Экзаменационные вопросы по Микробиологии / экзаменационные бактерии / 122-123-124-125

Вопрос 122. Диагностика брюшного тифа, паратифов А и В, сальмонеллезов. Выбор метода диагностики зависит от а) клинических проявлений б) места локализации возбудителя в) фазы патогенеза болезни. При брюшном тифе самый ранний метод диагностики - бактериологическое выделение возбудителя из крови – гемокультура (соответствует бактеримии - первой неделе клинических проявлений болезни). Начиная со второй недели возможно обнаружение АТ (в организме формируется ГИО): постановка РА по Видалю, РПГА, латексагглютинации. Начиная с третьей недели заболевания возбудитель вновь оказывается в кишечнике и может быть обнаружен бактериологически в испражнениях больного - "метод копрокультуры". На 6-8-й неделе болезни и в период реконвалесценции, для диагностики бактерионосительства следует использовать как бактериологическое, так и серологическое исследования (многократное исследование копрокультуры, холекультуры, иногда миелокультуры и обнаружение Vi-АТ в сыворотке или копрофильтратах). Бактериологический метод. Материал для исследования: кровь, фекальные массы. Кровь берется из локтевой вены в количестве 10-15 мл до начала антибактериальной терапии. 1-й этап: посев венозной крови на среду обогащения Рапопорта (МПБ, глюкоза, желчь) + индикатор. 2-й этап: а) учет среды Рапопорта (покраснение среды без газа в поплавке -возбудитель брюшного тифа, покраснение с газом в поплавке -возбудители паратифов или сальмонеллезов); б) микроскопия роста; в) пересев на дифференциально-диагностические среды Эндо, Левина или Плоскирева; 3-й этап: а) обнаружение бесцветных колоний на этих средах; б) микроскопия подозрительных колоний (бесцветные, т.к. не ферментируют лактозу) в) пересев на среду Олькеницкого или Кливлера. 4-й этап: а) учет роста на среде Олькеницкого или Кливлера; б) определение чистоты выделенной культуры; в) установление антигенной структуры. Сначала в РА на стекле с монорецепторными сыворотками к О-антигенам, затем в такой же реакции с сыворотками к специфическим антигенам (в пределах данной группы); г) определение дополнительных биохимических и морфологических свойств (разложение индола, подвижность); д) определение чувствительности к поливалентным видоспецифическим бактериофагам; е) определение чувствительности к антибиотикам (методом бумажных дисков, серийных разведений или Е-тестом – аналогом диско-диффузионного метода) Серологическая диагностика. Иммунитет стойкий, повторные заболевания редки. Появляются сначала IgM, затем IgG, на 5-6-ой день – геммаглютинины. В начале болезни в сыворотке определяются О-АТ. В разгар много О-АТ и Н-АТ диагностического титра. Можно выявить Vi-АТ. В конце болезни много Н-АТ и мало О-АТ. К выздоровлению титр О-АТ падает. Если человек переболел брюшным тифом, в сыворотке остаются Н-АТ. Реакция Видаля. Ставится с четырьмя диагностикумами. Готовят разведения сыворотки от 1/50 до 1/800, контроль сыворотки и АГ. В 1-й ряд добавляют тифозный диагностикум для выявления О-АТ, во 2-й – тифозный НD- диагностикум, в 3-й – паратифозный А диагностикум, в 4-й – паратифозный В диагностикум. Учет РА. Диагностический титр 1:200.

