Книги / Частная бактериология

311

материала мазки обрабатывают флюоресцирующими сыворотками или люминесцирующими коклюшными иммуноглобулинами, приготовленными из гипериммунных сывороток. Исследование проводят с помощью люминесцентного микроскопа. РИФ позволяет получить ответ через 4-6 часов после взятия материала (рисунок 4.21).

Рисунок 4.21 – РИФ при коклюше. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Серологические методы (реакция агглютинации, реакция непрямой гемагглютинации, реакция связывания комплемента) основываются на определении уровня специфических антител к определенным антигенам возбудителя коклюша. Серологические методы используют как вспомогательные при выявлении атипичных форм болезни, а также для ретроспективной диагностики, поскольку антитела к возбудителю появляются не ранее третьей недели заболевания. Поэтому серологические методы позволяют подтвердить диагноз коклюша у больных, кашляющих более 2-3 недель.

Для серологической диагностики коклюша разработан метод ИФА, позволяющий определять IgG- и IgA-антитела к коклюшному токсину и филаментозному гемагглютинину. Для определения IgG-антител к возбудителю коклюша методом ИФА выпускаются соответствующие наборы (рисунок 4.22).

Рисунок 4.22 – Набор для определения IgG-антител к возбудителю коклюша методом ИФА. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

При этом у неиммунизированных лиц наблюдается сероконверсия (повышение титра антител в 2-4 раза), а у вакцинированных лиц сероконверсия не выявляется, так как к моменту исследования возникает вторичный иммунный ответ. Серологические исследования необходимо проводить в динамике со 2-3 недели болезни с интервалом 1-2 недели.

Наиболее распространенным методом серологической диагностики коклюша является реакция агглютинации. Для установления серологического диагноза

312

коклюша и паракоклюша в реакции агглютинации используют диагностикумы, представляющие собой гомогенную взвесь обезвреженных формалином коклюшных (20 млрд. в 1 мл) или паракоклюшных (35 млрд. в 1 мл) микробов. Диагностикумы (рисунок 4.23) позволяют выявлять антитела в сыворотке крови больных людей, переболевших или вакцинированных лиц.

Рисунок 4.23 – Коклюшный и паракоклюшный диагностикумы. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

При постановке реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) применяют эритроцитарные диагностикумы, представляющие собой эритроциты животных, сенсибилизированные комплексом антигенов коклюшного микроба.

Перспективным методом диагностики является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Для ее проведения разработаны тест-системы для идентификации различных участков генома B. pertussis (гена коклюшного токсина, гена аденилатциклазного гемолизина). Этот метод позволяет в короткие сроки (в течение 6 часов) получить ответ даже на фоне приема антибиотиков, при диагностике атипичных и стертых форм заболевания.

Лечение. При лечении коклюша основное внимание уделяется тщательному уходу за больными, устранению провоцирующих кашель факторов, ингаляции увлажненного кислорода, отсасыванию слизи из дыхательных путей, использованию бронхорасширяющих, откашливающих средств, антигистаминных препаратов.

Антибиотики (эритромицин, азитромицин, кларитромицин, тетрациклин, левомицетин, гентамицин) оказываются эффективными только в катаральный период. Раннее использование антибиотиков не только предотвращает дальнейшее развитие патологического процесса, но и способствует уменьшению частоты и тяжести вторичных бактериальных инфекций. В конвульсивный период антибиотики не оказывают значительного влияния на течение заболевания.

Лечение паракоклюша проводится с помощью симптоматических средств. В связи с легким течением заболевания антибиотики не используют.

Профилактика. Первая вакцина против коклюша появилась в 1941 г. в США. Обязательная вакцинация в России против коклюша проводится с 1959 г. Профилактические мероприятия при коклюше регламентированы Санитарноэпидемиологическими правилами СП 3.1.2.1320-03 “Профилактика коклюшной инфекции”. С целью специфической профилактики коклюша используют комплексные препараты, содержащие убитые коклюшные бактерии

313

(корпускулярный коклюшный компонент) или отдельные антигены возбудителя коклюша (бесклеточный коклюшный компонент).

