Добавил:
Upload
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:акушерство / 27 разбавление расфасовка и режимы хранения спермы
.txt 27. Разбавления, расфасовки и режимы хранения спермы. Состав разбавителей спермы быка для кратковременного и длительного хранения.
Чтобы увеличить объем эякулята, а также для того, чтобы сохранить оплодотворяющую способность спермиев на более длительный срок при хранении спермы вне организма, надо разбавить сперму специальными биологическими и синтетическими средами.Среды для разбавления спермы должны иметь определенные физико-химические свойства и такую концентрацию составных веществ (компонентов), при которой осмотическое давление было бы наиболее благоприятным для жизнеспособности спермиев того или иного вида животных. . Избыточная кислотность и чрезмерная щелочность, как указывалось, убивают спермиев. Следовательно, в разбавители спермы могут входить слабые кислоты и щелочи в незначительных количествах. Разбавители не должны содержать солей многовалентных металлов (свинца, олова и др.), а также различных ядовитых и пахучих веществ, губительно действующих на спермиев..В разбавители вводят сахара (неэлектролиты): глюкозу или лактозу и др., которые служат спермиям энергетическим материалом для гликолиза (фруктолиза) и процессов дыхания. Сахара можно заменять гликоколом (аминоуксусной кислотой), медом.Разбавитель должен устранять или ослаблять температурный шок (холодовый удар) спермиев. Для этого в состав разбавителей введен желток куриного яйца, содержащий лецитин и повышающий устойчивость спермиев к резкому охлаждению, а при замораживании — глицерин.В сперме барана или быка при хранении образуется молочная кислота; желток куриного яйца, вводимый в разбавитель, имеет реакцию более кислую, чем сперма (рН 6,2). Естественная буферная способность спермы не может! полностью нейтрализовать молочную кислоту и кислотность желтка куриного яйца. Поэтому в состав разбавителей спермы быка и барана нужно вводить ли монно-кислый натрий (цитрат), являющийся буфером и имеющий несколько щелочную реакцию (рН 7,8—8,0); он нейтрализует излишнюю кислотность.Для.предупреждения развития микроорганизмов в сохраняемой сперме в разбавители добавляют антибиотики и сульфаниламидные препараты (стрептомицин, пенициллин и стрептоцид или спермосан-3) в дозах, указанных в действующих инструкциях по искусственному осеменению (санация спермы).Среды, применяемые для разбавления спермы, должны быть стерильными.В. К. Милованов (.1962) предложил различать три класса синтетических сред или разбавителей спермы в за висимости от их состава и назначения:класс А — экстендоры (от лат. экстендо — увеличи вать, расширять). Это сахаросолевые растворы, применяемые для разбавления спермы с целью увеличения ее объема, но без охлаждения, хранения и транспортиров ки (глюкозо-фосфатные, глюкозные и др.);класс Б — протекторы (защитные среды). Представляют собой те же экстендоры, но с добавлением к ним желтка куриного яйца, глицерина или других веществ, предохраняющих спермин от холодового удара и кристаллизации при замораживании;класс В — имплементоры (оснащенные), то же экс тендоры или протекторы, но к ним добавлены специаль ные вещества, воздействующие на органы размножения самок при осеменении, например ферменты (муциназа), нейротропные (прозерин, карбахолин), гормональные (окситоцин, питуитрин) и другие вещества. Муциназа, например, разжижает связь в шейке матки и способствует таким образом продвижению спермиев. Гормональ ные и нейротропные препараты вызывают усиление сокращения матки.Техника разбавления спермы.Сперму нужно разбавлять не позже чем через 5—10 мин после ее получения на искусственную вагину. Разбавитель нагревают до температуры (25—-30 °С), близкой к температуре спермы. Для этого посуду с разбавителем ставят в теплую воду с температурой около 35 °С. Вместе с тем полученную сперму постепенно охлаждают к моменту разбавления до такой же температуры, что и разбавитель, измеренное количество спермы медленно, топкий струйкой по стенкам вливают порциями отмерен ем разбавителя, слегка перемешивая покачиванием емкости. , каплю разбавленномй спермы просматривают под микроскопом. Если оценка по подвижности спермиев резко снизилась, то разбавленую сперму бракуют, а разбавитель готовят снова.Наполненные флаконы сразу же закрывают пробка ми из белой резины и прикрепляют к ним сопроводительные этикетки. Ампулы запаивают и маркируют. Хранение..Существующие способы хранения спермиев вне организма, основаны на их физиологической способности переходить в состояние анабиоза, в котором они находятся, продвигаясь по каналу придатка тестикула. В естественных условиях анабиоз спермиев вызывается повышенным содержанием угольной кислоты (кислотный анабиоз). Следовательно, в соответствующих условиях можно хранить сперму вне организма при плюсовой температуре.. При неполном анабиозе, когда обмен веществ в спермиях только ослабляется в той или иной степени, возможно только краткосрочное их хранение (1-3 сут). При полном анабиозе обмен веществ почти прекращается, благодаря чему создается возможность длительного хранения спермиев (на протяжении нескольких лет). Полный анабиоз достигается при замораживании спермы.Кратковременное хранение спермы при комнатной температуре (16--20 °С). Для хранения спермы хряков широко используют хелатные среды. Хелатон (трилон Б) -сокращенное название двунатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты. Это соединение при комнатной температуре инактивирует ферменты, подавляя, таким образом, обмен веществ у спермиев. Действие хелатона снимается, если сперма оказывается подогретой до температуры тела животного и спермин начинают двигаться. Это происходит после введения спермы, разбавленной хелатной средой, в половые органы самки. Известны также среды с угольной кислотой для хранения спермы быков, баранов и хряков при комнатной температуре, но они не получили широкого распространения.Кратковременное хранение спермы при температуре тающего льда (2-5 °С). Такая температура пригодна для хранения спермы быка, барана и жеребца. Температура, близкая к 0°С, значительно удлиняет переживаемость спермиев и замедляет обменные процессы; дыхание и фруктолиз спермиев быка и барана тормозятся в 20-25 раз по сравнению с интенсивностью этих процессов при температуре тела животных (Н. П. Шергин).Для охлаждения спермы используют холодильник или термосы различной конструкции, в которых температура до 2--5 °С. Применение желточных разбавителей значительно повышает устойчивость спермиев к температурному шоку, но полностью не устраняет его. Поэтому сперму необходимо охлаждать медленно и постепенно. После разбавления сперму быка выдерживают при комнатной температуре (18--20 °С) 20-- 30 мин. Затем ампулы, флаконы или пробирки со спермой обертывают небольшим слоем ваты, помещают в полиэтиленовые мешочки и кладут в холодильник или термос со льдом. Мешочки со спермой укладывают так, чтобы они сверху были закрыты кусочками льда, что обеспечивает необходимую температуру (2--5 °С). При такой методике хранения сперму быка используют для осеменения коров максимум 3 суток с активностью не ниже 7 баллов, хотя ее жизнеспособность сохраняется более длительное время.Через 24ч хранения разбавленной спермы быка при температуре 2°С перфораторий спермия несколько увеличивается, становится более контрастным, а через 72 ч он набухает и начинает распадаться (Г. В. Зверева и Л. А. Черномаз). Следовательно, качество спермы и ее оплодотворяющая способность с каждым днем хранения снижаются..Долговременное хранение спермы. В процессе хранения спермы при 2-5°С в ней протекают обменные процессы, отрицательно влияющие на оплодотворяющую способность спермиев. Длительное хранение половых клеток возможно только в условиях полного анабиоза, когда все биохимические процессы сильно замедляются. Для хранения спермы в жидком азоте используется специальное холодильное оборудование.Известно, что замороженная сперма сохраняет свои качества, когда ее хранят погруженной в жидкий азот.Транспортировка.При транспортировке спермы необходимо соблюдать условия, которые мо-гут сохранить ее жизнеспособность от момента получения до осеменения. Сперму обычно перевозят в термосах, в которых она хранится. При этом необходимо исключить возможность повреждений емкостей со спермой и термосов.Сперму, помещенную для кратковременного хранения, нужно предохранять от колебаний температуры. Замороженную сперму перевозят в сосудах Дьюара, в которых ее и хранят.При транспортировке таких сосудов с жидким азотом наземными видами транспорта их необходимо тщательно закреплять, так как падение сосуда может сопровождаться взрывом. При перевозке сосудов Дьюара на самолете их заполняют азотом только на половину гидравлической емкости.К каждой партии отправляемой спермы прикладывают ордер, в котором указывают дату и часы получения спермы, кличку производителя, дозу и оценку спермы.Транспортировка спермы должна проводиться с соблюдением всех правил действующей инструкции по искусственному осеменению животных данного вида.
