Методы хранения микроорганизмов

Методы

непродолжительного хранения микроорганизмов

•Субкультивирование

•Хранение под минеральным маслом

•Хранение в воде и водно-солевых растворах

•Хранение высушиванием на твердых носителях

•Хранение замораживанием при температурах ниже точки кристаллизации воды

Субкультивирование

Преимущества и недостатки метода.

+Прост в исполнении и используется для многих микроорганизмов.

+Общедоступен и позволяет легко контролировать чистоту штаммов

-Необходимость соблюдения регламентов пересевов, потребность в большом количестве посуды, питательных сред

-Значительные затраты времени, риск загрязнения культуры, случаи селекции, риски потерь культур и т.д.

-При частых пересевах штаммы- продуценты из-за спонтанной диссоциации нередко могут терять или снижать способность к выработке целевых продуктов.

Хранение под минеральным маслом

•Слой масла служит защитой культур от высыхания, одновременно понижая их метаболизм. Покрытые маслом культуры хранят в вертикальном положении в холодильнике. Обычно культуры пересевают 1-2 раза в год на свежую среду.

•Недостатки метода. Этому методу присущи такие же недостатки, как и обычному субкультивированию. Кроме того, всегда велика вероятность загрязнения и потери штамма вследствие использования нестерильного масла.

Хранение в воде и водно­ солевых растворах

•Микробные клетки переходят в покоящееся состояние – гипобиоз.

•Техника проведения.

Клетки вносят в пробирку с индифферентной жидкостью с физиологическим ионным составом и подходящим рН. Пробирки хранят в холодильнике при температуре 4-8 °C.

•Недостатки метода. Велика вероятность загрязнения штаммов вследствие благоприятных условий (влажность и температура) для роста грибной флоры во внутреннем объеме пробирки.

Хранение высушиванием на твердых носителях

•Некоторые культуры, особенно спорообразующие, если были высушены в подходящих для них носителях, сорбирующих влагу, можно сохранить годами.

•В практике используются самые разнообразные носители -почва, песок, бумага, смолы, желатин, активный уголь, зерна злаков и многие другие.

Хранение замораживанием

•От хранения в водно-солевых растворах данный метод отличается тем, что образцы помещают в морозильную камеру холодильника при температуре от -10 до -20 °С.

•Такой прием замораживания проб позволяет заметно продлить сохранность штаммов и уменьшить вероятность их загрязнений. Некоторые бактерии так хранились от 6 месяцев до 2 лет.

•Недостатки метода. Такой способ хранения не рекомендуется применять для криочувствительных бактерий и высокой вероятности генетического обмена между клетками, что может способствовать неконтролируемой селекции культуры.

Методы длительного хранения микроорганизмов

•Консервация замораживанием при низких температурах

•Консервирование высушиванием из замороженного состояния

•Консервирование высушиванием из жидкого состояния

Высокий эффект консервации данными методами достигается тем, что клетки, лишаясь свободной воды в условиях субнулевых и(или) криогенных температур, переходят в состояние анабиоза.

Консервация

замораживанием при низких

температурах

• Практически все известные группы бактерий способны длительно храниться в замороженном состоянии при низких температурах (температуры ниже 120 К, т.е. менее минус 153 °С).

• Криоконсервация в жидком азоте или его паре является основным для большинства коллекций культур

Консервация

замораживанием при низких

температурах

• Криопротекторы-вещества, защищающие живые объекты от повреждающего действия замораживания