Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Цитология / Лекции 1 курс.doc
Скачиваний:
44
Добавлен:
14.03.2015
Размер:
148.48 Кб
Скачать

Гистология.

Ткань – это совокупность клеток и межклеточного вещества, которые имеют общность происхождения, строения и функцию

Методы исследования:

  1. Световая микроскопия,

  2. Электронная микроскопия.

Требования, предъявляемые к объекту изучения с помощью светового микроскопа:

  • Биологический объект – структура соответствует прижизненной,

  • Объект должен быть тонким,

  • Объект должен быть окрашен,

  • Препарат должен быть долговечным.

Этапы приготовления объекта:

  1. взятие материала,

  2. фиксация (физическая, химическая -формалин, спирт), электронный микроскоп – глютаровый альдегид.

  3. порезать на срезы (световой микроскоп – толщина не более 1 клетки, 4мкм – оптимальная толщина среза, подготовка к резке – обезвоживание, насыщение парафином → заливка) (для изучения в электронном микроскопе – ипоксидные смолы, более твердые чем парафин) срез для электронного микроскопа – ультра-микротом.

  4. Укладываем на предметное стекло.

  5. Окрашивание – водные краски, регидратация объекта, убираем парафин и насыщаем объект водой. 2 красителя : эозин, гематоксилин. Ядро красят гематоксилином (основной) → красит кислоты (ДНК) базисный. Базофильная структура (в клетке в которой синтезируется белок цитоплазма голубого цвета).

Эозин – кислый краситель, которые красит основные структуры – оксифильные структуры.

Электронная микроскопия :

2.Фиксация – глютаровый альдегид, осмиевые кислоты,

4. Электроннограмма – черно-белая,

5. Препарат снова обезвоживается → накрывается покровным стеклом ( смола приклеивает стекло к материалу).

Виды электронной микроскопии:

  1. Трансмиссионная (плоскостное изображение),

  2. Сканирующая - используют сколы биологических объектов (3Д изображение).

Дополнительные методы :

  • Гистохимический – на срезе химическая реакция (наличие или отсутствие вещества – по продукту реакции),

  • Иммуногистохимический – позволяет выявить наименьшее количество вещества – использование антител, чаще связанных с красителями.

  • Темнопольная микроскопия – метод, позволяющий увидеть неокрашенный объект.

  • Ультрафиолетовая микроскопия,

  • Культура ткани или культура клеток – позволяет изучать живые объекты.

Ткани : нервная, эпителиальная, мышечная, соединительная.

Ткань = клетки + межклеточное вещество.

Межклеточное вещество – упорядоченное строение молекул, образованных клетками.

Клетка – структурная единица всего живого.

Клетки:

  1. Дифференцированные – в разных клеточный популяциях идет подавление определенных групп генов (разные гены → разные белки → разные функции),

  2. Не дифференцированные (стволовые) : - частично дифференцированные – мезенхимальные клетки, - не дифференцированные – тотипотентные,

Дифференцирование – избирательное (селективное) подавление различных генов в различных клеточных популяциях.

Клетка.

  1. мембрана

  2. цитоплазма

  3. ядро

  1. Мембрана (плазмолемма) Поверхностный аппарат клетки:

    1. Гликокаликс – надмембранный комплекс молекул,

    2. Мембрана,

    3. Субмембрана (цитокелет).

Липиды и белковые молекулы – не ковалентные связи.

Процесс: латеральная диффузия – перемещение в плоскости мембраны,

Диффузия флип-флоп – вертикальная.

Компоненты: 1 липиды

2 белки

3 углеводы

Основной компонент - липиды (ФЛ, холестерол, гликолипиды)

  1. Фосфолипиды ФЛ – барьерная функция, влияют на функциональную активность белков, эйкозаноидов (простогландины).

Представитель – фосфотидилхолин (РИС)

(количество = связей влияет на жесткость мембраны)

ФЛ образуют бислой, который стремится к самозамыканию, т.е. самостоятельно устраняет повреждения.

  1. Холестерол – придает жесткость (РИС структуры)

  2. Гликолипиды – входят в состав гликокаликса – функция химическая защита.

Белки – количественно меньше чем липидов,

Функции Б. : транспортная, рецепторная, адгезионная , ферментативная.

(РИС Жидкостно-мозаичной модели.)

НА 50 молекул ФЛ = приходится 1 молекула белка

Классификация белков:

  1. По принципу зависимости прочности с липидами:

Интегральные Не интегральные

Связаны ковалентными связями либо способны к латеральной диффузии

Прочными не ковалентными

  1. Локализация в бислое

Трансмембранные Переферические : наружние, внутренние

(Рис - схема)

  1. Функция:

- рецепторы – трансмембранные

- транспортные – трансмембранные

- адгезионные – трансмембранные

- белки-ферменты – переферические

- белки цитоскелета – внутренние переферические

- «вторичные посредники» - внутренние перферические

Углеводы – обеспечивают межклеточные взаимодействия , защитная функция.

  1. гликолипиды

  2. гликопротеиды

  3. протеогликаны (более крупные)

Функции мембраны :

  1. структурная

  2. барьерная

  3. транспортная

  4. Рецепция и адгезия

Классификация видов транспорта (2 механизма)

- с затратой мембраны (эндо - экзоцитоз)

- без затрат (трансмембранно)

  1. Трансмембранный механизм

- через специальные белки ( ионы, глюкоза, АК) – белки-переносчики, белки-каналы

- через бислой (маленькие молекулы, незаряженные ионы, мочевина)

Виды транспорта: Активный и Пассивный

Транспортные белки:

- унипорт – переносят 1 вещ-во в одну сторону,

- симпорт – 2 вещ-ва в одну сторону,

- антипорт – 2 вещ-ва в разные стороны

Белки-каналы : Фермент АТФ –аза расщепляет АТФ и переносит вещ-во.

Белки каналы делятся на :

- Потенциал зависимые (открываются в ответ на изменение потенциала мембраны)

- Механозависимые

- Белок рецептор

Транспорт вещ-тв с затратой Е (энергии):

    1. Экзоцитоз –выведение веществ из клетки

- регулируемый (в ответ на сигнал),

- конститутивный (постоянное выведение)

2) Эндоцитоз – поглащение веществ

- пиноцитоз (маленькие пузырьки растворенного вещества) (конститутивный и опосредуемый рецептором)

- фагоцитоз (большой пузырек).

Механизм процесса пино- и фаго- цитоза (РИС)

Процесс пиноцитоза:

  1. Окаймленные ямки – 2% клетки (белок клатрин) – образование пузырька (клатрин отслаивается),

  2. Недалеко от мембраны располагаются эндосомы (мембранные плоские пузырьки ) – пузырек «периферическая эндосома»

  3. От периферической эндосомы отщепляется транспортный пузырек и возвращается к мембране и встраивается в неё, тем самым возвращая рецептор на место,

  4. Передвигается в центр клетки – «перинуклеарная эндосома» (кислая среда рН 5)

  5. Слияние перинуклеарной эндосомы с маленьким пузырьком - лизосомой - «эндолизосома»,

  6. Через специальные транспортные белки мономеры начинают поступать в цитоплазму,

  7. «остаточное тельце»- это мембранный пузырек содержит то, что не удалось переварить – продвигается к мембране и путем экзоцитоза остатки выводятся наружу.

Процесс фагоцитоза:

(нейтрофильные фагоциты, макрофаги) – фагоцитируют м/о , старые клетки.

  1. Связывание молекул на поверхности частицы со специфическими рецепторами мембраны клетки фагоцита (антитела, белки системы комплемента, бактерии)

  2. Рецепторы переходят в активное состояние, передают информацию внутрь и начинает перестраиваться цитоскелет (ложноножка - псевдоподия) Псевдоподия окружает частицу.

  3. Образуется мембранный пузырек – фагосома.

  4. Внутрь накачиваются протоны (пузырек не передвигается).

  5. Образуется фаголизосома

  6. Остаточное тельце – экзоцитоз не переваренных остатков.

Незавершенный фагоцитоз – бактериальная агрессия. Клетка погибает только частично переварив бактерию (чрезмерное поглощение частиц).