golovina_n_a_strelkov_yu_a_voronin_v_n_i_dr_ikhtiopatologiya

Рис. 21. Герпесвирус в тканях папиллом атлантического лосося Наиболее сильно лосось поражается в период смолтификации

(сеголетки-трехлетки). Продолжительное удержание смолтов в пресной воде при подращивании на рыбозаводах ведет к росту заболеваемости. Часто жертвами папилломатоза оказываются карликовые самцы. По-видимому, гормональные перестройки в организме, сопутствующие процессам смолтификации и полового созревания, снижают резистентность рыбы, делая ее уязвимой к заболеванию.

Взрослые особи болеют редко, но во время осеннего нерестового хода лосося встречали пораженных производителей. Учитывая способность герпесвирусов к длительной персистенции в организме хозяина и вертикальной передаче, можно предположить, что Источником инфекции являются больные половозрелые особи.

Клинические признаки и патогенез. Папилломы представляют собой образования полусферической формы высотой 3—4 мм и диаметром обычно до 10 мм. Поверхность их неровная, с беловато-сероватым или голубоватосероватым оттенком, иногда гиперемирована или испещрена петехиями. Они могут находиться на любых участках тела, но чаще локализуются на дорсальной части хвостового стебля, на хвостовом и других плавниках и у их оснований.

Гистологически новообразования имеют вид типичных папиллом. Это многократно утолщенные (за счет разрастания эпители альных клеток) участки эпидермиса, внутрь которых прорастают тяжи подлежащей рыхлой соединительной ткани дермы, содержащие кровеносные капилляры. В толще эпидермальных клеток папиллом различимы многочисленные митозы, слизистые клетки, как правило, отсутствуют. Осенью с понижением температуры воды до 6 °С и ниже наблюдаются разрушение и отторжение папиллом. На их месте нередко остаются кратероподобные язвы, обнажающие скелетную мускулатуру, и в случае медленного их заживления и наложения вторичных бактериальных и грибных инфекций заболевание сопровождается гибелью ослабленных рыб.

Меры борьбы. Они не разработаны. При выращивании рыбы рекомендуют избегать стресса, связанного с переуплотненными посадками,

131

перепадами температуры воды, нарушений в режиме кормления и сокращать сроки содержания молоди в пресной воде. После перевода смолтов на морскую воду весь рыбоводный инвентарь и рыбоводные емкости подвергают тщательной дезинфекции.

5.18. ЯЗВЕННЫЙ НЕКРОЗ КОЖИ ЛОСОСЕВЫХ

Язвенный некроз кожи лососевых (ЯНКЛ, Ulcerative dermal necrosis, UDN) — это тяжело протекающее заболевание половозрелых лососей, развивающееся обычно во время осеннего нерестового хода и характеризующееся появлением на теле рыб специфических язв и высокой смертностью.

Возбудитель. Этиология болезни остается невыясненной, но большинство исследователей считают ее вирусной. Болезнь контагиозна и передается через воду. Ее неоднократно воспроизводили путем инъекции рыбам безбактериального фильтрата (0,2 мкм) тканей пораженных участков кожи. При электронно-микроскопических исследованиях в цитоплазме клеток пораженных участков кожи было обнаружено большое количество электронно-плотных вирусоподобных частиц. Частицы имели сферическую или икосаэдрическую форму и диаметр 30—33 нм. Они образовывали скопления из нескольких десятков частиц, окруженных мембраной, или были свободно рассеяны в цитоплазме. В образцах ткани здоровых рыб частицы не встречались. Обнаруженный агент был отнесен к пикорнавирусам. Вместе с тем исследователи были достаточно осторожны в своих выводах относительно обнаружения вируса, признав, что подобную форму могут иметь также (3-частицы гликогена. Роль найденных частиц в заболевании осталась неизвестной. Интересно, что в последние пять лет у разных видов рыб, имевших признаки поражения центральной нервной системы, обнаружен целый ряд похожих агентов, которые после специальных исследований были отнесены к семейству но-давирусов.

