- •Кафедра клинической лабораторной диагностики Утверждено на заседании кафедры Протокол №…. От…. 2005 года
- •Гомель, 2005 год
- •Практические навыки:
- •Задания для самоподготовки и уирс:
- •Дополнительная литература:
- •Вспомогательные материалы по теме:
- •2. Выявление
- •4. Идентификация. После обнаружения размножения вируса в культуре клеток необходима его идентификация.
- •1. Основные принципы
- •2. Практические особенности
- •3. Основные методы исследования
Министерство здравоохранения Республики Беларусь
УО «Гомельский государственный медицинский университет»
Кафедра клинической лабораторной диагностики Утверждено на заседании кафедры Протокол №…. От…. 2005 года
Методы диагностики вирусных инфекций
Основы систематики вирусов. Взаимодействие вирусов с клеткой.
Индикация и идентификация вирусов. Серодиагностика вирусных инфекций.
Учебно-методическое пособие для студентов
Автор: доцент кафедры, Ильинская Т.Н.
Гомель, 2005 год
Введение.
Вирусы — наиболее мелкие формы живой материи. В определённом смысле вирусная частица —сравнительно крупный нуклеопротеид, проникающий в клетку и «размножающийся» в ней, образуя дочерние популяции. Первооткрывателем вирусов и основоположником вирусологии считают Д. И. Ивановского. Интерес к вирусологии обусловливает, во-первых, ведущая роль вирусов в инфекционной патологии человека, на фоне практически полного отсутствия средств специфической химиотерапии. Во-вторых, на моделях вирусов (как наиболее просто организованных формах жизни) разрешают многие фундаментальные вопросы биологии (например, об интронах, сплайсинге или онкогенах).
Выявление, культивирование и определение количественного содержания вирусов — «золотой стандарт» в диагностике вирусных инфекций.
Цель: получение знаний по основам структуры вирусов, систематики и этапам взаимодействия вирусов с клетками; а также получение практических навыков по вопросам выделения, индикации и идентификации вирусов.
Задачи:
-
Знать современные принципы систематики вирусов
-
Знать этапы взаимодействия вирусов с клеткой.
-
Знать методы культивирования вирусов:
а) в клеточных культурах (первичных, полуперевиваемых и перевиваемых),
б) в куриных эмбрионах,
в) в организмах животных.
-
Освоить методы обнаружения (индикации) вирусов:
а) по цитопатическому действию,
б) по реакциям гемагглютинации и гемадсорбции,
в) по бляшкообразованию,
г) по внутриклеточным включениям.
-
Знать методы титрования вирусов.
-
Знать серологические методы в диагностике вирусных инфекций, особенности их использования.
-
Уметь собирать и доставлять и проводить обработку патологического материала.
-
Иметь навыки в постановке диагностических реакций.
-
Уметь оценить полученные результаты и выдать заключение по проведенному исследованию.
Практические навыки:
-
Сбор и доставка патологического материала.
-
Обработка патологического материала с целью удаления бактериального загрязнения.
-
Получение первичных клеточных культур.
-
Приготовление питательных сред для культивирования клеток in vitro.
-
Заражение куриных эмбрионов.
-
Заражение культур клеток.
-
Обнаружение цитопатического эффекта в культурах клеток.
-
Постановка реакции гемагглютинации и реакции торможения гемагглютинации.
-
Оценка результатов реакции гемадсорбции по окрашенным препаратам
-
Выдача заключения по проведенному исследованию.
Основные учебные вопросы:
-
Понятие о вирионе и вирусе Современные принципы систематики вирусов. Структура вирионов. Химический состав вирионов.
-
Вирусспецифические белки: ферменты вириона и вирусиндуцированные белки клетки.
-
Репродукция вирусов. Основные стадии взаимодействия вирусов с клетками хозяев при продуктивной инфекции
-
Особенности вирусных инфекций. Инфекционность вирусных РНК и ДНК. Тропизм вирусов
-
Клеточные культуры (первичные, полуперевиваемые и перевиваемые). Куриные эмбрионы и организмы животных как модели для размножения вирусов.
-
Методы обнаружения (индикации) вирусов по цитопатическому действию, по реакциям гемагглютинации и гемадсорбции, по бляшкообразованию, по внутриклеточным включениям
-
Методы титрования вирусов
-
Серологические методы в диагностике вирусных инфекций, особенности их использования