стоматИностр2012 / Модуль1РУС / Практическая работа №2

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА № 2

Тема: Морфология и структура бактерий. Красители и простые методы окраски.

Актуальность темы. Простые методы окраски позволяют оценить форму, размеры бактериальных клеток и их взаимное расположение. Структурные элементы микробной клетки имеют разную проницаемость для химических веществ и разное сродство к красителям. Правильно приготовленный препарат для микроскопии и правильный метод его окраски могут решить проблему точного установления диагноза и назначение необходимого больному лечения. Пренебрежение к технике приготовления микропрепаратов и выбора адекватного способа их окраски ведут к изменению общей формы микробов, особенности их строения. Это или снижает, или целиком исключает возможность установления причины болезни. В некоторых случаях такие ошибки ведут к определению несуществующего у пациента заболевания.

Цель (общая): уметь окрашивать фиксированные мазки бактерий простым методом. Определять структурные и морфологические признаки бактерий и основные морфологические группы.

Конкретные цели - уметь:

1. Трактовать химический состав бактериальных клеток.

2. Объяснять связь структуры и функции органоидов бактериальной клетки.

3. Готовить фиксированные мазки микроорганизмов

4. Окрашивать мазки простым методом.

5. Различать по морфологии разные формы бактерий.

6. Объяснять принципы классификации бактерий.

Исходный уровень знаний - умений:

1. Объяснять отличия клеток эукариотов от прокариотов. (кафедра биологии).

2. Описывать основные формы клеток. (кафедра биологии).

Для того, чтобы вы могли оценить, отвечает ли исходный уровень ваших знаний - умений необходимым требованиям предлагаем выполнить ряд задач

1. Назовите основные отличия эукариотических и прокариотических клеток.

2. Назовите основные формы клеток.

Информацию для пополнения знаний - умений можно найти в следующих учебниках:

1. Биология/ под ред . В.Н.Яригина.- М: Высшая школа, 2004.

Теоретические вопросы, на основе которых возможное выполнение целевых видов деятельности:

1. Принципы классификации микроорганизмов. К какому царству относятся микроорганизмы

(бактерии, вирусы).

2. Классификация прокариотов по Берджи. Что положено в основу классификации?

3. Структурные элементы бактериальной клетки (уметь изобразить схематично). Чем отличается прокариотическая клетка от эукариотической?

4. Строение и функции клеточной стенки у прокариотов. Отличие строения клеточной стенки грампозитивных и грамнегативных бактерий.

5. Роль и значения капсулы, спор и жгутиков.

6. Что такое рибосомы, мезосомы. Их роль.

7. Характеристика цитоплазмы, нуклеоида.

8. Основные формы бактерий.

9. Простые методы окраски.

Литература для усвоения знаний-умений по данной теме:

1. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология (под ред. Л.Б.Борисова, А.М.Смирновой, Медицина 1994г. с. 3-7 ).

2. Лекции по темам: «Медицинская микробиология: предмет, задачи, методы, история развития и систематика бактерий», «Строение бактериальной клетки. Морфология и химический состав микроорганизмов».

3. Руководство по лабораторным занятиям по микробиологии (под ред.. Л.Б. Борисова. Г. Медицина 1984г. с. 3-19).

4. Воробьев и соавторы. Микробиология. Г. Медицина 1999г. с. 3-7.

5. А. И. Коротяев, С. А. Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология.

Санкт-Петербург, 1998 г. Стр. 7-13, 18-22, 31-46

Содержание обучения должен обеспечить достижение целей обучением, чему оказывает содействие графа логической структуры темы: ”Морфология бактерий. Поверхности структуры бактерий. Простые методы окраски. (приложение №1).

Ориентировочная основа действия при выполнении практической работы.

1. Приготовление фиксированных преператов - мазков. Для приготовления фиксированных препаратов - мазков, на обезжиренное предметное стекло наносят каплю физиологической раствора, в которую микробиологической петлей (петля Генле) вносят исследуемый материал таким образом, чтобы получить тонкий и равномерный мазок диаметром около 1-1,5 см. Если исследуемый материал находится в жидкой фазе, тогда петлей наносят каплю на предметное стекло и получают мазок. Мазки высушивают на воздухе или теплым воздухом, над пламенем спиртовки.

Для фиксации мазка предметное стекло (мазком кверху) медленно проводят 3 раза (не протяжении 3 секунд) через пламя спиртовки. Микроорганизмы при фиксации гибнут, плотно прикрепляются к поверхности стекла и не смываются при дальнейшей обработке. Более продолжительное нагревание может вызвать деформацию клеточных структур.

2. Окраска мазков простым методом.

Фиксированный мазок красят какой-нибудь одной краской, например фуксином водным ( 1-2 мин.) или метиленовым синим ( 3-5 мин.), промывают водой, высушивают и микроскопируют под имерсионным объективом светового микроскопа.

С помощью таблиц определить морфологическую группу бактерий, которая наблюдается.

3. На демонстрационных препаратах изучить морфологию кокковых и палочкообразных микроорганизмов. Обратить внимание на размер клеток, и их расположение.

4. Занести в протокол (зарисовать) основные морфологические группы микроорганизмов.

Задача №1: Мазок из уретры, окрашенный метиленовой синькой, в котором видны клетки бобовидной формы, расположенные парами. Определить, к какой морфологической группе принадлежит выявленный микроорганизм.

После ознакомления с теоретическими вопросами и ходом проведения эксперимента вам предлагается выполнить учебные задачи.

Задача №1: Мазок с мокротой, окрашенный метиленовой синькой, в котором видно клетки, расположенные цепочкой. Определить, к какой морфологической группе принадлежит выявленный микроорганизм.

Задача №2: Возбудитель сибирской язвы в окрашенном метиленовой синькой мазке напоминает стебли бамбука. Определить, к какой морфологической группе принадлежит выявленный микроорганизм.

Приложение 2

Протокол

к практическому занятию №2

Тема: Морфология и структура бактерий. Красители и простые методы окраски.

Задача №1 Изготовление фиксированных мазков

Методы фиксации: 1. _____________________________________________

2. _____________________________________________

3. _____________________________________________

Назначение фиксации: ________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

Задача №2 Простые метода окраски

Используемые реактивы: 1. ________________________________________

2. ________________________________________

Задача №3 Морфология бактерий

Кокковые формы

Рис. 1 Рис. 2 Рис. 3 Рис. 4 Рис. 5 Рис. 6

Стафилококки Стрептококки Микрококки Диплококки Тетракокки Сарцины

Палочковидные формы

Рис. 7 Рис. 8

Большие палочки Средние палочки

дата__________ ______________ подпись преподавателя

Приложение № 1

Граф логической структуры темы:

Морфология бактерий. Внутренние структуры бактерий. Простые методы окраски.