Эпизоотология. Впервые описанная в Великобритании в конце прошлого и начале нынешнего века болезнь с новой силой вспыхнула в Ирландии в 1964 г., а вскоре была зарегистрирована в Великобритании, Шотландии, Франции, Бельгии, Испании, Португалии, Швейцарии, ФРГ, Австрии, Болгарии, Швеции, Норвегии, Финляндии. Вероятно, имеется и в России.

Заболеванию подвержены половозрелые особи проходного и жилого атлантического лосося, проходной и жилой кумжи и в меньшей степени радужной форели. Схожее заболевание встречали у хариуса и пеляди. В естественных водоемах оно наблюдается осенью у идущего на нерест лосося обычно при температуре 10 °С и ниже. Уже заходящий из моря лосось имеет типичные поражения. Болезнь продолжается далее и в пресной воде. В хозяйствах, имеющих собственное стадо производителей, заболевание длится несколько месяцев в холодное время года. По-видимому, преднерестовая

132

гормональная перестройка в организме рыб и снижение температуры являются провоцирующими заболевание факторами. В экспериментальных условиях болезнь развивается и при 15 "С. При заражении контактным путем инкубационный период составлял 3 сут. С понижением температуры он удлинялся.

Клинические признаки и патогенез. Больные рыбы отделяются от стаи и собираются в местах со спокойным течением. У некоторых особей наблюдаются симптомы повышенной возбудимости и нарушение координации движений (стремительное плавание у самой поверхности и выпрыгивание из воды, вращательные движения). Язвенные поражения развиваются на разных участках тела, но чаще на не покрытых чешуей местах — голове, жаберных крышках, жировом плавнике. Первый визуальный признак — появление тонких темного цвета колец или полуколец диаметром несколько миллиметров. Вскоре вслед за этим внутри колец начинается рост паразитических грибов в виде беловато-сероватых образований тоже кольцевой формы. Затем внутри колец появляются хорошо различимые в воде небольшие сероватые участки диаметром 1—3 мм, которые постепенно увеличиваются в размерах до нескольких сантиметров. Они шероховатые на ощупь, что является следствием прекращения функционирования здесь слизистых клеток и происходящего разрушения эпидермиса. На этой стадии небольшие язвы могут заживать. В тяжелых случаях повреждается базальная мембрана и язва проникает глубже, захватывая дерму и мускулатуру, что сопровождается появлением геморрагии и обильным ростом сапролегниевых грибов. Вслед за развитием обширных и множественных язв наступает гибель.

Заболеваемость рыб достигает 20—40 % и более, в таких же пределах колеблется гибель. Описаны случаи гибели до 100 % заводских производителей.

Меры борьбы. Они направлены на нераспространение инфекции и соблюдение профилактических ветеринарно-санитарных мероприятий. Обработка рыбы фунгицидными препаратами на стадии небольших язв дает положительный эффект.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ И ЗАДАНИЯ

1. Перечислить основные вирусные болезни карпа. 2. Назвать основные особо опасные инфекции лососевых. 3. Каковы вирусные болезни осетровых? 4. Перечислить основные папилломы, встречающиеся у рыб. 5. При каких вирусных заболеваниях на рыбоводные хозяйства накладывают карантин?

133

Глава 6. БАКТЕРИАЛЬНЫЕ БОЛЕЗНИ РЫБ

Интенсивное развитие мировой морской и пресноводной аквакультуры привело к выявлению большого числа бактериальных заболеваний, возбудителями которых являются одноклеточные микроорганизмы — бактерии, относящиеся к прокариотам. Бактерии чаще всего имеют длину до 1 мкм и ширину до 0,5 мкм, однако встречаются и более крупные или более мелкие формы. Для них характерны те же структуры, что и для клеток животных и растений: оболочка, цитоплазма, ядерный аппарат и цитоплазматические включения.

Оболочка бактерий имеет сложную структуру, состоящую из трех частей: цитоплазматической мембраны, клеточной стенки и слизистого слоя. При утолщении слизистого слоя его называют капсулой, которая предохраняет бактериальную клетку от внешних воздействий.

Цитоплазма — вязкое коллоидное вещество, состоящее из белков, воды, нуклеиновых кислот и других химических соединений. Сформированного ядра бактерии не имеют, их ядерный аппарат представлен хроматиновыми образованиями, называемыми нук-леотидами. Они не ограничены мембраной, имеют неправильную, разветвленную форму, содержат обе нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК) и белок. В цитоплазме бактерий имеются различные включения: крупинки гликогена, крахмала, капли жира, кристаллы некоторых кислот и др.

Размножаются бактерии путем поперечного деления. Некоторые бактерии в определенных условиях образуют споры, которые выделяются в окружающую среду при разрушении самой клетки. Такие споры очень стойки к неблагоприятным условиям, в том числе к высоким температурам, ядовитым веществам и т. д.; из споры образуется новая бактерия.

Многие бактерии имеют жгутики, благодаря которым они двигаются. Различают одно-, многожгутиковые формы и формы, снабженные пучком жгутиков на одном или обоих полюсах (монотрихи, перитрихи, лофотрихи). Некоторые бактерии могут образовывать пигмент. У одних бактерий он выделяется в окружающую среду, у других — пигмент окрашивает саму бактериальную клетку.

Современные методы интенсификации рыбного хозяйства способствуют активизации представителей водной микрофлоры, что приводит к нарушению равновесия между микро- и макроорганизмами, возникновению и распространению бактериальных болезней рыб.

Бактериальные болезни чаще всего вызываются возбудителями, являющимися строгими (облигатными) патогенами для рыб. Они не могут длительное время выживать в воде в отсутствие восприимчивого хозяина — рыбы. Другие бактерии, являющиеся факультативными патогенами, обычно обнаруживаются в почве и воде. Они становятся вирулентными при определенных условиях и поражают рыб, когда у последних снижается уровень резистентности. Такие условия, как переуплотненные посадки, некачественный корм, хендлинг, паразиты, низкое содержание кислорода, не-

134

благоприятные температура воды или рН, накопление продуктов метаболизма, снижают устойчивость организма рыб к возбудителям.

Для выделения бактерий и их дальнейшего изучения у живой рыбы стерильно берут материал из внутренних органов и крови, не допуская контакта с кожей и содержимым кишечника.

Посев материала проводят на плотные пластинчатые среды в чашках Петри. Кусочки исследуемого материала помещают на поверхность среды и растирают или при помощи пинцета с изогнутыми браншами, или стеклянным шпателем. При таком способе посева получается истинная картина уровня микробной контаминации внутренних органов. Первичный посев проводят на рыбо-пептонный и мясопептонный агары (МПА, РПА) или эритритагар (для определения уровня общей обсемененности), среду Эндо (для выделения бактерий кишечной группы, аэромонад и псевдомонад), Риппея-Кабелли (для выделения аэромонад), Анакера-Орда-ла (для выделения миксобактерий), дифференциально-диагностический агар (для выделения вибрионов), элективные среды для выделения возбудителей бактериальной почечной болезни и др. После инкубирования при соответствующей температуре подозрительные колонии пересевают на первично-дифференцирую-Щую среду Кл игл ера или скошенный агар. Культуральные и ферментативные свойства изучают с использованием «пестрого ряда» Гисса — сред, содержащих различные углеводы, спирты, белки, Жиры и др. У выделяемых культур обязательно определяют чувствительность к антибактериальным препаратам методом диффузии в агаре с помощью индикаторных дисков или методом серийных разведений.

Для уточнения этиологической роли выделенного возбудителя изучают его вирулентные свойства. Традиционным методом является постановка биопробы. Для этого необходима рыба из благополучного хозяйства, соответствующей возрастной группы и вида. Для определения степени вирулентности выделяемых штаммов широко используется метод определения ДНК-азной активности, который позволяет на одной чашке проверить одновременно 16—20 культур.

В качестве патогенных и условнопатогенных бактерий у рыб согласно Определителю бактерий Берджи встречаются представители группы 4, родов

Acinetobacter, Alcaligenes, Flavobacterium, Moraxella, Pseudomonas; группы 5, подгруппы 1, сем. Enterobacteriaceae, Edwardsiella, Enterobacter, Klebsiella, Proteus, Yersinia; подгруппы 2, сем. Vibrionaceae родов Aeromonas, Plesiomonas, Vibrio; группы 15, подгруппы 1, родов Cytophaga, Flexibacter и

некоторые другие.

Для лечения и профилактики бактериальных болезней широкое применение нашли нитрофураны, сульфамидные препараты и антибиотики. Бесконтрольное использование их приводит к развитию устойчивости к ним микроорганизмов и даже формирует у них антибиотикозависимость. Применение в таких случаях лекарственных препаратов только ухудшает ситуацию. В связи с этим перед применением антибактериальных препаратов необходимо определить чувствительность к ним выделенных штаммов и

135

выбрать наиболее эффективные.

Прогрессивным методом профилактики бактериозов является использование вакцин и биопрепаратов. В мировой практике уже применяется ряд коммерческих вакцин против вибриоза, фурункулеза, йерсиниоза, бактериальной почечной болезни.

В нашей стране успешно прошло производственное испытание биохимической вакцины ВЮС-2 против бактериальной геморрагической септицемии и бактерина при вибриозе.

Все более широкое применение в пресноводной аквакультуре России находят пробиотики. Такие микробные биопрепараты, как азогилин, лактобактерин и субалин, нормализующие бактериальную флору, благотворно влияют на организм рыбы, повышая его общую резистентность.

6.1. БОЛЕЗНИ, ВЫЗЫВАЕМЫЕ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫМИ ОКСИДАЗОПОЛОЖИТЕЛЬНЫМИ БАКТЕРИЯМИ

К этой группе заболеваний относятся фурункулез, этиологическим агентом которого являются неподвижные Aeromonas salmonicida, аэромоноз, вызываемый подвижными аэромонадами, псевдомоноз, вибриоз.

1Определитель бактерий Берджи. Под ред. Дж. Хоулта и др., изд. 9-е.

—М.: Мир, 1997.

6.1.1. ФУРУНКУЛЕЗ

Весьма серьезную проблему при культивировании лососей и форели представляет фурункулез — септическое заболевание, известное в Западной Европе с 1894 г., в США — с 1902 г. В настоящее время оно регистрируется повсеместно. В России имеется природный очаг на Дальнем Востоке.

Этиология. Возбудителем заболевания является Aeromonas salmonicida,

сем. Vibrionaceae.

Это короткие, грамнегативные палочки, не обладающие подвижностью (коккоиды) (рис. 22). На мясопептонном агаре, агаре Д, триптиказасоевом агаре растут в виде небольших, слегка уплощенных (R-форма) или влажных выпуклых (S-форма) колоний. При первичном посеве рост замедленный (36—48 ч), температурный оптимум 20—25 °С. При 37 0С не растет. На мясопептонном бульоне имеет характерный придонный рост. На агаровых средах и МПБ на 2—4-е сутки A. salmonicida образует коричневый, диффундирующий в среду пигмент различной интенсивности. Обладает слабой резистентностью к антагонистическому действию сапрофитной флоры, поэтому нужна особая внимательность при просмотре первичных посевов. A. salmonicida обладает цитохромоксидазой и ДНК-азой. На средах с глюкозой и глицерином растет с газообразованием; другие ферментативные характеристики могут варьировать.

В настоящее время выделены три подвида: A. salmonicida subsp.

136

salmonicida, A. salmonicida subsp. achromogenes и A. salmonicida subsp. masoucida, различающиеся по пигментооб-разованию, ферментативной характеристике и вирулентности.

A. salmonicida subsp. salmonicida не ферментируют лактозу и сахарозу,

активно вырабатывают коричневый водорастворимый пигмент и обусловливают выраженную картину острого фурункулеза с поражением внутренних органов. A. salmonicida subsp. achromogenes и A. salmonicida subsp. masoucida характеризуются отсутствием или замедленным пигментооб-Разованием, ферментацией сахарозы. В отличие от классического штамма дальневосточные штаммы активно вырабатывают коричневый пигмент, но ферментируют сахарозу.

Рис 22. Aeromonas salmonicida —A. salmonicida subsp. salmonicida возбудитель фурункулеза

Эпизоотология. Высокой чувствительностью к фурункулезу отличаются многие виды лососевых, среди которых могут возникать вспышки, приводящие к 100%-ной гибели рыб. Им поражаются также золотой карась, карп, плотва, елец, голавль, линь, щука, окунь, бычок-рогач, канальный сом, речная минога, хариус, сиг, угольная рыба и другие пресноводные и аквариумные виды рыб.

