Рабочая тетрадь освоения лабораторно-практических навыков по биологии. Часть I. Цитология с основами молекулярной биологии

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА №1

Тема: Устройство светового микроскопа и техника микроскопирования. Клеточный уровень организации биологических систем.

Цель занятия:

1.Изучить устройство светового микроскопа и технику микроскопирования.

2.Научиться изготавливать временные микропрепараты.

3.Знать сходство и различия между клетками про- и эукариот, растительной

иживотной.

Материально-техническое обеспечение:

1.Микроскоп.

2.Учебные таблицы.

3.Оборудование для приготовления временных микропрепаратов: чашки Петри, скальпели, ножницы, пинцеты, препаровальные иглы, салфетки, предметные и покровные стёкла, вода, раствор йода.

4. Материал для временных микропрепаратов: элодея, волос человека, плёнка лука.

5. Постоянные микропрепараты: кровь лягушки, кровь человека. 6. Цветные карандаши.

Вопросы для самоподготовки

1.Микроскоп. Виды микроскопии.

2.Строение светового микроскопа механическая, оптическая и осветительная части.

3.Техника работы с микроскопом.

4.Понятие о временных и постоянных препаратах.

5.Основные положения клеточной теории.

6.Типы клеточной организации. Основные отличия эукариотической и прокариотической клеток.

7.Определение органелл и включений клетки, их строение и функции.

8.Основные отличия растительной и животной клеток.

Задания для студентов

Задание 1. Устройство светового микроскопа

Изучите основные части микроскопа: механическую, оптическую и осветительную (рис.).

Кмеханической части относятся: штатив, подвижный предметный столик, тубус, револьвер, микро- и макрометрический винт.

Коптической части относятся: окуляр, объектив. Окуляры бывают х7, х10, х15 и х25 кратного увеличения. Различают объективы малого увеличения

(х8, х9, х10), большого увеличения (х40) и иммерсионный объектив

(х90, х100).

1

Общее увеличение микроскопа равно произведению показателя окуляра на показатель объектива. Например, увеличение окуляра х7 х увеличение объектива х8 =56 крат, т.е. общее увеличение микроскопа 56 раз. Диаметр поля зрения малого увеличения (х8) больше, чем поле зрения большого увеличения (х40). Поэтому при переводе с малого на большое увеличение необходимо проводить центровку препарата.

Изображение в микроскопе обратное. Например, если объект на микропрепарате виден в левом верхнем углу, то на предметном стекле он расположен в нижнем правом.

К осветительной части относятся: зеркало, конденсор с ирисовой диафрагмой. Зеркало имеет две поверхности – плоскую (используется при ярком освещении) и вогнутую (используется при слабом искусственном свете). Конденсором регулируют освещенность поля зрения, при его опускании – уменьшается, при поднятии – увеличивается. Диафрагма помогает регулировать количество света проходящего через конденсор на изучаемый объект.

Задание 2. Обозначьте основные детали микроскопа на рисунке:

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

12.

13.

14.

15.

Рис. Строение микроскопа

Задание 3. Правила работы с микроскопом

Перепишите и выучите правила работы с микроскопом.

Подготовка микроскопа к работе

1.Поставьте микроскоп штативом к себе, предметным столиком от себя, примерно на 10 см от края стола (на ширину ладони).

2.Поднимите с помощью макрометрического винта объектив над предметным столиком примерно на 0,5 – 1,0 см. Откройте диафрагму, поднимите конденсор до уровня предметного столика.

Правила работы с микроскопом на малом увеличении (7 х 8)

1.Установите в рабочее положение объектив малого увеличения (х8), повернув револьвер до щелчка, фиксация объектива над отверстием в

2

предметном столике. Запомните, что изучение любого объекта начинается с малого увеличения.

2.Глядя в окуляр левым глазом, направляют вогнутую поверхность зеркала на источник света, пока поле зрения не будет освещено ярко и равномерно.

3.Положите на предметный столик микропрепарат покровным стеклом вверх. Объект должен находился в центре отверстия предметного столика.

4.Переведите глаз с окуляра на объектив (смотреть сбоку микроскопа) и медленно опустите тубус с помощью макрометрического винта, чтобы объектив находился на расстоянии 2-3 мм от микропрепарата.

5.Смотрите в окуляр и одновременно медленно поднимайте тубус (только на себя) с помощью макрометрического винта до тех пор, пока в поле зрения объектива не появится изображение объекта. Запомните, что фокусное расстояние для малого увеличения равно примерно 5 мм. Далее вращая в ту или другую стороны макровинт добиваются четкого изображения.

Правила работы с микроскопом на большом увеличении (7 х 40)

1.При рассмотрении объекта на большом увеличении необходимо центрировать препарат (поместить его в центр поля зрения объектива). Для этого, глядя в окуляр, передвигайте препарат с помощью винтовпрепаратоводителей либо рукой, пока объект не займёт нужное положение. Если объект не отцентрировать, то при переводе объектива с малого на большое увеличение он окажется вне поля зрения.

2.Вращая револьвер, переведите в рабочее положение объектив большого увеличения (х40). Помните, что фокусное расстояние для объектива большого увеличения равно примерно 1 мм. Будьте осторожны! Можно

раздавить препарат и повредить объектив микроскопа.

3.Для тонкой фокусировки используйте только микрометрический винт, вращая его не более чем на пол-оборота.

Правила работы с иммерсионным объективом (7 х 90).

1.На большом увеличении центрируют интересующий участок микропрепарата.

2.Поворотом револьвера смещают объектив большого увеличение в свободное (нефиксированное) состояние.

3.На покровное стекло микропрепарата наносят каплю иммерсионного масла. 4.Фиксируют иммерсионный объектив над объектом.

5.Наблюдая в окуляр, с помощью микрометрического винта добиваются четкого изображения объекта.

6.Для зарисовки препарата смотрите в окуляр левым глазом, а в альбом правым глазом.

Завершение работы с микроскопом

1.Поднимите тубус на 2–3 см от предметного столика.

2.Переведите на объектив с малым увеличением.

3.Уберите микропрепарат.

4.При транспортировке микроскопа в шкаф, держите его правой рукой за штатив, а левой поддерживайте основание микроскопа (подставку).

3

Устранение ошибок, встречающихся при работе с микроскопом

1. При наведении света:

а) часть поля зрения затенена, так как объектив не зафиксирован на оптической оси микроскопа. Для устранения затенения повернуть револьвер до щелчка; б) в поле зрения видны предметы окружающей обстановки: переплеты

оконных рам, светильники). Для устранения помех опустить конденсор до исчезновения изображения предметов.

2. При переходе с малого увеличения на большое:

а) объектив упирается в предметное стекло препарата. Причина – препарат лежит на предметном столике покровным стеклом вниз; б) микроскоп не фокусируется на большом увеличении. Проверить на малом

увеличении: - центрирование объекта; -не положен ли препарат покровным стеклом вниз.

Задание 4. Сравнительная характеристика про- и эукариотической клеток

Заполните табл.1, указав особенности строения прокариотических и эукариотических клеток.

Задание 5. Временные микропрепараты клеток растений

Микропрепарат - это биологический или иной объект, заключённый в капле воды или канадского бальзама между покровным и предметным стеклом. Препараты бывают временными и постоянными.

Временный микропрепарат - исследуемый объект заключённый в капле воды между предметным и покровным стеклом.

Постоянный микропрепарат – биологический объект, прошедший фиксацию «предохранение от разрушения ткани», окрашивание на выявление различных структур и локализацию химических компонентов клетки,

4

просветление толуолом или ксилолом и заделку в канадский бальзам. Постоянные микропрепараты хранятся в специальных закрывающихся коробочках, защищающих их от света и случайных механических повреждений. Постоянные микропрепараты хранятся длительное время.

Изучите строение эукариотических клеток на примере:

А) Клетки пленки лука

Зарисуйте несколько клеток и обозначьте: 1-клеточную стенку; 2-цитоплазму; 3-ядро; 4-ядрышко; 5-вакуоль

Б) Хлоропласты в клетках листа элодеи

Зарисуйте несколько клеток при большом увеличении микроскопа и обозначьте: 1-клеточную стенку; 2-цитоплазму; 3-хлоропласты

Задание 6. Постоянные микропрепараты клеток крови человека и лягушки

Изучите постоянные микропрепараты на примере крови человека и лягушки. Зарисуйте и запишите различия между микропрепаратами.

Задание 7. Электронограммы органоидов эукариотической клетки

Изучите на электронограммах строение органоидов эукариотической клетки и определите эти органоиды (табл. 2).

Таблица 2

1.

6

5.

6.

7.

Список литературы для подготовки к занятию:

1.Биология. Т. 1: учебник в 2-х т.: для студентов вузов/ В.Н. Ярыгин, В.В. Глинкина, И.Н. Волков [и др.]; под ред. В.Н. Ярыгина. – М.: ГЭОТАР-

Медиа, 2011. - 725 с.

2.Биология. Том 1: учебник в 2-х томах: для студентов вузов/ под ред. В.Н. Ярыгина. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2015. - 725 с.

3.Пехов А.П. Биология. Медицинская биология, генетика и паpазитология. учебник для медицинских вузов: учебник/ А.П. Пехов. - М.: ГЭОТАР-

Медиа, 2011. - 656 c.

8

4. Гигани О.Б. Биология: руководство к лабораторным занятиям [Электронный ресурс] : учебное пособие / под ред. Гигани О.Б. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 272 с.

5. Маркина В.В. Биология : рук. к практ. занятиям [Электронный ресурс] / Маркина В.В., Оборотистов Ю.Д., Лисатова Н.Г. и др. / под ред. В.В. Маркиной - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 448 с.

6. Чебышев Н.В. Биология: учеб. пособие для студентов медицинских вузов и постдипломного образования врачей [рек. УМО] / Н.В. Чебышев, Г.Г. Гринева. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 416 с.

9