СПбГавм

Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии

Учебно-методическое пособие

к лабораторно-практическим занятиям

по ветеринарной микробиологии

Схемы лабораторной диагностики

бактериальных болезней

ПАТОГЕННЫЕ СТАФИЛОКОККИ

Патогенные стафилококки вызывают гнойно-воспалительные процессы различной локализации: местные – фурункулы, абсцессы, экземы и др.; в отдельных органах – ангины, отиты, маститы, эндометриты, циститы, пневмонии и др.; общее поражение – пиемию и септицемию. При накоплении в пищевых продуктах - пищевые токсикозы. Восприимчивы все виды животных, а также человек.

КЛАССИФИКАЦИЯ: сем.Micrococcaceae род: Staphylococcus - 25 видов

• S.aureus- наиболее патогенный, чаще других явл. возбудителем.

• S.epidermidis– условно патогенный;

• S.saprophyticus– гнилостныйmi, очень редко вызыв. болезни.

Патогенез и факторы вирулентности:

Микроорганизм проникает в организм через поврежденную кожу и слизистые оболочки; энтеротоксины – с пищевыми продуктами (мясо, молоко и др.); стафилококки образуют и выделяют экзотоксины: гематоксин, лейкоцидин, энтеротоксин, некротоксин; ферменты вирулентности: коагулазу, фибринолизин, гиалуронидазу, ДНК-азу, лецитиназу.

Методы диагностики

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

Материал для исследования:раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделения из половых органов при эндометритах, кровь при септицемии;

Микроскопия: метод окраски - простой метод и по Граму; микрокартина: шаровидные клетки располагаются беспорядочно и в виде скоплений. напоминающих «виноградные грозди»,Гр+; спор не образуют; капсулу не образуют, неподвижны.

Культивирование: посев на простые питательные среды: МПА, МПБ; на кровяной МПА. Стафилококки – факультативные анаэробы; оптимальнаяt37⁰C; срок культивирования 18-20 часов. галофилы (солевыносливые),могут расти на МПА 10%NaCl. Элективные среды – желточно-солевой агар Чистовича, молочно-солевой агар Петрович с 6,5%NaCl.

Культуральные свойства: На МПА – колонии округлые,выпуклые, блестящие, диаметром 2-5 мм, с ровным краем, могут быть окрашены в золотистый, белый, лимонно-желтый цвет за счёт каротиноидного пигмента, нерастворимого в воде. На МПБ – равномерное помутнение, выпадение рыхлого хлопьевидного осадка. На кровяном агаре патогенные штаммы стафилококков как правило образуют зону бета-гемолиза.

Биохимические свойства S.aureus: протеолитическая активность (пептонизация молока, разжижение желатины). Активная ферментация углеводов, в т.ч. ферментация маннита без газа (в анаэробных условиях); каталазная активность; лецитовителлазная реакция (образование помутнения вокруг колоний) на среде желточно-солевой агар Чистовича. ДНК–зная активность; Плазмокоагуляция (свёртывание) цитратной плазмы крови кролика.

БИОПРОБА:

1. Дермонекротическая проба. Кроликам вводят 0,2 см³2-х млрд.взвеси смыва агаровой культуры в кожу на боку (предварительно выбрить шерсть). Через 24 часа наблюдают образование инфильтрата и некроза, окружённый зоной воспаления.

2.Летальная проба. Кролику вводят в/в фильтрат 2-3-х сут. бульонной куль

туры стаф. 0,75 см³на кг массы тела: происходит быстрая гибель «на игле»

3.Вирулентность для мышей. Мышам вводят суточную бульонную культу

ру стафилококка; через 5-10 сут. развивается абсцесс и происходит гибель.

4.Проба на котятах. При пищевых токсикозах у людей – (выпаивание мо

лока с энтеротоксином вызывает рвоту и энтерит

ФАГОТИПИРОВАНИЕИмеется 22 типа фагов – вирусов, паразитирующих

на стафилококках и разрушающих их. Они используются для диагностики

СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ И АЛЛЕРГИЧЕСКИЙ МЕТОДЫ: в ветеринарии не

использ., в медицине – РДП в агаровом геле с антитоксич. сыворокой, ИФА.

БИОПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ:

1.Стафилококковый антивирус - фильтрат старой бульонной культры;

2. Аутовакцина–от животного выделяют возбудителя, инактивируют его нагреванием и вводят больному.

3. Стафилококковый анатоксин: токсин обезвреживают формалином и применяют как вакцину.

4. Стафилококковый и комплексный пиобактериофаг для лечения.