36

Министерство образования Республики Беларусь

Могилевский государственный университет продовольствия

Кафедра химической технологии высокомолекулярных соединений

Белки

Методические указания к лабораторному практикуму

по дисциплине ”Биохимия» для студентов специальностей

49 01 01 “Технология хранения и переработки растительного сырья”

49 01 02 “Технология хранения и переработки животного сырья”

91 0101 “Производство продуктов и организация общественного

питания”

Могилев 2003

УДК 557.1

Рассмотрены и утверждены

на заседании кафедры ХТВМС

Протокол № 10 от 20 мая 2003 г.

Составители: доц. О.Н.Макасеева

ст. препод. О.В.Дудинская

асс. Л.М.Ткаченко

Рецензент доц., к.т.н. Т.М.Тананайко

Редактор Т.Л. Бажанова

Технический редактор А.А.Щербакова



Подписано в печать_____________ Формат 60х84 1/16

Печать офсетная. Усл. печ. л _________ Уч.-изд. л _________

Тираж _____ экз._______Заказ ______ Бесплатно

Лицензия № 226 от 12.02.2003г.



Отпечатано на ризографе МГУП

212027, г. Могилев, пр. Шмидта, 3

Могилевский государственныйуниверситет продовольствия

Содержание

1 Общие указания к методике выполнения и защиты лабораторных работ 4

2 Цветные реакции на белки 4

2.1 Биуретовая реакция 5

2.2 Нингидриновая реакция 6

2.3 Ксантопротеиновая реакция 7

2.4 Реакция Адамкевича 8

2.5 Реакция Фоля 9

3 Физико-химические свойства белков 10

3.1 Определение изоэлектрической точки белков 10

3.2 Высаливание белков сульфатом аммония 11

3.3 Необратимое осаждение белков 12

3.3.1 Осаждение белков органическими веществами 12

3.3.2 Денатурация белков при нагревании 13

3.3.3 Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами 13

3.3.4 Осаждение белков органическими кислотами 14

3.3.5 Осаждение белков солями тяжелых металлов 14

3.4 Разделение и очистка белков методом диализа 15

4 Методы определения азота в биологических объектах 17

4.1 Количественное определение общего азота по методу Кьельдаля 17

4.2 Определение различных форм азота в молоке и сыре 21

4.2.1 Метод определения общего количества азота в сыре 23

4.2.2 Метод определения общего количества растворимого азота 24

4.2.3 Метод определения азотосодержащих небелковых соединений 25

4.2.4 Метод определения аминного азота (пептиды, аминокислоты, амиды, аммиак) 25

4.3 Определение белка в молоке по Лоури 26

5 Определение влажности весовым методом 27

5.1 Метод высушивания до постоянной массы 28

5.2 Определение влажности ускоренным методом высушивания 28

5.3 Определение влажности экспрессным методом высушивания 29

6 Нуклеопротеиды 29

6.1 Гидролиз нуклепротеидов дрожжей 31

Список используемых источников 32

1. Общие указания к методике выполнения и защиты лабораторных работ

Перед выполнением лабораторных работ студенты должны самостоятельно изучить теоретический материал соответствующих тем курса, используя рекомендуемую литературу, оформить первых два раздела отчета – «Теория» и «Методика». В разделе «Теория» приводятся основные положения, формулировка теорий и гипотез, уравнения химических реакций с написанием структурных формул, в разделе «Методика» – принципы и изложение метода.

К работе допускаются студенты, выполнившие эти требования и ознакомленные с оборудованием и приборами, знающие свойства используемых химических реагентов и образуемых продуктов реакции в ходе эксперимента.

Во время выполнения работы проводятся соответствующие наблюдения над объектами исследования. В лабораторном журнале отмечаются физические и физико-химические эффекты, сопровождающие химические взаимодействия, делаются расчеты, составляются таблицы и рисунки, формулируется результат, что определяет содержание третьего раздела отчета «Наблюдение и результаты». В последнем разделе студенты делают выводы на основании полученного результата и знания теории.

Записи выполняются четко и аккуратно, без сокращений, за исключением принятых, оставляются поля. До ухода с занятий отчет представляют на подпись преподавателю. Защита проводится в соответствии с графиком выполнения и защиты лабораторных работ.