Источником инфекции являются больные рыбы и рыбы-носители, которых из-за отсутствия признаков невозможно выявить. Из икры, контаминированной в период инкубации, выклевываются контаминированные личинки. При этом установлено, что бактерии не проникают внутрь икринки, а заражают ее наружно. При условии сохранения целостности оболочки гонад даже от больных производителей можно получить неконтаминированную икру.

Заболевание рыб фурункулезом чаще всего проявляется весной и летом, но при неблагоприятных условиях может возникнуть и в осеннезимний период, а у проходных лососевых рыб — в период нерестовых

137

миграций в реки.

Возбудитель активизируется при отрицательном влиянии на рыбуноситель факторов окружающей среды, особенно температуры воды, а также гипоксии. У старых особей бактерии обычно скапливаются под кожей, вызывая появление характерных фурункулов, которые являются основным проявлением болезни и главным источником инфекции при их прорыве.

В незагрязненной органическими веществами чистой воде A. salmonicida выживает не более 1 нед. Может сохраняться, а при подходящей температуре даже размножаться в иловых отложениях. Между эпизоотиями живет в почках рыб-носителей, однако естественный путь распространения возбудителя до сих пор не установлен.

Инкубационный период зависит от температуры воды и физиологического состояния рыбы и может составлять от двух дней до нескольких недель.

Клиническая картина и патогенез. Фурункулез — высококонтагиозная болезнь, которая может протекать остро, подостро и хронически.

Развитие клинических признаков заболевания зависит как от места проникновения возбудителя в организм рыбы, так и от степени вирулентности культур. Последняя, в свою очередь, зависит от ряда причин: уровня содержания липополисахаридов, наличия токсинов, ферментов и других факторов патогенности.

При острой форме развиваются генерализованная септицемия, воспаление кишечника, некроз почек, геморрагическое воспаление печени, миокарда внутренней стенки брюшной полости. При этой форме фурункулеза гибель рыбы достигает 80—100 % в течение нескольких дней. В некоторых случаях наблюдается молниеносная форма фурункулеза, когда не успевают развиться клинические признаки заболевания и рыба погибает в течение нескольких часов при массивной бактериемии.

Для хронической формы фурункулеза, кроме развития септического процесса, характерно появление под кожей и в мышцах флюктуирующих (переливающихся) опухолей — «фурункулов», заполненных экссудатом, некротизированной мышечной тканью^ кровью и бактериями A. salmonicida. При прорыве такого фурункула образуется язва с неровным краем, на месте которой при выздоровлении формируется темный рубец (см. цв. вкл. табл. VI).

Патологоанатомическая картина характеризуется некрозом тканей почек с аккумуляцией бактерий в клубочках, потемнением и увеличением селезенки, петехиями в мышцах, наружных оболочках, брыжейке, плавательном пузыре.

У погибшей форели гемопоэтические ткани в передней и задней почках полностью разрушаются. Селезенка вследствие потери фолликулярной структуры становится волокнистой. Нижний отдел кишечника часто очень воспален и при надавливании на брюшко из ануса могут наблюдаться кровянистые выделения.

Диагноз. Его ставят на основании клинических признаков, па-тол

138

огоанатомических изменений, результатов бактериологических исследований

иположительных биопроб.

A. salmonicida практически в чистом виде выделяется из невскрывшихся абцессов, а при развитии септического процесса — из почек, печени, крови.

Меры борьбы. В неблагополучных по фурункулезу прудовых, озерных рыбных хозяйствах, на рыбоводных заводах, выращивающих товарных двухлетков лосося, устанавливают карантин, а на заводах, занимающихся воспроизводством тихоокеанских лососей, ограничения.

Во избежание дальнейшего распространения заболевания разрабатывается комплекс лечебно-профилактических мероприятий.

Для предотвращения заноса возбудителя вместе с икрой ее обрабатывают акрифлавином, формалином или иодинолом. С лечебной целью больным рыбам дают с кормом сульфаниламидные Препараты (120 мг/кг массы рыбы), левомицетин или окситетра-Циклин (7,5 мг/кг массы рыбы) в течение 2 нед. За рубежом используют коммерческие вакцины, которые производят несколько фирм.

