стоматИностр2012 / Модуль2Рус / rus 2_2

9

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ № 2.2

Тема: Микробиологическая диагностика менингококковых, гонококковых и пневмококковых инфекций

Актуальность темы. В настоящее время растет поражение людей гонококками, пневмококками, менингококками. Против данной патологии никогда широко не использовались вакцины, поэтому нынешняя неблагоприятная ситуация развивается при отсутствии коллективного искусственного иммунитета. Обращает на себя внимание, что участились заболевания с нетипичной локализацией отмеченных возбудителей (нагноения ран, поражения среднего уха, слизистой прямой кишки и др.). Известны случаи гонококкового стоматита у человека. Эти клинико-эпидемиологические особенности должны тщательным образом учитываться врачами - стоматологами при отборе патологического материала, диагностике, лечении и профилактике.

Цель: провести бактериоскопическое, бактериологическое и серологическое исследование патологического материала при подозрении на эпидемический цереброспинальный менингит, гонорею и крупозную пневмонию.

Конкретные цели – умения:

1. Трактовать биологические и патологические свойства менингококков, гонококков, пневмококков.

2. Описывать морфологию возбудителей менингита, гонореи, пневмококковой инфекции

3. Определять, какой патологический материал исследуется при эпидемическом цереброспинальном менингите, гонорее, пневмококковой инфекции.

4. Определять в ликворе мегингококковый антиген с помощью реакции преципитации (РП).

5. Объяснять отличия микробиологической диагностики острой и хронической гонореи.

6. Проводить микробиологическую диагностику пневмококковой инфекции.

7. Выбирать препараты для диагностики, профилактики и лечения менингококковых и гонококковых инфекций.

Исходный уровень знаний-умений

1. Различать морфологические особенности бактерий кокковой группы – монококки, тетракокки, гонококки, пневмококки.

2. Метод окрашивания бактерий по Граму и выявление капсулы

3. Объяснять состав питательных сред для ауксотрофных бактерий.

4. Объяснять механизмы реакции преципитации (РП) и РСК .

Для того, чтобы вы могли осознать, отвечает ли исходный уровень ваших знаний, умений необходимым требованиям, предлагаем выполнить ряд заданий:

Задание № 1. Найдите на представленной таблице диплококки. Укажите среди них ГР +, ГР-

Задание №2. Какие реактивы необходимы для окрашивания по методу Грама.

Задание №3. Объясните термин ауксотрофы, ауксины. Среди предложенных питательных сред укажите необходимые для ауксотрофов.

Задание № 4. Схематически нарисуйте взаимодействие AТ и AГ при РП, РСК.

Эталоны ответов к заданиям для самопроверки и самоконтроля исходного уровня знаний:

Задание № 1. Диплококки окрашенные в розовый цвет – ГР-; диплококки окрашенные в фиолетовый – ГР+.

Задание № 2. Метиленовая синька, раствор Люголя, спирт, водный раствор фуксина.

Задание № 3. Мясо-пептонный агар, мясо-пептонный бульон, кровяной агар.

Задание № 4. AТ+AГ+комплемент+гемолитическая система = РСК. преципитины+преципитиногены = РП

Информацию для пополнения знаний-умений можно найти в следующих учебниках:

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / Под ред. Л.Б.Борисова, А.М.Смирновой – М.: Медицина, 1994

2. Коротяев А.И., Бабичев С. А. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология – С-Пб.: Специальная литература, 1998

3. Пяткин К. Д., Кривошеин Ю.С.. Микробиология. – К.: Высшая школа, 1992

4. Руководство к лабораторным работам по микробиологии / Под ред. Л. Б. Борисова – М.: Медицина, 1984

5. Лекция по теме „Морфология бактерий”

Теоретические вопросы, на основе которых возможное выполнение целевых видов деятельности:

1. Таксономическое положение менингококков.

2. Морфологические и культуральные свойства менингококков, их роль в диагностике.

3. Дайте сравнительную характеристику методов лабораторной диагностики при эпидемическом цереброспинальном менингите.

4. Систематика гонококков.

5. Роль гонококков в патологии человека, источник и пути передачи инфекции.

6. Методы лабораторной диагностики, которые используются при острой и хронической гонорее, бленнорее.

7. Иммунитет при менингите, гонорее.

8. Профилактика и лечение менингита, гонореи.

9. Морфологические, физиологичные и антигенные свойства S. рneumoniae

10. Патогенез и лабораторная диагностика при пневмококковой инфекции.

Литература для усвоения знаний-умений по данной теме:

1. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / Под. ред. Л. Б. Борисова, А. Г. Смирновой. –М.: Медицина, 1994. - С.260-267.

2. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология - СПБ: Специальная литература, 1998.- С. 340-341, 342-346.

3. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология. – К.: Высшая школа, 1992.- С.243-256.

4. Руководство к лабораторным работам по микробиологии/ Под. ред. Л. Б. Борисова. – М.: Медицина, 1984.- С.133-141, 152-154.

