма присутствуют продукты генов всех локусов, размещенных на обеих нитях 6-й хромосомы. У человека два гаплотипа и каждая клетка организма несет на себе диплоидный набор АГ HLA, один из которых кодируется HLA-генами матери, а другой – отца (половые клетки – исключение, содержат только по одному гаплотипу).
HLA-фенотип – АГ гистосовместимости, выявляемые на клетках конкретного человека. Определение HLA-фенотипа позволяет установить предрасположенность к ряду заболеваний.
Как правило, фенотипируются лимфоциты периферической крови. Т.к. в данном случае неизвестно, какие именно HLA-АГ каким из двух гаплотипов родителей кодируются, производят типирование родителей, устанавливают гаплотипы обследуемого, а затем записывают HLA-фенотип, соблюдая числовой порядок HLAантигенов (например, HLA-фенотип- А 1,2; В5,12; DR2,5; DQ3,4 и др.)
Для фенотипирования используют
лимфоцитотоксический тест - основан на способности анти-НLA-АТ в присутствии комплемента разрушать лимфоциты, несущие соответствующие антигенные детерминанты;
гибель клеток демонстрируется при помощи добавления трипанового синего, мертвые клетки окрашиваются и под микроскопом считаются или его модификацию -
микролимфоцитотоксический тест (в настоящее время заменяет лимфоцитотоксический тест). Также могут применяться методы ДНК-гибридизации, ПЦР (чаще в научных исследованиях).
184. Патогенетическая (базисная) терапия аутоиммунных заболеваний. Иммунокорректоры.
Учитывая патогенез большинства аутоиммунных заболеваний, для их лечения используется базисная терапия, заключающаяся в большинстве случаев в применении иммуносупрессивных препаратов в следующей последовательности: ГКС – цитостатики –
различные методы экстракорпоральной детоксикации.
Иммуносупрессия — это воздействие на иммунную систему, направленное на подавление или удаление антител и/или лимфоцитов,
специфически реагирующих на аллоили аутоантигены.
1. ГКС – в основе их противовосполительного и иммуномодулирующего эффекта - классический «геномный» механизм, основанный на взаимодействии ГКС с факторами транскрипции, регулирующими гены цитокинов, молекул адгезии, матриксных протеиназ и др; на клеточном уровне ГКС подавляют преимущественно Т-хелперный иммунный ответ.
Вчастности, ГКС подавляют: а) продукцию провоспалительных цитокинов; б) индуцибельную фосфолипазу А2; в) индуцибельные циклооксигеназу и синтетазу NO; д) адгезивные молекулы, усиливает: а) продукцию ИЛ-10; б) экспрессию антагониста рецептора ИЛ-1 и др.
Взависимости от дозы эффекты ГКС могут реализовываться на разных уровнях (в низких концентрациях реализуется геномный механизм, при назначении высоких и сверхвысоких доз – как геномный, так и негеномный: изменение физико–химических свойств биомембран, подавление экспрессии рецепторов, регуляция активации лимфоцитов, ингибиция синтеза ФНО и др. механизмы).
2. Цитостатики – оказывают иммуносупрессивное действие по следующим механизмам:
а) подавление кальциевого обмена, ведущее к нарушению продукции ИЛ-2 Т-хелперами (циклоспорин, FK-506 / такролимус).
б) подавление синтеза нуклеотидов, снижение митоза и клональной экспансии (микофенолат мофетил – действует селективно в лимфоцитах, азатиоприн – действует неселективно на все пролиферирующие клетки)
в) подавление функции Т-клеточного распознающего рецептора (моноклональные анти-CD3-антитела)
г) нарушение передачи сигнала от ИЛ-2 в ядро клетки за счет подавления его связывания с рецепторами к ИЛ-2 (рапамицин)
д) множественный механизм воздействия (ГКС, поликлональные антилимфоцитарные глобулины)
е) подавление гликолизации адгезивных молекул – интегринов и селектинов (микофенолат мофетил)
ж) подавление тирозинкиназ, ассоциирующихся с Т-клеточными
распознающими рецепторами или с цитокинами (лефлюнамид)
Для любого иммуносупрессивного агента характерны три типа эффектов:
1)иммуносупрессивное действие, т. е. тот терапевтический эффект, который мы пытаемся получить, назначая больному тот или иной препарат
2)неиммунная токсичность препарата, обусловленная его химической структурой (нефротоксичность циклоспорина или FK-506 и т.д.) – необходимо учитывать при длительном назначении поддерживающей иммуносупрессивной терапи как после трансплантации, так и при аутоиммунной патологии.
3)неадекватное подавление иммунного ответа, способствующее развитию вторичного иммунодефицита с последующим возникновением инфекционных осложнений или опухолей.
3.Экстракорпоральная детоксикация –
плазмаферез – улучает функцию ретикулоэндотелиальной системы, позволяет удалить АТ, ЦИК и воспалительные медиаторы
из кровяного русла, обладает иммуномодулирующим эффектом.
Иммунокоррекция делится на:
а) иммуностимуляцию - способ активации иммунитета (специфическая - активация определенного клона
иммунокомпетентных клеток и неспецифическая
– общее усиление иммунной защиты); показана при первичных и вторичных иммунодефицитах, сопровождающихся рецидивирующими бактериальными и вирусными инфекциями, поражающими дыхательные пути, пищевой канал, урогенитальный тракт, кожу и др., в комплексном лечении больных с онкопатологией.
б) иммуномодуляцию - система мер по возвращению иммунного статуса к исходному, сбалансированному состоянию; показана здоровым лицам, перенесшим психоэмоциональное напряжение либо максимальные физические нагрузки, лицам с синдромом повышенной усталости.
Основные группы иммунокорректоров:
I. Продукты физиологического происхождения: