Практикум по гистологии

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВОХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ ДОНЕЦКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. М.ГОРЬКОГО НАЦИОНАЛЬНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. А.А.БОГОМОЛЬЦА

Под реда цией а адеми а АН Высшей ш олы У раины, до тора медицинс их на , профессора Баринова Э.Ф., до тора медицинс их на , членорр. АМН У раины профессора Чай овс о о Ю.Б.

ЦИТОЛОГИЯ И ОБЩАЯ ЭМБРИОЛОГИЯ

для кредитно-модульной системы обучения

Эле тронное чебное пособие

С О Д Е Р Ж А Н И Е

ОБ ИЗДАНИИ ПРЕДИСЛОВИЕ

1 СОДЕРЖАТЕЛЬНЫЙ МОДУЛЬ. . ЦИТОЛОГИЯ

1.1.МЕТОДЫ МИКРОСКОПИИ И ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА

1.2.ОБЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ КЛЕТКИ. ПЛАЗМОЛЕММА

1.3.КЛЕТКА. ЦИТОПЛАЗМА. ГИАЛОПЛАЗМА, ОРГАНЕЛЛЫ, ВКЛЮЧЕНИЯ

1.4.КЛЕТКА. ЯДРО. КЛЕТОЧНЫЙ ЦИКЛ. ДЕЛЕНИЕ, ДИФФЕРЕНЦИРОВКА, СТАРЕНИЕ И ГИБЕЛЬ КЛЕТОК

1.5.ЦИТОДИАГНОСТИКА. ЖИЗНЕННЫЙ ЦИКЛ КЛЕТКИ.

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК. СТРУКТУРНЫЕ ОСНОВЫ РЕАКЦИИ КЛЕТОК НА ДЕЙСТВИЕ ВНЕШНИХ ФАКТОРОВ

2СОДЕРЖАТЕЛЬНЫЙ МОДУЛЬ. ОБЩАЯ ЭМБРИОЛОГИЯ

2.1.ЭМБРИОГЕНЕЗ ПТИЦ И ПЛАЦЕНТАРНЫХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ

2.2.ЭМБРИОГЕНЕЗ ЧЕЛОВЕКА. ОПЛОДОТВОРЕНИЕ. ДРОБЛЕНИЕ. ПЕРВАЯ ФАЗА ГАСТРУЛЯЦИИ

2.3.ЭМБРИОГЕНЕЗ ЧЕЛОВЕКА. ВТОРАЯ ФАЗА ГАСТРУЛЯЦИИ. ГІСТО- І ОРГАНОГЕНЕЗ

ИТОГОВЫЙ КОНТРОЛЬ УСВОЕНИЯ ЗНАНИЙ И ОВЛАДЕНИЯ ПРАКТИЧЕСКИМИ НАВЫКАМИ ПО МОДУЛЮ 1

ДОНЕЦК – 2013

ОБ ИЗДАНИИ

Данное пособие предназначено для организации самостоятельной работы студентов во внеаудиторное время в рамках кредитно-модульной системы обучения и составлено в соответствии с типовой программой по учебной дисциплине «Г³столог³я, цитолог³я та ембр³олог³я” (Киев, 2013 г.) для студентов высших медицинских учебных заведений III-IV уровней аккредитации (специальности 7.110101 «Л³кувальна справа», 7.110104 «Пед³атр³я» и 7.110105 «Медико-проф³лактична справа»). В основу учебного пособия положен опыт проведения практических занятий сотрудниками кафедр гистологии, цитологии и эмбриологии Донецкого национального медицинского университета им. М. Горького. Преимуществом данного пособия является организация многоуровневости процесса обучения, высокая наглядность, включение информации о новых достижениях в медицине и прикладные аспекты, а также разработка путей объективизации оценки каждого из видов работы субъекта обучения. В пособие вошли темы Модуля 1, который включает два содержательных модуля: “Цитология” и “Общая эмбриология”.

Утверждено и рекомендовано Ученым Советом Донецкого национального медицинского университета им. М. Горького

(протокол ¹ 9 от 21.12.2009)

Обновлено и принято к применению решением методического совета кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии ДонНМУ (протокол №2 от 30.08.13)

Рецензенты:

В. К. Сырцов – профессор, заведующий кафедрой гистологии, цитологии и эмбриологии Запорожского государственного медицинского университета С. Б. Геращенко – профессор, заведующий кафедрой гистологии, цитологии и

эмбриологии Ивано-Франковского национального медицинского университета Е. Ю. Шаповалова – профессор, заведующая кафедрой гистологии, цитологии и эмбриологии Крымского государственного медицинского университета

© Баринов Э.Ф., Чайковский Ю.Б., Николенко О.И., Сулаева О.Н., Терещук Б.П., Игнатьева М.Н., Черешнева Е.В., Клищенко И.П., 2013 ã.

К "СОДЕРЖАНИЮ"

ПРЕДИСЛОВИЕ

Внедрение общих Болонских инициатив в высшее образование Украины декларируется как уникальный факт интеграции Украины в систему мирового сообщества, обеспечивающий достижение мировых стандартов образовательных программ. Осуществление данного шага стало возможным благодаря внедрению модульной технологии обуче- ния. Основным постулатом модульного обучения является самостоятельная работа студентов, которая считается основой формирования компетенций специалиста. Однако без управления и контроля со стороны преподавателя студентам сложно освоить в полном объеме теоретический материал, тем более – отработать умения согласно целевым видам деятельности. Решение данной проблемы видится в создании методики управления внеаудиторной самостоятельной работой студентов, позволяющей оптимизировать обучение и минимизировать потери времени при подготовке к занятию. Для этой цели сотрудниками кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии Донецкого национального медицинского университета разработаны пособия управляющего типа, в частности для модуля 1 – “Введение в цитологию и общую эмбриологию”.

Основной идеей данного пособия является четкая структуризация содержания обу- чения, формулирование конкретных целей каждого занятия, навыков и умений, тщательная проработка каждого компонента программы обучения и наглядное ее представление в иллюстративном блоке. Содержательные блоки данного пособия подготовлены в соответствии с программой по предмету и с учетом учебного плана.

Представленная в учебном пособии форма изложения материала позволяет провести четкую дифференциацию содержания темы и организовать познавательный процесс согласно современной концепции этапов обучения в несколько таксономических уровней. Пособие включает новые схемы и фотографии, повышающие наглядность обучения.

Индивидуализация обучения достигается не только благодаря гибкой системе управления деятельностью студентов, но и путем выполнения индивидуальной пись-

ческого материала из всех тем модуля. Решение такой задачи предусматривает реализацию полноты познавательной активности студентов и формирует траекторию обуче- ния - от знаний материала и умений определять морфологические объекты к анализу причинно-следственных связей и созданию собственной концепции или гипотезы.

Надеемся, что использование данного учебного пособия позволит оптимизировать самостоятельную работу студентов и повысить эффективность изучения интереснейшего раздела медицины – цитологии и эмбриологии, научит использовать знания для решения конкретных прикладных задач, будет способствовать формированию суждений и созданию собственных концепций.

Заведующий кафедрой гистологии, цитологии и эмбриологии Донецкого национального медицинского университета им. М. Горького, академик АН ВШ Украины, доктор медицинских наук, профессор

Э. Ф. Баринов

К "СОДЕРЖАНИЮ"

МОДУЛЬ 1

ЦИТОЛОГИЯ. ОБЩАЯ ЭМБРИОЛОГИЯ

Конкретные цели:

1.Анализировать структурную организацию клеток и их производных.

2.Интерпретировать взаимосвязь между структурными элементами клетки, оценивать их функциональное состояние, трактовать возрастные изменения, механизмы регенерации, адаптацию к действию экзогенных факторов.

3.Трактовать сущность периодов эмбриогенеза человека и механизмы процессов, которые их обеспечивают.

4.Определять критические периоды эмбриогенеза человека и интерпретировать их возможные нарушения, аномалии и пороки развития зародыша.

МОДУЛЬ 1 включает два содержательных модуля: 1-й содержательный модуль «Цитология» 2-й содержательный модуль «Общая эмбриология»

1-Й СОДЕРЖАТЕЛЬНЫЙ МОДУЛЬ. ЦИТОЛОГИЯ

Конкретные цели:

1.Анализировать и дифференцировать на уровне световой и электронной микроскопии клетки, их основные части.

2.Трактовать особенности строения плазмолеммы, дифференцировать межклеточные контакты, интерпретировать транспортные процессы в клетке.

3.Определять структуры цитоплазмы и ядра, их состояние и функциональное значение, интерпретировать функциональную активность клеток и механизмы регуляции.

4.Дифференцировать клетки в различных фазах жизненного цикла, определять делящиеся клетки; интерпретировать дифференцировку, старение и гибель клеток.

5.Объяснять реакцию клеток на повреждение, обратимые и необратимые изменения, адаптацию и регенерацию клеток.

Примечание:

Каждый студент должен получить у преподавателя индивидуальное задание для итогового контроля, которое решает в течение изучения модуля и предъявляет отчет в письменной форме в конце изучения модуля.

К "СОДЕРЖАНИЮ"

1.1. МЕТОДЫ МИКРОСКОПИИ И ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ: Развитие гистологии, как науки, и ее дальнейший прогресс неразрывно сопряжен с совершенствованием методов исследования. Основными объектами изучения являются гистологические препараты и электронные микрофотографии. Основной метод исследования — микроскопия. Гистологическое исследование биологических тканей широко используется в практике врача-лаборанта, патологоанатома, судебного медика.

ЦЕЛЬ ОБУЧЕНИЯ (общая): Уметь определять и интерпретировать различные методы морфологического исследования структур, их диагностические возможности и значение. Уметь микроскопировать с помощью светового микроскопа и схематично изображать особенности строение клеток, тканей и органов.

Для этого необходимо уметь (конкретные цели):

1.Определять диагностические возможности методов микроскпии, интерпретировать их сущность.

2.Овладеть правилами пользования световым микроскопом.

3.Трактовать принципы и этапы изготовления гистологических препаратов, определять артефакты.

4.Интерпретировать физико-химические свойства структур, выявляемых при световой и электронной микроскопии.

ИНСТРУКЦИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ При изучении строения работы светового микроскопа следует запомнить и на-

учиться показывать его части, объяснять принципы их работы. Запомните правила пользования микроскопом. Непосредственно на своем рабочем месте овладейте навыками пользования световым микроскопом.

Используя граф логической структуры темы (приложение 1.1.1), во время изуче- ния методов микроскопии уясните диагностические возможности, которые дает врачу классическая световая микроскопия - изучение структуры органов, тканей, оценка расположения и взаимоотношения структур, химический состав структурных элементов клеток и межклеточного вещества (рис. 1.1.1). Для определения химического состава структур и метаболизма клеток, тканей и органов используют гистохимические методы. Локализацию изучаемого вещества определяют по окрашенным продуктам реакции. С помощью гистохимических методов выявляют: ферменты, нуклеиновые кислоты, углеводы, жиры, компоненты межклеточного матрикса (рис. 1.1.2). Разновидностью гистохимического метода является иммуноцитохимия, которая позволяет выявлять тканевые антигены с помощью меченых антител. Этот метод основан на введении антител к изучаемым молекулам (мембранным, цитоплазматическим белкам и гликопротеинам, транскрипционным факторам, рецепторам и генам ядра). Специфические антитела связываются с антигенами клетки. Визуализацию таких комплексов проводят с помощью пероксидазы хрена (появляется коричневый цвет – рис. 1.1.3) или светящихся красителей – флюорохромов (рис. 1.1.4).

