mikra_2222222

21. Монорецепторные агглютинирующие сыворотки монорецепторные сыворотки — сыво­ротки, имеющие антитела только к одному рецептору-антигену или адсорбированные, поливалентные, дающие реакции агглю­тинации с двумя — тремя родственными бактериями, имею­щими общий антиген, в отношении которого проводилась ад­сорбция. Сыворотки иммунные диагностические

(диагностические антисыворотки) - иммунные с-ки, содержащие Ат против одного (моновалентные, моноспецифические) или нескольких (поливалентные, полиспецифические) Аг. Получают путем иммунизации животных (кроликов и др.) известными полноценными Аг. Технология изготовления зависит от типа с-к (агглютинирующие, преципитирующие, иммунофлюоресцентные и др.) и вида Аг. По достижении необходимого титра животных обескровливают, получают с-ку, в случае необходимости адсорбируют групповые Ат, определяют титр, стерилизуют, контролируют. Лучше пользоваться С.и.д., изготовленными производственным путем и прошедшими государственный контроль. С.и.д. применяют для идентификации возбудителей, как тест-с-ки в серол. реакциях, для установления групп крови и т. д. Хранят в темном месте при +4 -+6°С.

22. РА основана на специфич взаимод антител (агглютининов) с целыми микробными или др клетками. В резте такого взаимод образуются частицы-агломераты, выпад. в осадок (агглютинат).. в две фазы: 1 — специфич соед антигена и антитела, 2 — неспецифич, т. е. образование видимого агглютината. Выпадение агглютината происходит в присутствии электролитов, н-р хлорида натрия. Находящиеся в агглютинате мик-мы остаются живыми, но теряют подвижность.РА широко применяют для серологич диагностики инфекц заболеваний и опред антигенной структуры выделенных микробов. Используют специфическую иммунную сыворотку, полученную иммунизацией животных (кролика, осла, барана) опред мик-ми. Идентификацию микроба проводят в РА на стекле с адсорбированными или монорецепторными сыворотками или в пробирках с видовыми агглютинирующими сыворотками. Адсорбированные сыворотки содержат антитела только к специфическим для данного микроба антигенам, а монорецепторные — только к 1 специфич антигену возбудителя. Видовые сыворотки содержат антитела ко всем антигенам определенного микроба.Существует два основных метода постановки РА:1) ориентировочная РА на предметном стекле, наступающая в течение нескольких минут. Применяется только с целью идентификации вида (серотипа) выделенной из организма больного чистой культуры по его специфичности как АГ к серотипу АТ;2) развернутая РА в пробирках, которая учитывается через 2 часа выдерживания при 37 «С и на следующий день стояния при комнатной температуре. Применяется с целью идентификации микроба и обнаружения АТ в сыворотке крови.

23. Реакция гемагглютинации, РЕАКЦИЯ гемагглютинации — является методом выявления и определения вирусов. Данный метод основан на наличии у некоторых вирусов способности выборочно  агглютинировать эритроциты.Скорость и проявление данного процесса напрямую зависит от количества эритроцитов, от того насколько высока концентрация антител, температура и какой является ионная сила раствора. Реакция гемагглютинации происходит непосредственно, когда силы связывания превосходят силы отталкивания, которые обусловлены отрицательным зарядом клеточной поверхности эритроцитов.Под реакцией гемагглютинации также подразумевают воздействие различных агентов на эритроциты, посредством которых они склеиваются.Известна активная и пассивная гемагглютинация. Под активной гемагглютинацией понимают способность эритроцитов к склеиванию при действии на них бактерий, продуктов обмена, экстрактов трав, змеиных ядов и т.д. Прямая гемагглютинация не является специфичной и не используется для микробиологических исследований.Под пассивной гемагглютинацией понимают способность эритроцитов, которые несут на себе  адсорбированный антиген, агглютинироваться в период перемешивания  с иммунной сывороткой, которая соответствует антигену.  Пассивная гемагглютинация широко применяется для диагностирования заболеваний, носящих как бактериальный, так и риккетсиозный характер.

24 Реакция преципитации — это формирование и осаждение (выпадение в осадок) комплекса растворимого молекулярного антигена со специфическими антителами. Осадок комплекса антиген — антитело называется преципитатом. Реакцию проводят в пробирках, нанося (наслаивая) растворимый антиген на иммунную сыворотку. При оптимальном соотношении антигена и антител на границе этих двух растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата {реакция кольцепре-ципитации). Избыток антигена не влияет на результат реакции кольцепреципитации вследствие постепенной диффузии реагентов к границе жидкости. Если в качестве антигенов в реакции кольцепреципитации используют прокипяченные и профильтрованные водные экстракты органов или тканей, то такая реакция называется реакцией термопреципитации (реакцией Асколи). Широкое распространение получили разновидности реакции преципитации в полужидком геле агара или агарозы: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др. Для постановки реакции двойной иммунодиффузии по Оухтерлони растопленный агаровый гель тонким слоем выливают на стеклянную пластинку и после затвердевания в нем вырезают 250 лунки размером 2—3 мм. В лунки раздельно помещают антигены и иммунные сыворотки, которые, диффундируя в агар, образуют в месте «встречи» преципитат в виде белой полосы.

26. Реакция связывания комплемента. Реакция связывания комплемента (РСК) — серологическая реакция, применяющаяся для выявления в сыворотке крови специфических антител к антигенам возбудителей инфекционных заболеваний. Материалом для исследования является сыворотка крови. Обычно исследуются парные сыворотки.

РСК основывается на образовании иммунного комплекса антитело-антиген (диагностикум) при наличии антител, активирующего (связывающего) комплемент морской свинки (реагент) после его добавления в пробирку с комплексом антиген-антитело. Затем, добавив к исследуемой пробе индикаторную гемолитическую систему (эритроциты барана + гемолитическая сыворотка), можно установить, содержатся ли в ней антитела.

Отсутствие гемолиза эритроцитов (задержка гемолиза) свидетельствует о их наличии, т.е. о положительном результате РСК, а его наличие — об отсутствии в исследуемой сыворотке антител и, соответственно, об отрицательном результате РСК. В последние годы РСК применяется ограниченно, в основном для диагностики инфекционных болезней (клебсиеллезов, клещевого энцефалита).

27. Твердофазный иммуноферментный анализ,– это метод, который широко применяется современной медициной в диагностических целях.С помощью ИФА можно определить содержание гормонов в крови, установить аллерголоческий статус человека (в частности, определить, на какие пищевые продукты, пыльцу, бытовые аллергены у человека развивается аллергич реакция А также возможно диагностировать инфекционные заболевания (ВИЧ, вирусный гепатит и др.).Метод основан на иммунной реакции между антигеном и антителом. Антигены – это чужеродные вещества, которые при попадании в человеческий организм способны вызывать иммунологические реакции (синтез антител, реакции клеточного иммунитета, повышенную чувствительность и пр.). Антитела (иммуноглобулины) – это белки, которые синтезируются под влиянием антигенов и специфически с ними реагируют.

Благодаря ИФА выявляются антитела, которые вырабатываются в организме в ответ на появление чужеродный агентов. Для этого берут специальную пластиковую доску с лунками. На внутреннюю поверхность прикрепляют известные антигены (например, вирус). В лунку добавляют сыворотку. При наличие в ней антител к вирусу, они соединяются. Образуется комплекс антиген-антитело, который выявляется с помощью специальных индикаторов.

На этом же принципе основано и определение аллергенов, количества гормоновв крови человека. Это необходимо для диагностики различных заболеваний. Кроме того, возможно установить наличие беременности на ранних сроках.

28. Методы оценки иммунного статуса . И,С, - это совокуп количественных и функционал показателей, отражающих состояние иммунной системы человека в данный момент времени. 0-анамнез. 1. Общий анализ крови - Общее количество лейкоцитов, содержание лимфоцитов, гранулоцитов, моноцитов.2. Лейкоцитарная формула – дифференцированный подсчет процентного соотношения различных видов лейкоцитов 3. Гуморальный и клеточный типы иммунного ответа. Уровень общих иммуноглобулинов (А, М, G, Е). Антитела (иммуноглобулины) - продукты гуморального имунного ответа, это глобулины, специфически реагирующие с антигеном, вызвавшим их образование.4. Фагоцитарная реакция - процесс захвата, умерщвления и переваривания инфекционных агентов. 5. Система комплемента - это совокуп белков сыворотки крови, циркулирующих в неактивном состоянии, в активированном состоянии участвуют в процессах нейтрализации вирусов, бактерий и др.: высокое содержание комплемента в крови считается благоприятным признаком; снижение уровня комплемента является отрицательным прогностическим показателем.6. Реакция активации лимфоцитов – оценивается активация клеток, участвующих в иммунном ответе (моноцитов, Т- и В-лимфоцитов).7. Интерфероновый статус.Интерферонами называют группу белков с противовирусным действием, вырабатываемых эукариотическими клетками в ответ на внедрение в них ряда биологических агентов - интерфероногенов.

29. Особенности иммунитета Иммунную защиту макроорганизма при вирусных инфекциях осуществляет противовирусный иммунитет Иммунитет направлен на нейтрализацию и удаление из организма вируса, его антигенов и зараженных вирусом клеток. Антитела, образующиеся при вирусных инфекциях, действуют непосредственно на вирус или на клетки, инфицированные им. В этой связи выделяют две основные формы участия антител в развитии противовирусного иммунитета:1) нейтрализацию вируса антителами; это препятствует рецепции вируса клеткой и проникновению его внутрь. Опсонизация вируса с помощью антител способствует его фагоцитозу;2) иммунный лизис инфицированных вирусом клеток с участием антител. При действии антител на антигены, экспрессированные на поверхности инфицированной клетки, к этому комплексу присоединяется комплемент с последующей его активацией, что и обуславливает индукцию комплементзависимой цитотоксичности гибель инфицированной клетки. Когда вирусы переходят из клетки в клетку по цитоплазматическим мостикам, не контактируя с циркулирующими антителами, то основную роль в становлении иммунитета играют клеточные механизмы, связанные прежде всего с действием специфических цитотоксических Т-лимфоцитов, Т-эффекторов и макрофагов. Цитотоксические Т-лимфоциты непосредственно контактируют с клеткой-мишенью, повышая ее проницаемость и вызывая осмотическое набухание, разрыв мембраны и выход содержимого в окружающую среду.

30. Система интерферона: Интерферон представляет собой белок, обладающий противовирусным,противоопухолевым и иммуно-модулирующим свойствами, вырабатываемый многими клетками вответ на внедрение вируса или сложных биополимеров. Открыт в 1957 г. А. Айзексоми Интерфероны альфа  продуцируются в основном В-лимфоцитами периферической крови и по химической структуре являются протеинами (простымибелками). Интерфероны b продуцируются фибробластами, а интерфероны γ - Т-лимфоцитами периферической крови. Эти интерфероны по химической структуре относятся к гликопротеинам (сложным белкам, молекулы которых содержат помимо собственно белка углеводный компонент). Хотя интерферон не обладает прямым противовирусным действием, он способен вызывать такие изменения в клетках, которые препятствуют размножению вируса, формированию вирусных частиц и дальнейшему его распространению. Интерферон действует в нескольких направлениях. Во-первых, он оказывает влияние на клетки, соседние с инфицированной, запуская в них цепь событий, приводящих к подавлению синтеза вирусных белков и в некоторых случаях сборки и выхода вирусных частиц (путём активации олигоаденилатциклазы) Помимо влияния на трансляцию, интерфероны способны активировать сотни других генов (они известны как гены, стимулируемые интерфероном), играющих роль в защите клетки от вирусов^[2][3]. Кроме того, интерферон лимитирует распространение вирусных частиц путём активации белка p53, что ведёт к апоптотической смерти инфицированной клетки^[4][5]. Вторым направлением действия интерферонов является стимуляция  иммунной системы для борьбы с вирусами

