Флуориметрические методы и средства лабораторного анализа
Эффект флуоресценции заключается в том, что исследуемый объект светится под влиянием облучения светом с более короткой длиной волны. Если световая энергия, поглощенная атомами или молекулами, отдается ими в виде светового же излучения, то такое явление называется флуоресценцией.
Спектр излучения флуоресценции многих веществ носит избирательный характер. Как и в случае спектров поглощения, избирательность обусловлена структурой и составом излучающего вещества. Спектры излучения растворов при флуоресцентных измерениях состоят из широкой полосы с максимумом при некоторой длине волны.
1) Спектр излучения не зависит от длины волны возбуждающего света. Это правило показывает, что спектр флуоресценции характеризует исследуемое
вещество и является основой для обнаружения и идентификации этих веществ.
2) Вторым правилом является правило Стокса, согласно которому спектр флуоресценции и его максимум по сравнению со спектром абсорбции смещен в
сторону больших длин волн.
Примеры спектров
•Например, растворы, облученные световой энергией в ультрафиолетовом диапазоне, могут флуоресцировать любым светом, а растворы, флуоресценция которых возбуждается зеленым светом, не могут светиться фиолетовым и синим, а только желтым и красным, словом, таким светом, который соответствует большим длинам волн. Для большинства веществ кривые спектров излучения и поглощения перекрываются. Количественное преобразование возбуждающей энергии в энергию флуоресценции определяется выходом флуоресценции.
Физический эффект флуоресценции заключается в том, что молекула исследуемого вещества поглощает квант света возбуждения и при этом переходит в новое, энергетически более богатое состояние, через некоторый микропромежуток времени она излучает избыточную энергию в виде кванта света флуоресценции.