Вопрос 123. Возбудитель дизентерии. 1. Классификация: надцарство Procaryota, царство Bacteria, раздел Scotobacteria, класс Bacterias, порядок Eubacteriales, семейство Enterobacteriaceae, р. Shigella, в. S. dysenteriae, S. flexieri, S. boydii, S. sonnei. 2. Морфология: Гр-, палочка, нет жгутиков, есть пили, есть капсула, споронеобразующие, подвижны. 3. Тип питания: хемоорганотроф, ФАН. 4. Биологические свойства: а) нетребовательны к питательным средам б) колонии двух типов (R- и S-) в) ферментируют сахара до кислот. 5. АГ структура: О-АГ, К-АГ (шигеллы Флекснера). Есть перекрестно-реагирующие АГ с другими энтеробактериями. 6. Факторы патогенности и патогенез: а) адгезины (микрокапсула, пили) б) инвазины (муциназа, третья секреторная система – также предотвращает переваривание шигелл внутри клеток) в) эндотоксин (ЛПС) – диарея, поражение НС и ССС. г) цитотоксин – поражает энтероциты, нейроны, кл миокарда. Адгезия на энтероцитах толстой кишки  инвазия в энтероциты  фагоцитоз макрофагами в подслизистом слое  гибель макрофагов, выделение цитокинов  воспалительный процесс в подслизистой  нарушение межклеточных контактов  попадание МБ в активированные ими энтероциты  распространение по соседним клеткам  разрушение слизистой с образованием язв, продукция токсинов. 7. Клинические проявления: диарея с примесью крови и гноя, общие признаки интоксикации. 8. Иммунитет: местный (микрофаги, Т—лимфоциты, sIgA) и общий. Постинфекционный иммунитет непродолжительный видо- и типоспецифический. 9. Эпидемиология. Источник – больные люди и бактерионосители. ОПЗ – алиментарный, иногда контактно-бытовой. Быстро изменяют чувствительность к разным антибактериальным средствам в зависимости от частоты их применения в том или ином регионе 10. Профилактика: специфическая – гретые, формалинизированные, химические вакцины – не решили проблему. 11. Лечение: Фторхинолоны, реже АБ. 12. Диагностика: Материал для исследования: испражнения, сыворотка крови. Бактериологический метод. 1-ый этап: посев на дифференциально-диагностические среды (Плоскирева и т.д.). Оценка характера и цвета колоний, мазок по Гр, РА на стекле со смесями дизентерийных сывороток. 2-ой этап: пересев бесцветных колоний на среду Ресселя или трехсахарную среду. Мазок по Гр, регистрация изменений цвета среды. Посев на пестрый ряд. РА со смесями дизентерийных сывороток, затем – с видовыми и типовыми сыворотками. Серодиагностика. РА по типу реакции Видаля с дизентерийными диагностикумами, РПГА с эритроцитарными диагностикумами.

Вопрос 124. Возбудители клебсиеллезов. 1. Классификация: ФАН палочки, с.Enterobacteriaceae, р. Klebsiella, в. K.pneumoniae, K. rhinoscleromatis, K.ozaenae 2. Морфология: Гр-, короткие толстые палочки, жгутиков нет, имеют выраженную капсулу, споронеобразующие, неподвижны 3. Тип питания: хемоорганотрофы 4. Биологические свойства: а) растут на простых средах б) ферментируют гл с кислотой и газом, сорбит. 5. АГ структура: К-АГ, О-АГ. 6. Факторы патогенности и патогенез: а) полисахаридная капсула б) адгезины (пили, поверхностные белки адгезии) в) инвазины (белки-порины) г) сидерофорная система (хелаторы железа аэробактин, энтеробактин) – связывает ионы железа д) система секреции 3-его типа е) термо- и кислотостабильный токсин – активирует гуанилатциклазу ж) термолабильный токсин (цитотоксин) – опосредует проникновение в кровоток з) β-лактамаза – устойчивость к лактамным АБ Адгезия, размножение и колонизация энтероцитов  секреция токсинов, обеспечивающих разнообразные патологии. 7. Клинические проявления: I. К.pneumoniae: долевые пневмонии (деструкция легочной паренхимы с формированием абсцессов, эмпием и плевральных спаек), госпитальные бронхиты, бронхопневмонии. Возможны вторичные поражения мочевыводящих путей, мозговых оболочек, суставов, глаз, бактериемии и септикопиемии. II. K.ozaenae: озена (хронический атрофический зловонный насморк): атрофия слизистой носа и подлежащего костного скелета, образование плотных корок, неприятный запах из носа, потеря обоняния. III. K. rhinoscleromatis: риносклерома (хроническое гранулематозное заболевание дыхательных путей): нарушение дыхания  истощение. 8. Иммунитет: ГИО (АТ не обладают протективными свойствами), КИО, ГЗТ. 9. Эпидемиология. Источник – больные и носители. ОПЗ – аэрозольно. Резистентны к факторам окружающей среды, размножаются в холодильнике, чувствительны к растворам обычных дезинфектантов. 10. Профилактика: специфическая вакцинопрофилактика не разработана. 11. Лечение: цефалоспорины третьего поколения. 12. Диагностика: Лабораторная диагностика проводится двумя методами: бактериологический и серологический. Питательные среды: 1. Дифференциально-диагностическая среда - ЛБТА (лактозобромтимоловый агар с пенициллином). Содержит МПА+ лактоза+бромтимоловый синий. К.склеромы, не разлагающая лактозу, дает колонии цвета среды, К.пневмонии - желтые, К.озены - либо желтые, либо цвета среды. 2. Модифицированная среда Ресселя кроме глюкозы (в столбике) и лактозы (в скосе) содержит индикатор бромтимоловый синий, соль Мора и гипосульфит (на H2S). К. склеромы дает пожелтение только столбика, К. пневмонии - пожелтение и разрыв всей среды, К. озены - различные варианты. 3. Среда Симмонса для утилизации цитрата натрия (индикатор бромтимоловый синий). В положительных случаях появляется рост и среда синеет, в отрицательных случаях роста нет и среда не изменяется. 4. Среда с малонатом натрия (индикатор бромтимоловый синий). При утилизации малоната - среда интенсивно синего цвета, отрицательная реакция - среда желтая. Бактериологическая диагностика. Материал для исследования: содержимое носа, глотки, носоглотки. Схема исследования: 1-й этап - посев материала петлей или тампоном на ЛБТА, или на пенициллиновый агар; 2-й этап: а) учет роста на чашках. Колонии клебсиелл - крупные, выпуклые, влажные, блестящие. На ЛБТА цвет колоний зависит от вида клебсиелл; б) посев колоний на модифицированную среду Ресселя или косой агар; 3-й этап - идентификация выделенной культуры: а) мазок по Граму; б) препарат по Гинса-Бурри; в) определение биохимических свойств (см. таблицу); г) определение антигенной формулы с помощью клебсиеллезных сывороток О и К (РА на стекле, РА в пробирках, РИФ). Серологическая диагностика: используют РСК и РПГА со склеромным и озенозным диагностикумами.

Вопрос 125. Возбудитель кишечного иерсиниоза. 1. Классификация: ФАН палочки, с.Enterobacteriaceae, р. Yersinia, в. Y.enterocolitica. 2. Морфология: Гр-, палочки, имеет перитрихии и пили, микрокапсулу, споронеобразующие, подвижны, окрашиваются биполярно 3. Тип питания: хемоорганотрофы 4. Биологические свойства: а) хорошо растут на простых питательных средах б) ферментируют гл, сахарозу, проявляют пектиназную активность 5. АГ структура: О-АГ, Н-АГ. 6. Факторы патогенности и патогенез: а) адгезины (пили – соединяются с фибронектином, белки наружной мембраны) б) инвазины – облегчают взаимодействие с кишечным эпителием в) фосфатаза и протеинкиназа – нарушают функцию макрофагов г) энтеротоксин и эндотоксин (ЛПС) Проникновение в слизистую дистального отделе тонкой кишки  размножение в пейеровых бляшках  проникновение в брыжеечные л. у. (мезентериальный лимфаденит)  бактериемия (генерализация инфекции)  проникновение в органы и ткани (печень, селезенка, лимфатические узлы). В случае незавершенного фагоцитоза возможна длительная персистенция МБ. Вследствие этого может развиться вторично-очаговая форма с поражением любого органа (сердца, печени, суставов, легких) либо возникновение обострений и рецидивов. Большое значение имеют аллергический компонент и аутоиммунные процессы. 7. Клинические проявления: Инкубационный период около 3 дней. Заболевание начинается остро. Симптомы общей интоксикации. Температура тела субфебрильная. Часто на первый план выступают признаки поражения желудочно-кишечного тракта (боли в животе, тошнота, рвота, понос). На коже иногда появляется сыпь. Проявляются симптомы вторичного поражения органов. 8. Иммунитет: изучен недостаточно, вначале заболевания преобладает ГИО. 9. Эпидемиология. Источник – больные люди и животные, носители. ОПЗ – алиментарно. Устойчивы к низкой температуре (размножаются даже в холодильнике). Погибают при высыхании, воздействии солнечного света и различных химических веществ (хлорамина, спирта), при кипячении. 10. Профилактика: специфическая не разработана. 11. Лечение: АБ широкого спектра действия. 12. Диагностика: Метод: бактериологический. Материал для исследования: при кишечной форме возбудитель выделяют из испражнений; при аппендикулярной - из мезентериальных лимфатических узлов и крови; при септической - из испражнений и крови. 1-й этап: материал засевают петлей или тампоном на одну из плотных элективных сред (Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитагар). Посевы инкубируют в течение 24 часов при 37°С, а затем дополнительно 24 часа при 20-22°С. Одновременно испражнения засевают в одну из сред накопления (МПБ или пептоннуюводу). Кровь засевают в соотношении 1:10 только в среды накопления. Посевы помещают при 4-5°С и выдерживают до 30 суток, периодически высевая через каждые 3-5 дней на плотные элективные среды. Y.enterocolitica при низкой температуре размножаются в этих средах, в то время как сальмонеллы, шигеллы, кишечная палочка, протей не размножаются. 2-й этап: просматривают посевы на плотных средах и отбирают подозрительные колонии (округлые, сероватого цвета на Эндо и Плоскирева и коричневого на висмут-сульфитагаре), Из колоний делают мазки по Граму и при наличии грам/- палочек отсевают на среду Ресселя. 3-й этап: при изменении цвета столбика на среде Ресселя из роста на ней делают мазок по Граму на чистоту культуры и изучают следующие тесты: 4-й этап: учет результатов и выдача окончательного ответа. При серологическом методе исследования кровь берут в конце первой и начале третьей недели. Ставят развернутую реакцию агглютинации с аутоштаммами и парными сыворотками больного. При положительном результате отмечается значительное нарастание титра антител.