31. Аутоантигены. Аутоантитела. Аутоантиге́ны — молекулы веществ в составе клеток, органов и тканей высших животных, которые распознаются при определённых условиях как чужеродные.К ним относят белки, синтез которых начинается после созревания иммунной системы (к примеру входящих в состав спермы, материнского молока)^[1], макромолекулы органов, отделённых от иммунной системы гистогематическим барьером. К ним относят гемато-энцефалический, гемато-ликворный, гемато-тестикулярный, гемато-клубо́чковый, гемато-ретина́льный, гемато-ти́мусный и гемато-лёгочный барьеры.При нарушении проницаемости данных барьеров, либо других нарушениях при которых иммунная система воспринимает нормальные белки как чужеродные. В результате начинается развитие аутоиммунной реакции. Они могут приводить к развитию самыхразнообразных аутоиммунных заболеваний.//Аутоантитела — антитела, способные взаимодействовать аутоантигенами, то есть с антигенами собственного организма. Могут образовываться спонтанно или вследствие перенесенных инфекций .Аутоантитела образуются при аутоиммунных заболеваниях, к которым относятся ревматоидный артрит, рассеянный склероз, системная красная волчанка и т. д. (более 40 заболеваний). В некоторых случаях аутоантитела начинают вырабатываться задолго до клинических проявлений заболевания.

32. Врожденные имунодеф.Первичные иммунодефициты  представляют собой заболевания человека, в основе которых имеется наследственно обусловленный дефект иммунной системы. Это редко встречающиеся нарушения. Происходит сбой отдельных компонентов иммунитета:, гуморального, комплиментарного и фагоцитного .Такие заболевания сопровождают человека на протяжении всей его жизни. Как правило, люди, страдающие первичными иммунодефицитами, погибают от различных инфекций в первые три года. Однако, бывают случаи, не угрожающие жизни и вполне компенсируемы другими составляющими иммунной системы, например, селективная недостаточность иммуноглобулина класса А.///Вторичные иммунодефициты (ВИД) представляют собой нарушения иммунной системы, которые развиваются в позднем постнатальном периоде или у взрослых. Считается, что они не являются результатом какого-то генетического дефекта. Клинически они проявляются часто рецидивирующими бактериальными, грибковыми, вирусными инфекциями, которые плохо поддаются традиционным методам лечения.Такой вид иммунодефицитных состояний возникает как следствие различных воздействий внешней среды на организм человека: радиации, иммуносупрессивной химиотерапии, а также при таких инфекциях, как ВИЧ. По сравнению с первичными, вторичные встречаются намного чаще, диагностировать их гораздо легче.

.

 

33. Гиперчувствительность замед типа Тип 4, или гиперчувствительность замедленного типа, развивается в тех случаях, когда организм не может избавиться от антигена, поглощенного макрофагами. В результате происходит стимуляция Т-лимфоцитов с последующей продукцией ими лимфокинов, которые являются медиаторами целого рада воспалительных реакций. Гиперчувствительность замедленного типа развивается при различных вирусных, бактериальных, протозойных и грибковых инфекциях, а также при гельминтозах. Классическим примером гиперчувствительности замедленного типа является кожная реакция на введение туберкулина — липопротеина, выделяемого из возбудителей туберкулеза Mycobacterium tuberculosis. Очень небольшая популяция Т-клеток (менее одной клетки на тысячу), обладающая реактивностью на туберкулин, после первичного контакта быстро размножается и образует клон активных клеток (клоном называют группу клеток, образовавшихся из одной первоначальной клетки). Индивидум, который имел в прошлом контакт с туберкулезными бактериями или был иммунизирован вакциной БЦЖ, имеет Т-лимфоциты, сенсибилизированные туберкулином. Когда такому индивидуму внутрикожно вводят туберкулин, у него в месте инъекции через 24—48 часов развивается «положительная» реакция (воспаление). 