Чтобы увеличить объем эякулята, а также для того, чтобы сохранить оплодотворяющую способность спермиев на более длительный срок при хранении спермы вне организма, надо разбавить сперму специальными биологическими и синтетическими средами.Среды для разбавления спермы должны иметь определенные физико-химические свойства и такую концентрацию составных веществ (компонентов), при которой осмотическое давление было бы наиболее благоприятным для жизнеспособности спермиев того или иного вида животных. . Избыточная кислотность и чрезмерная щелочность, как указывалось, убивают спермиев. Следовательно, в разбавители спермы могут входить слабые кислоты и щелочи в незначительных количествах. Разбавители не должны содержать солей многовалентных металлов (свинца, олова и др.), а также различных ядовитых и пахучих веществ, губительно действующих на спермиев..В разбавители вводят сахара (неэлектролиты): глюкозу или лактозу и др., которые служат спермиям энергетическим материалом для гликолиза (фруктолиза) и процессов дыхания. Сахара можно заменять гликоколом (аминоуксусной кислотой), медом.Разбавитель должен устранять или ослаблять температурный шок (холодовый удар) спермиев. Для этого в состав разбавителей введен желток куриного яйца, содержащий лецитин и повышающий устойчивость спермиев к резкому охлаждению, а при замораживании — глицерин.В сперме барана или быка при хранении образуется молочная кислота; желток куриного яйца, вводимый в разбавитель, имеет реакцию более кислую, чем сперма (рН 6,2). Естественная буферная способность спермы не может! полностью нейтрализовать молочную кислоту и кислотность желтка куриного яйца. Поэтому в состав разбавителей спермы быка и барана нужно вводить ли монно-кислый натрий (цитрат), являющийся буфером и имеющий несколько щелочную реакцию (рН 7,8—8,0); он нейтрализует излишнюю кислотность.Для.предупреждения развития микроорганизмов в сохраняемой сперме в разбавители добавляют антибиотики и сульфаниламидные препараты (стрептомицин, пенициллин и стрептоцид или спермосан-3) в дозах, указанных в действующих инструкциях по искусственному осеменению (санация спермы).Среды, применяемые для разбавления спермы, должны быть стерильными.В. К. Милованов (.1962) предложил различать три класса синтетических сред или разбавителей спермы в за висимости от их состава и назначения:класс А — экстендоры (от лат. экстендо — увеличи вать, расширять). Это сахаросолевые растворы, применяемые для разбавления спермы с целью увеличения ее объема, но без охлаждения, хранения и транспортиров ки (глюкозо-фосфатные, глюкозные и др.);класс Б — протекторы (защитные среды). Представляют собой те же экстендоры, но с добавлением к ним желтка куриного яйца, глицерина или других веществ, предохраняющих спермин от холодового удара и кристаллизации при замораживании;класс В — имплементоры (оснащенные), то же экс тендоры или протекторы, но к ним добавлены специаль ные вещества, воздействующие на органы размножения самок при осеменении, например ферменты (муциназа), нейротропные (прозерин, карбахолин), гормональные (окситоцин, питуитрин) и другие вещества. Муциназа, например, разжижает связь в шейке матки и способствует таким образом продвижению спермиев. Гормональ ные и нейротропные препараты вызывают усиление сокращения матки.Техника разбавления спермы.Сперму нужно разбавлять не позже чем через 5—10 мин после ее получения на искусственную вагину. Разбавитель нагревают до температуры (25—-30 °С), близкой к температуре спермы. Для этого посуду с разбавителем ставят в теплую воду с температурой около 35 °С. Вместе с тем полученную сперму постепенно охлаждают к моменту разбавления до такой же температуры, что и разбавитель, измеренное количество спермы медленно, топкий струйкой по стенкам вливают порциями отмерен ем разбавителя, слегка перемешивая покачиванием емкости. , каплю разбавленномй спермы просматривают под микроскопом. Если оценка по подвижности спермиев резко снизилась, то разбавленую сперму бракуют, а разбавитель готовят снова.Наполненные флаконы сразу же закрывают пробка ми из белой резины и прикрепляют к ним сопроводительные этикетки. Ампулы запаивают и маркируют. Хранение..Существующие способы хранения спермиев вне организма, основаны на их физиологической способности переходить в состояние анабиоза, в котором они находятся, продвигаясь по каналу придатка тестикула. В естественных условиях анабиоз спермиев вызывается повышенным содержанием угольной кислоты (кислотный анабиоз). Следовательно, в соответствующих условиях можно хранить сперму вне организма при плюсовой температуре.. При неполном анабиозе, когда обмен веществ в спермиях только ослабляется в той или иной степени, возможно только краткосрочное их хранение (1-3 сут). При полном анабиозе обмен веществ почти прекращается, благодаря чему создается возможность длительного хранения спермиев (на протяжении нескольких лет). Полный анабиоз достигается при замораживании спермы.Кратковременное хранение спермы при комнатной температуре (16--20 °С). Для хранения спермы хряков широко используют хелатные среды. Хелатон (трилон Б) -сокращенное название двунатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты. Это соединение при комнатной температуре инактивирует ферменты, подавляя, таким образом, обмен веществ у спермиев. Действие хелатона снимается, если сперма оказывается подогретой до температуры тела животного и спермин начинают двигаться. Это происходит после введения спермы, разбавленной хелатной средой, в половые органы самки. Известны также среды с угольной кислотой для хранения спермы быков, баранов и хряков при комнатной температуре, но они не получили широкого распространения.Кратковременное хранение спермы при температуре тающего льда (2-5 °С). Такая температура пригодна для хранения спермы быка, барана и жеребца. Температура, близкая к 0°С, значительно удлиняет переживаемость спермиев и замедляет обменные процессы; дыхание и фруктолиз спермиев быка и барана тормозятся в 20-25 раз по сравнению с интенсивностью этих процессов при температуре тела животных (Н. П. Шергин).Для охлаждения спермы используют холодильник или термосы различной конструкции, в которых температура до 2--5 °С. Применение желточных разбавителей значительно повышает устойчивость спермиев к температурному шоку, но полностью не устраняет его. Поэтому сперму необходимо охлаждать медленно и постепенно. После разбавления сперму быка выдерживают при комнатной температуре (18--20 °С) 20-- 30 мин. Затем ампулы, флаконы или пробирки со спермой обертывают небольшим слоем ваты, помещают в полиэтиленовые мешочки и кладут в холодильник или термос со льдом. Мешочки со спермой укладывают так, чтобы они сверху были закрыты кусочками льда, что обеспечивает необходимую температуру (2--5 °С). При такой методике хранения сперму быка используют для осеменения коров максимум 3 суток с активностью не ниже 7 баллов, хотя ее жизнеспособность сохраняется более длительное время.Через 24ч хранения разбавленной спермы быка при температуре 2°С перфораторий спермия несколько увеличивается, становится более контрастным, а через 72 ч он набухает и начинает распадаться (Г. В. Зверева и Л. А. Черномаз). Следовательно, качество спермы и ее оплодотворяющая способность с каждым днем хранения снижаются..Долговременное хранение спермы. В процессе хранения спермы при 2-5°С в ней протекают обменные процессы, отрицательно влияющие на оплодотворяющую способность спермиев. Длительное хранение половых клеток возможно только в условиях полного анабиоза, когда все биохимические процессы сильно замедляются. Для хранения спермы в жидком азоте используется специальное холодильное оборудование.Известно, что замороженная сперма сохраняет свои качества, когда ее хранят погруженной в жидкий азот.Транспортировка.При транспортировке спермы необходимо соблюдать условия, которые мо-гут сохранить ее жизнеспособность от момента получения до осеменения. Сперму обычно перевозят в термосах, в которых она хранится. При этом необходимо исключить возможность повреждений емкостей со спермой и термосов.Сперму, помещенную для кратковременного хранения, нужно предохранять от колебаний температуры. Замороженную сперму перевозят в сосудах Дьюара, в которых ее и хранят.При транспортировке таких сосудов с жидким азотом наземными видами транспорта их необходимо тщательно закреплять, так как падение сосуда может сопровождаться взрывом. При перевозке сосудов Дьюара на самолете их заполняют азотом только на половину гидравлической емкости.К каждой партии отправляемой спермы прикладывают ордер, в котором указывают дату и часы получения спермы, кличку производителя, дозу и оценку спермы.Транспортировка спермы должна проводиться с соблюдением всех правил действующей инструкции по искусственному осеменению животных данного вида.
Соседние файлы в папке акушерство