АКДС-вакцина (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина, международная аббревиатура - DTP) содержит убитые бактерии коклюшного микроба (20 млрд. микробных тел в 1 мл), дифтерийный и столбнячный анатоксины. Вакцинация проводится в 3 месяца, затем в 4,5 и 6 месяцев, ревакцинация – в 18 месяцев (рисунок 4.24). В настоящее время подчеркивается необходимость пятой вакцинирующей дозы в связи с развитием недостаточного по длительности иммунитета при существующей схеме вакцинации.

Рисунок 4.24 – Вакцина АКДС. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Убитые бактерии возбудителя коклюша входят в состав комбинированной вакцины Бубо®-Кок. Вакцина предназначена для иммунопрофилактики коклюша, дифтерии, столбняка и гепатита В. Эта вакцина содержит убитые формалином коклюшные бактерии 1 фазы, очищенные дифтерийный и столбнячный анатоксины, рекомбинантный дрожжевой поверхностный антиген (HBs-антиген) вируса гепатита В. Компоненты вакцины сорбированы на геле гидроксида алюминия (рисунок 4.25).

Рисунок 4.25 – Комбинированная вакцина Бубо®-Кок. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Бесклеточные вакцины АКаДС содержат ацеллюлярный коклюшный компонент - коклюшный анатоксин и ряд протективных антигенов. Первая ацеллюлярная коклюшная вакцина была лицензирована в Японии 1981 г. В РФ официально разрешено применение следующих АКаДС-вакцин, имеющих в своем составе коклюшный анатоксин, филаментозный гемагглютинин и пертактин: Инфанрикс, Инфанрикс-Гекса, Тетраксим и Пентаксим.

314

Среди препаратов, содержащих отдельные антигены коклюшного микроба (так называемые ацеллюлярные вакцины) наибольшее распространение получили вакцины Пентаксим, Бустрикс, Даптацел, Инфанрикс, Тетракок.

Вакцина Пентаксим (Франция) содержит коклюшный анатоксин и филаментозный коклюшный гемагглютинин, дифтерийный и столбнячный анатоксины, инактивированные вирусы полиомиелита 1-го, 2-го и 3-го типов, полисахарид Haemophilus influenzae. Вакцинация проводится в 3 месяца, затем в 4,5 и 6 месяцев, ревакцинация – в 18 месяцев (рисунок 4.26).

Рисунок 4.26 – Вакцина Пентаксим. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Вакцины Бустрикс, Даптацел, Инфанрикс содержат детоксицированный

(обезвреженный) коклюшный токсин (анатоксин), филаментозный гемагглютинин и пертактин 1 фазы коклюшного микроба, дифтерийный и столбнячный анатоксины

(рисунок 4.27).

Рисунок 4.27 – Ацеллюлярные вакцины, содержащие коклюшные антигены. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Существующая система вакцинопрофилактики даже при высоком охвате обеспечивает недостаточный по длительности иммунитет, который снижается уже к школьному возрасту. Поэтому большое внимание отводится неспецифической профилактике коклюша.

Больного коклюшем изолируют на 25-30 дней с момента заболевания. Карантин сроком на 14 дней устанавливают для детей до 7 лет, бывших в контакте с больным и ранее не болевших коклюшем. В очаге заболевания проводят текущую дезинфекцию.

315

Неиммунизированным детям при контакте с больным вводят противококлюшный человеческий иммуноглобулин.

Всем лицам, контактировавшим с больным, независимо от возраста и наличия в анамнезе вакцинации, проводят антибиотикопрофилактику эритромицином.

С целью раннего выявления больных при наличии характерного кашля, продолжающегося в течение 5-7 дней и более, проводят двукратное бактериологическое обследование детей и работников родильных домов, детских больниц, санаториев, детских дошкольных учреждений, школ.

Коклюш и паракоклюш – два самостоятельных заболевания. Перекрестного иммунитета против коклюша и паракоклюша не возникает. Дети, переболевшие коклюшем, могут заболеть паракоклюшем и наоборот.

Вопросы для контроля усвоения материала

1.Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя коклюша.

2.Культуральные и биохимические признаки возбудителя коклюша.

3.Антигенные свойства бордетелл.

4.Факторы патогенности возбудителя коклюша.

5.Патогенез и клиническая картина коклюша.

6.Диагностика коклюша.

7.Принципы лечения коклюша.

8.Профилактика коклюша, виды вакцин.

Тренировочные тесты

1.Возбудитель коклюша открыли (один правильный ответ): 1.1 Л. Пастер

1.2 Р. Кох

1.3 Ж. Борде, О. Жангу

1.4 И.И. Мечников

1.5 Д. Уотсон, Ф. Крик

2.Возбудитель коклюша относится к роду (один правильный ответ):

2.1 Salmonella

2.2 Bordetella

2.3 Escherichia

2.4 Shigella

2.5 Streptococcus

3.Возбудителем коклюша является (один правильный ответ):

3.1B. anthracis

3.2B. parapertussis

3.3B. pertussis

3.4Y. pestis

3.5S. epidermidis

316

4.Возбудитель коклюша представляет собой (один правильный ответ): 4.1 извитую бактерию 4.2 грамотрицательную неподвижную палочку

4.3 грамотрицательную подвижную палочку

4.4 грамположительную подвижную палочку

4.5 грамположительную неподвижную палочку

5.Для выращивания коклюшного микроба используют (несколько правильных ответов):

5.1 среду Эндо

5.2 висмут-сульфитный агар

5.3 казеиново-угольный агар

5.4 среду Левина

5.5 среду Борде-Жангу

6.К факторам патогенности возбудителя коклюша относятся (несколько правильных ответов):

6.1 пестицин

6.2 филаментозный гемагглютинин

6.3 трахеальный цитотоксин

6.4 эксфолиативный токсин

6.5 холероген

7.Источником коклюшной инфекции является (один правильный ответ):

7.1больное животное

7.2почва

7.3больной человек

7.4грызуны

7.5продукты питания

8.Путь передачи возбудителя коклюша (один правильный ответ): 8.1 инъекционный 8.2 пищевой

8.3 воздушно-капельный

8.4 трансмиссивный

8.5 половой

9.Входными воротами для возбудителя коклюша являются (один правильный ответ):

9.1 кожа

9.2 слизистые оболочки верхних дыхательных путей

9.3 слизистая оболочка тонкого кишечника

9.4 слизистая оболочка половых путей

9.5 конъюнктива

10.Симптомами коклюша являются (один правильный ответ):

317

10.1диарея

10.2неукротимая рвота

10.3приступы судорожного кашля

10.4резкая головная боль

10.5ундулирующая лихорадка

11.Приступы спазматического кашля характерны для (один правильный ответ): 11.1 дифтерии 11.2 скарлатины

11.3 пневмококковой пневмонии

11.4 коклюша

11.5 менингококкового назофарингита

12.Основной метод лабораторной диагностики коклюша (один правильный ответ): 12.1 бактериоскопический 12.2 аллергический 12.3 бактериологический 12.4 биологический 12.5 гистологический

13.Исследуемый материал при диагностике коклюша (один правильный ответ): 13.1 фекалии

13.2 моча

13.3 слизь с задней стенки глотки

13.4 ликвор

13.5 желчь

14.Отбор материала для диагностики коклюша проводят методом (несколько правильных ответов):

14.1 соскоба

14.2 пункцией

14.3 “кашлевых пластинок”

14.4 с помощью тампона

14.5 зондирования

15.Для посева материала от больного коклюшем применяют (несколько правильных ответов):

15.1 среду Эндо

15.2 казеиново-угольный агар

15.3 среду Борде-Жангу

15.4 желточно-солевой агар

15.5 щелочной агар

16.Для специфической профилактики коклюша используют (один правильный ответ):

16.1 антибиотики

318

16.2бактериофаги

16.3АКДС-вакцину

16.4нормальный гамма-глобулин

16.5антитоксин

Правильные ответы: 1.3; 2.2; 3.3; 4.2; 5.3, 5.5; 6.2, 6.3; 7.3; 8.3; 9.2; 10.3; 11.4; 12.3; 13.3; 14.3, 14.4; 15.2, 15.3; 16.3.

319

4.2. Бруцеллы

Историческая справка. Бруцеллез (мальтийская лихорадка, лихорадка Кипра, лихорадка Гибралтара, волнообразная лихорадка, средиземноморская ремитирующая лихорадка, ундулирующая лихорадка) – это острое инфекционноаллергическое зоонозное заболевание, вызываемое бактериями рода Brucella. Возбудитель бруцеллеза относится ко II группе патогенности. Болезнь передается от больных животных человеку. У человека бруцеллез проявляется поражением опорно-двигательной, нервной и половой систем, сопровождается, как правило, хронизацией инфекционного процесса и инвалидностью больного. Например, на 2006 г. в России числилось 2173 больных, имеющих инвалидность по бруцеллезу. У животных бруцеллез чаще всего протекает в латентной форме и проявляется абортами.

В литературе бруцеллез у животных описывался под названием “повального выкидыша животных”, “эпизоотического аборта коров”, “инфекционного аборта крупного рогатого скота”. Бруцеллез у людей под названием “мальтийская лихорадка” был выявлен и описан в 1861 г. военным врачом Д. Марстоном на острове Мальта среди солдат английского гарнизона, заболевших после употребления сырого козьего молока. В 1886 г. английский военный врач Д. Брюс (рисунок 4.28) при изучении гистологических препаратов и мазков из селезенки солдата, умершего от “мальтийской лихорадки”, обнаружил возбудителя болезни.

Рисунок 4.28 – Дэвид Брюс (David Bruce, 1855-1931 гг.). Заимствовано из Интернетресурсов.

В 1887 г. он выделил чистую культуру возбудителя и назвал его Micrococcus melitensis (мальтийский микрококк). Было установлено, что этот микроб поражает преимущественно коз и овец, а заражение человека происходит при употреблении сырого молока от больных животных. Это заболевание было широко распространено среди мелкого рогатого скота и людей во многих районах Средиземноморского бассейна.

Датские ветеринарные врачи Б. Банг (рисунок 4.29) и В. Стрибольт в 1897 г. при изучении причин абортов у крупного рогатого скота в Северной Европе из околоплодной жидкости коровы выделили бактерию, которую назвали Bacterium abortus bovis (палочка или бацилла Банга). Было установлено, что этот возбудитель

320

может вызывать у людей заболевание, основным проявлением которого является поражение суставов. Это заболевание у животных назвали болезнью Банга.

Рисунок 4.29 – Бернхард Банг (Bernhard Lauritz Frederik Bang, 1848-1932 гг.).

Заимствовано из Интернет-ресурсов.

В1909 г. Ф. Гутира в Венгрии, а в 1914 г. Дж. Траум в Америке обнаружили возбудителя массовых абортов у свиней – Bacterium abortus suis. В дальнейшем было установлено, что бактерии свиного аборта могут вызывать заболевания среди работников боен, занимающихся переработкой свинины.

Таким образом, за три десятилетия были описаны возбудители трех инфекционных болезней, при которых наблюдались одинаковые симптомы заболевания животных (аборты) и одинаковые механизмы заражения людей (через продукты животного происхождения – молоко, мясо и при уходе за животными).

В1916-1920 гг. американские ученые А. Ивенс, К.Ф. Майер и М.Л. Фезье провели сравнительное изучение выделенных бактерий. Тщательные исследования показали, что мальтийский микрококк, бактерии аборта коров и бактерии аборта свиней близки по своему строению, биохимическим и антигенным свойствам. Поэтому эти три микроба были объединены в одну группу и названы в честь Д. Брюса бруцеллами (родовое название).

В1897 г. британский бактериолог и иммунолог А.Э. Райт предложил использовать для диагностики бруцеллеза реакцию агглютинации, названную его именем (рисунок 4.30).

Рисунок 4.30 – Алмрот Райт (Almroth Edward Wright, 1861-1947 гг.).

Заимствовано из Интернет-ресурсов.