34. Гиперчувствительность немедленного типа Термин «гиперчувствительность» используют для обозначения иммунного ответа, протекающего в аггравированной и неадекватной форме, в результате чего происходит повреждение тканей. В настоящее время известны 4 типа реакций гиперчувствительности; первые три опосредуются антителами, а медиаторами гиперчувствительности четвертого типа являются преимущественно Т-клетки и макрофаги.

Тип 1, или гиперчувствительность немедленного типа, характеризуется аллергической реакцией, которая развивается немедленно после контакта с антигеном (такой антиген обычно называют аллергеном). Реакция гиперчувствительности немедленного типа зависит от специфического «запуска» антигеном клеток, сенсибилизированных IgE, в результате чего происходит высвобождение фармакологических медиаторов воспалительной реакции — например, гистамина. Ярким примером гиперчувствительности немедленного типа является реакция на пчелиный яд. К этой категории также относятся так называемые атопические заболевания — бронхиальная астма, экзема, сенная лихорадка и крапивница.

35. Живые вирусные вакцины. Живые вакцины  - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность штаммы патогенных бактерий.Аттенуация (ослабление) возможна путём воздействия на штамм химических (мутагены) и физических (температура) факторов или посредством длительных пассажей через невосприимчивый организм. Так же в качестве живых вакцин используются дивергентные штаммы (непатогенные для человека), имеющие общие протективные антигены с патогенными для человека микробами. Примером такой вакцины является БЦЖ и вакцина против натуральной оспы.Возможно получение живых вакцин генно-инженерным способом. Принцип получения таких вакцин сводится к созданию непатогенных для человека рекмбинантных штаммов, несущих протективные антигены патогенных микробов и способных при введении в орг. человека размножаться и создавать иммунитет. Такие вакцины называют векторными.

36. Серотерапия и серопрофилактика Серопрофилактика — профилактика заболеваний инфекционных с помощью иммунных сывороточных препаратов (см. Иммунизация пассивная).

Серотерапия — лечение заболеваний инфекционных иммунными сывороточными препаратами, особенно при токсинемических инфекциях.Серотерапия и серопрофилактика - использование препаратов сыворотки крови с целью лечения или профилактики заболеваний (создания искусственного пассивного иммунитета). Иммунные сыворотки и иммуноглобулины применяют при многих инфекциях как с целью экстренной иммунопрофилактики (при непосредственной угрозе заболевания), так и с целью иммунотерапии.Иммунные сыворотки получают путем гипериммунизации лошадей, от которых можно получить достаточно много крови. Существуют антимикробные и антитоксические сыворотки. С целью иммунотерапии антитоксические сыворотки применяются наиболее часто. Их получают путем многократной иммунизации лошадей соответствующим анатоксином. Затем сыворотки концентрируют и очищают от балластных веществ методом ферментирования и диализа (" Диаферм"). Силу антитоксических сывороток измеряют в международных единицах (ME) по способности нейтрализовать определенную дозу токсина. К антитоксическим относятся противодифтерийная, противостолбнячная, противогангренозная, противоботулиническая сыворотки.

37 Вакцинопрофилактика и вакцинотерап Вакцинопрофилактика—это возможность предотвратить развитие заболевания

Н-р: дифтерия , столбняк, клещ энцефалит, гепатит В, туберкулез , желтая лихорадка .Основной принцип своевременность. В Россиидействует «Нац календарь прививок», благодаря которому все детское население охвачено обязательными прививками. Для взрослого прививки носят рекомендованный характер, но они также являются абсолютно необходимыми.программы вакцинации:при проживании и работе в эндемичных (как территория Урала и Сибири) районах по клещевому ,при планировании беременности,при кормлении грудью,при наличии контакта с больным гепатитом В или носителем вируса гепатита В,при работе с кровью больных, при выезде за рубеж. 

Вакцинотерапия — метод лечения некоторых инфекционных болезней повторными введениями лечебных вакцин как специфич антигенных раздражителей с целью повышения общей и специфической сопротивляемости организма.Вакцинотерап применяют при бруцеллезе  , туляремии , коклюше , стафилококковых и стрептококковых инфекциях и т. д. Применение вакцин показано при затяжном и хроническом течении заболевания. Наиболее эффективным методом введения является внутривенный. Однако его распространение ограничено ввиду угрозы шоковых реакций. Схемы введения вакцин в организм бывают разные в зависимости от характера заболевания и вида вакцины, но чаще они состоят из многократных введений с интервалом 1—6 суток, с постепенным повышением в каждый последующий раз количества вводимых микробных тел

38. Живые вакцины.Живая вирусная вакцина — живая вакцина (см. Живая вакцина), представляющая собой инактивированный вирус. К Ж.в.в. относятся аттенуированные (ослабленные) варианты вирусов, которые утратили большинство свойств патогенности в результате мутации исходно патогенных штаммов (напр., гриппозная вакцина, полиомиелитная пероральная вакцина и др.). В редких случаях удается найти близкородственный слабопатогенный вирус, вакцинация которым обеспечивает иммунную защиту от другого опасного вируса (напр., впервые предложенная в 1796 г. Э. Дженнером вакцинация вирусом оспы коров против натуральной оспы). Ж.в.в. представляет собой эффективное средство профилактики ряда вирусных болезней, с ее помощью удается ликвидировать или значительно снизить заболеваемость (напр., ликвидация оспы, почти полное прекращение заболеваемости полиомиелитом во многих странах). Недостаток Ж.в.в. заключается в том, что она может вызвать небольшие поствакцинальные осложнения.

39. Убитые (инактивированные) вакциныУбитые (инактивированные) вакцины готовятся из инактивированных культур вирулентных штаммов бактерий и вирусов, обладающих полным набором необходимых антигенов. Для инактивации возбудителей применяют нагревание, обработку формалином, ацетоном, спиртом, которые обеспечивают надежную инактивацию и минимальное повреждение структуры антигенов. Высушивание вакцин обеспечивает высокую стабильность препаратов и снижает концентрацию некоторых примесей (формалина, фенола). Храниться вакцины должны при температуре 4-8 °С, замораживание жидких убитых вакцин ведет к уменьшению активности препаратов и повышению их реактогенности за счет выхода отдельных компонентов в жидкую фазу, конформационных изменений белков и других причин.Убитые вакцины обладают в целом более низкой эффективностью по сравнению с живыми вакцинами, но при повторном введении создают достаточно стойкий иммунитет, предохраняя привитых от заболевания или уменьшая его тяжесть. Наиболее частый способ применения - парентеральный. Одна из особенностей производства инактивированных вакцин заключается в необходимости строгого контроля за полнотой инактивации вакцин.

40. Перечень вакцин для плановых профилактических прививок у детей. 12 часовПервая вакцинация - гепатит В 3-7 деньВакцинация –туберкулез 1 месяц Вторая вакцинация - гепатит В 3 месяца Первая вакцинация - дифтерия, коклюш, столбняк, полиомиелит, гемофильная инфекция 4,5 месяцев Вторая вакцинация - дифтерия, коклюш, столбняк, полиомиелит гемофильная инфекция 6 месяцев Третья вакцинация - дифтерия, коклюш, столбняк, полиомиелит, гемофильная инфекция Третья вакцинация - гепатит В 12 месяцев Вакцинация - корь, паротит, краснуха 24 месяца Пневмококковая инфекция, ветряная оспа — вакцинация