К специальным методам световой микроскопии относятся:

À)микроскопия в темном поле — позволяет в неокрашенном препарате выделять контрастирующие структуры;

Á) фазово-контрастная микроскопия используется для исследования живых и неокрашенных объектов, которые являются контрастными и отличаются по показателю преломления света;

Â) поляризационная микроскопия обеспечивает выявление правильно ориентированных анизотропных структур (коллагеновые волокна, миофибриллы) или

К НАЧАЛУ ГЛАВЫ К "СОДЕРЖАНИЮ"

кристаллов; Г) люминисцентная микроскопия используется для наблюдения объектов, кото-

рые флуоресцируют, и позволяет дифференцировать химический состав объектов;

Метод культуры клеток и тканей используют для исследования их структурнофункционального состояния вне влияния регуляторных механизмов целостного организма.

Обратите внимание, что возможности световой микроскопии определяются разрешающей способностью микроскопа, зависящей от длины световой волны. Это позволяет понять цель создания микроскопов с применением более коротких волн (ультрафиолетовый, электронный). Ультрафиолетовая микроскопия дает возможность исследовать химический состав гистологических структур, изучать объекты в живом организме.

Высокая разрешающая способность электронного микроскопа (0,002 нм) позволяет исследовать клетки и внутриклеточные структуры (рис. 1.1.7). Получемое при трансмиссионной микроскопии изображение - двухмерное (черно-белое). Для получения трехмерного изображения исследуемого объекта применяют метод сканирующей микроскопии (рис. 1.1.5). Он воспроизводит объемную архитектонику структур, позволяет оценить пространственное расположение волокон, строение клеточной поверхности. Для изучения деталей строения мембран и межклеточных соединений используется метод сколов (замораживания-скалывания) (рис. 1.1.6).

Во время изучения гистологической техники необходимо выяснить задачи и принципы фиксации, виды и особенности фиксаторов, основные этапы изготовления гистологических препаратов, обезвоживание, уплотнение заливку в парафин или целлоидин, приготовление блоков, срезов, окрашивание препаратов (срезов) и их заключе- ние, принцип окраски гематоксилином и эозином.

Для изучения правил работы с микроскопом используйте препарат печени, в котором хорошо различаются границы клеток и ядра.

ПРАВИЛА ПОЛЬЗОВАНИЯ СВЕТОВЫМ МИКРОСКОПОМ

1.Установить микроскоп перед собой.

2.Проверить положение малого объектива (центрировать объектив, установить его

ярко и равномерно освещено. Необходимо пользоваться вогнутой поверхностью зеркала.

4.Положить препарат на столик микроскопа покровным стеклом вверх таким образом, чтобы исследуемый объект был в центре. Зафиксировать препарат зажимом.

5.Чтобы найти изображение при малом увеличении, необходимо с помощью макровинта под контролем глаза изменить положение тубуса, приближая фронтальную

6.Во время перевода на большое увеличение следует левой рукой зафиксировать ножку штатива, а правой — слегка поднять тубус на 1-2 мм, поворачивая макровинт на себя на 1/4 оборота, затем большой и указательный пальцы правой руки перенести на оба объектива и повернуть револьвер по ходу часовой стрелки до щелчка. С помощью макровинта под контролем глаза медленно опустить тубус на

расстояние 0,2 см между линзой объектива большого увеличения и покровным стеклом до появления в поле зрения четкого изображения.

7. Во время исследования препарата при большом увеличении необходимо исполь

К НАЧАЛУ ГЛАВЫ К "СОДЕРЖАНИЮ"

8. Чтобы снять препарат, необходимо перевести микроскоп на малое увеличение.

К НАЧАЛУ ГЛАВЫ К "СОДЕРЖАНИЮ"

К НАЧАЛУ ГЛАВЫ К "СОДЕРЖАНИЮ"

К НАЧАЛУ ГЛАВЫ К "СОДЕРЖАНИЮ"