генетика к 2 кр

Методы идентификации хромосом. Хромосомные перестройки.

Лекция 3-4

Возможности идентификации хромосом на протяжении клеточного цикла

I.Solovei 2003

Структура хромосомы

клетка ядро

хромосома

хроматиновые

петли нуклеомеры нуклеосомы

ДНК

Классификация монохромно окрашенных хромосом

Число хромосом.

Размер хромосом.

Наличие спутника.

Центромерный индекс.

Классификация хромосом

Метацентрические хромосомы – 37,5- 50%;

Субметацентрические

–25,0 – 37,4%;

Субакроцентрические

–12,5 – 24,9%;

Акроцентрические –

0,1 – 12,4%;

Телоцентрические –

0%.

Метафазные пластинки митотических клеток корневых меристем растений BC2

А) 2n=24						Б) 2n=25

В) 2n=26

Г) 2n=29

Монахос С.Г.

Гетерохроматин

1.Факультативный – в период интерфазы либо плотно упакован, либо представляет собой петли,

взависимости от ткани или стадии развития клетки

2.Конститутивный – остается плотно упакованным

втечение всей интерфазы во всех тканях; локализован около центромер, теломер и ядрышко организующего района (NOR-области).

Краситель Гимза

Компоненты раствора	Эффект окрашивания
метиленовый синий	бледные, слабо заметные бэнды
азур А
азур В
эозин	отсутствие бэндов
метиленовый синий + эозин	наличие хорошо различимых бэндов
азур + эозин

метиленовый синий	красящий	эозин
	комплекс

Д е з о к с и р и б о н у к л е и н о в а я к и с л о т а

Образование прочного красящего вещества в зависимости от конфигурации и разной степени уплотнения

С-бэндинг – история открытия

Pardue и Gall случайно открыли метод С-бэндинга в 1970 году при проведении экспериментов по in situ гибридизации меченой тритием сателлитной ДНК на хромосомах мыши:

1.денатурация хромосомной ДНК гидроокисью натрия;

2.ренатурация в буфере;

3.проявка гибридизации авторадиографией, при подкрашивании хромосомы красителем Гимза.

С-бэндинг

1.С-окрашенные участки не всегда совпадают с областями увеличения количества ДНК.

2.Применяется, в основном, на однодольных (Мятликовые и Лилейные).

3.Постоянен у одного вида растений с наличием небольшого полиморфизма.

4.С помощью морфометрического анализа на нескольких злаках доказана неслучайность распределения бэндов.

5.Возможно создание таких условий, при которых бэнды будет давать только одна хромосома из всего генома (показано на хромосомах человека и некоторых растений).