6.1.2. ЭРИТРОДЕРМАТИТ КАРПА

Эритродерматит — заболевание карпа, характеризующееся образованием обширных поверхностных поражений.

Этиология. Возбудитель эритродерматита — A. salmonicida subsp. achromogenes, неподвижная грамотрицательная палочка, аХромогенный подвид A. salmonicida.

Экспериментально было доказано, что токсической субстанцией, вызывающей специфические симптомы заболевания, является бактериальный экзотоксин белковой природы.

Эпизоотология. Заболевание встречается в странах с развитым карповодством у карповых рыб. Оно поражает рыб, начиная с двухлетнего возраста и в период полового созревания. Среди производителей старшего возраста гибель может достигать 45-90 %.

Вспышки эритродерматита возникают весной при повышении температуры воды до 18—20 0С. Факторами, провоцирующими заболевание, являются травмы (сбитая чешуя, поверхностные повреждения кожи) и большое содержание органических веществ в воде.

Факторами передачи заболевания являются вода из неблагополучных прудов и перевозки инфицированной рыбы. Источник инфекции — больная рыба.

Заболевание зарегистрировано в России (Московская область) и Латвии. Распространение его, вероятно, более значительно, если учесть количество этиологически не расшифрованных язвенных поражений карпа в нашей стране.

Клинические признаки и патогенез. Эритродерматит карпа —

139

контагиозное заболевание кожи, протекающее в подострой или хронической форме. Инфекция часто начинается на участке поврежденного эпидермиса. Геморрагический воспалительный процесс развивается между эпидермисом и дермой. По мере распространения инфекции зона воспаления постепенно расширяется, разрушение ткани приводит к формированию язвы. На конечной стадии может развиться генерализованный отек.

Диагноз. Его ставят на основании клинических, патологоанатомических данных, результатов микробиологических исследований с обязательной постановкой биопробы.

При этом проводят дифференциальную диагностику, исключая возбудителей бактериальной геморрагической септицемии, в частности аэромонад.

Исследованию подвергают не менее 5 живых рыб с клиническими признаками. Материал отбирают из воспаленных участков кожи. Для этого поверхность кожи вокруг язвы и язву очищают от некротизированных масс скальпелем, тщательно промывают стерильным изотоническим раствором хлорида натрия и отсекают кожный лоскут, захватывая примерно по 1 см воспаленной зоны вокруг язвы. Отсепарированную кожу помещают в стерильную ступку, измельчают стерильными ножницами и тщательно растирают с кварцевым песком, добавляя в ступку стерильный изотонический раствор хлорида натрия (примерно 1 : 10), перемешивают и дают отстояться. На чашки Петри со средами МПА и Эндо наносят по одной капле надосадочной жидкости и растирают шпателем.

Для исключения аэромоноза от этих же рыб делают посев паренхиматозных органов на такие же среды. Обнаружение в посевах из кожи и отсутствие в посевах из паренхиматозных органов влажных, слегка уплощенных светло-кремовых или сероватых колоний позволяет предположить эритродерматит карпа. Выделенные колонии пересевают на первично-дифференциру-юшую среду Клиглера для дальнейшей идентификации аэромонад, которую проводят по общепринятой методике. Для подтверждения этиологической роли выделенного возбудителя проводят биопробу методом скарификации, не повреждая слой дермы. На скарифицированную поверхность наносят несколько капель суточной бульонной культуры выделенных штаммов аэромонад.

Если в течение 2 нед на скарифицированной поверхности появляется гиперемия и развиваются язвы, биопроба считается положительной и диагноз на эритродерматит считают установленным.

Меры борьбы. Профилактика эритродерматита заключается в строгом соблюдении рыбоводно-мелиоративных и ветеринарно-санитарных требований при выращивании рыбы, максимальном исключении ее травматизации на всех этапах, особенно при пересадке весной из зимовальных в нагульные пруды.

Имеющийся опыт лечения больной рыбы заключается в использовании антибактериальных препаратов после определения чувствительности к ним выделенных штаммов бактерий.

140