5. Лекция по теме «Гноеродные кокки».

Содержание обучения должно обеспечить достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры темы: Микробиологическая диагностика менингококковых, гонококковых и пневмококковых инфекций (приложение № 1).

Материалы и оборудование: реактивы для постановки реакции кольцепреципитации ( спинномозговая жидкость, преципитирующая менингококковая сыворотка, пипетки), предметные стекла с мазками культур, микроскоп, готовая реакция Борде-Жангу, мокрота от больного с крупозной пневмонией, бактериальные препараты и таблицы по теме.

Ориентировочная основа действия при выполнении практической работы:

1. Рассмотреть готовый препарат из ликвора, окрашенный по Граму с целью выявления в нем Гр- бобовидных диплококков и подтверждения клинического диагноза: цереброспинальный менингит. Рисунок занести в протокол.

2. Поставить реакцию кольцепреципитации ликвора больных с подозрением на менингококковую инфекцию с менингококковой преципитирующей сывороткой, подтвердить или опровергнуть клинический диагноз. Указать другие методы, которые позволяют выявить антиген менингококка в ликворе.

3. Промикроскопировать окрашенные разными способами мазки, приготовленные из гнойных выделений уретры больного острой гонореей с целью выявления Гр- бобовидных диплококков, расположенных внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз). Рисунки занести в протокол.

4. Учесть результаты предварительно поставленной реакции Борде-Жангу (РСК), что позволяет выявить специфические антитела в сыворотке больных хронической гонореей.

5. Рассмотреть под микроскопом мазки мокроты больного с подозрением на крупозную пневмонию. Выявить в мокроте S. рneumoniae – Гр + диплококки ланцетовидной формы. Рассмотреть мазок из чистой культуры пневмококков, обработанный поливалентной сывороткой к капсульному полисахариду пневмококков, обратить внимание на наличие капсулы и ее размеры. Рисунки занести в протокол.

6. Из представленных бактериальных препаратов выбрать препараты, которые используються для профилактики, диагностики и лечения изучаемых инфекций.

После ознакомления с теоретическими вопросами и в ходе проведения эксперимента вам предлагается выполнить следующие учебные задания:

1. Мужчина, заболевший острой гонореей, самостоятельно лечился антибиотиками. Гнойные выделения прекратились, но после употребления спиртного через два месяца после лечения появились снова. Результаты микроскопии сомнительны. Как подтвердить диагноз?

2. В мазке ликвора, окрашенного по Граму, выявленны Гр - бобовидные дипло- и тетракокки. Какие исследования необходимо провести для подтверждения диагноза: эпидемический цереброспинальный менингит?

3. Ребенок, заболевший 20 дней тому назад, выздоравливает после тяжелого менингококкового менингита. Какое исследование позволит установить, что ребенок перестал быть носителем возбудителя и может посещать детский садик? Какие препараты следует использовать для специфической профилактики менингита в детском садике, где отмечен случай такого заболевания?

Приложение 2

Образец протокола к практическому занятию № :2.2

1. Бактериоскопическое исследование ликвора при подозрении на эпидемический цереброспинальный менингит:

Рис. 1. Neisseria meningitidis. Окраска по Граму

2. Серологическая идентификация возбудителя менингита в реакции кольцепреципитации ликвора больных №1 и №2 с менингококковой преципитирующей сывороткой.

Вывод: реакция позитивная у больного № ____, это означает : _______________________________________________________.

Другие методы выявления менингококковых антигенов в патологическом материале: _______________________________________________________________

3. Бактериоскопическое исследование гнойных выделений из уретры при подозрении на острую гонорею:

Рис. 2. Neisseria gonorrhoae в гное. Окраска по Граму

Рис. 3 Neisseria gonorrhoae в гное. Окраска метиленовым синим

4. Серологическое исследование при подозрении на хроническую гонорею.

Перед постановкой реакции сыворотку больного нужно _____________, чтобы ________________________________________.

Использованные реактивы ______________________________________________________.

Вывод: реакция Борде-Жангу позитивная с сывороткой больного №____, диагноз _________________________________________________________.

5. Бактериоскопическое исследование мокроты при подозрении на крупозную пневмонию.

Рис. 4. Streptococcus pneumoniae. Окраска по Граму

Рис. 5. Реакция набухания капсулы

6. Иммунобиологические препараты по теме:

Диагностические ________________________________________________________

Лечебные ______________________________________________________________

Профилактические _______________________________________________________

Дата________________ Подпись преподавателя: _________________________

приложение 1

Граф логической структуры темы : «Микробиологическая диагностика менингококковой, гонококковой и пневмококковой инфекций»

Гонококки

Экспресс-Метод:

СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД

Граф логической структуры темы : «Микробиологическая диагностика менингококковой, гонококковой и пневмококковой инфекций».

Менингококки

Экспресс-метод:

СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД

Граф логической структуры темы : «Микробиологическая диагностика менингококковой, гонококковой и пневмококковой инфекций»

Пневмококки

Экспресс-Метод:

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД