Государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«Тихоокеанский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения

Российской Федерации

Кафедра _____микробиологии и вирусологии_____________

УТВЕРЖДЕНО на заседании кафедры протокол № 8 от «29» 04 2013г. Заведующий кафедрой _Шаркова В.А.____

Методические рекомендации для преподавателей

к практическим занятиям

Модуль Общая микробиология____________________________________________

^{(наименование модуля)}

учебной дисциплины (модуля) микробиология, вирусология __________________

^{(наименование учебной дисциплины, (согласно учебному плану)}

для специальности 060101- Лечебное дело_____________________________________

(шифр-наименование специальности)

курс ______2______семестр ____4______

Составитель: ___Шаркова В.А., д.м.н.,___ профессор, заведующая кафедрой_______ (Ф.И.О., ученая степень, звание, должность) Рецензент:_Зайцева Е.А., д.м.н.,_________ профессор кафедры____________________ (Ф.И.О., ученая степень, звание, должность)

Владивосток - 2013г.

1. Тема занятия. Вирусы бактерий – бактериофаги. Выделение бактериофагов из разных объектов, установление вида, титра. Лизогения, ее применение в науке, медицине, народном хозяйстве.

2. Мотивация изучения темы. Феномен бактериофагии имеет важное общебиологическое значение и может быть использован в разных областях науки и практики:

• в теоретических медико-биологических исследованиях;

• для диагностики инфекционных заболеваний - прямой и вспомогательный способы (фаготипирование позволяет установить источник инфекции);

• для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, санации объектов и окружающей среды;

• для индикации экологического неблагополучия;

• как фактор изменчивости бактерий при получении вакцин.

Знания о профилактических и лечебных возможностях бактериофагов могутобогатить набор средств, используемых хирургами, педиатрами, окулистами, отоларингологами, терапевтами, инфекционистами. В отличие от химиопрепаратов бактериофаги безвредны.

3. Цели занятия.

   1. Общая цель: изучения темы направлено на формирование компетенций по ФГОС специальности (компетенции, которые формируются на данном занятии- ОК1, ПК7, ПК11, ПК31, ПК32).

   2. Конкретные цели и задачи.Продемонстрировать значение феномена бактериофагии в теоретических исследованиях, в диагностике, профилактике, лечении инфекционных болезней, в приготовлении вакцин, в народном хозяйстве, освоении космоса.

При этом задачами дисциплины являются:

- приобретение студентами знаний по классификации, морфологии и физиологии вирусов бактерий, в области их биологических и патогенных свойств, влияния на бактерии, возможность использования явления бактериофагии в медицине;

- обучение студентов навыкам идентифицировать неизвестный бактериофаг и с его

помощью – культуру бактерий; определять вирулентность, титр фага; методам и

принципам лечебно – профилактического использования бактериофага.

- на основе изучения учебного материала инициировать самообразовательную деятельность студентов: формировать умение сопоставлять факты, делать выводы, развивать личностные качества, научить стремиться использовать современные достижения науки.

В результате изучения темы студенты должны:

Iуровень -«иметь представление»- о феномене бактериофагии в теоретических исследованиях, в диагностике, профилактике, лечении инфекционных болезней, в приготовлении вакцин, в народном хозяйстве, освоении космоса, обучающиеся способны идентифицировать неизвестный бактериофаг и с его помощью – культуру бактерий; уметь объяснить определение вирулентности, титра фага, дать его качественное описание, сформулировать характерные свойства, указать его отношение к бактериальным клеткам

II уровень «Знать» - вопросы общей вирусологии (морфологии и физиологии бактериофагов), феномен бактериофагии, явления лизогении, варианты взаимодействия фага и бактерии; знать условия, необходимые для качественного проведения фаготипирования и фагодиагностики. принципы постановки реакции нарастания титра бактериофага и ее применением.

IIIуровень«Уметь»- идентифицировать неизвестный бактериофаг и с его помощью – культуру бактерий; определять вирулентность, титр фага; определить целесообразность и возможность использования бактериофага в лечении и профилактике инфекционного заболевания; оценить результаты анализа.

IV уровень - «Владеть»-методам и принципам лечебно – профилактического использования бактериофага; работой с лабораторными приборами и оборудованием, интерпретацией результатов фаготипирования и фагодиагностики, результатов реакции нарастания титра бактериофага и ее применением.

4. Этапы проведения практического занятия.

№ п/п	Название этапа	Цель этапа	Время
1	2	3	4
Вводная часть занятия				5-10 %
	Организация занятия	Мобилизовать внимание студентов на данное занятие
	Определение темы, мотивации, цели, задач занятия	Раскрыть практическую значимость занятия в системе подготовки к профессиональной деятельности, сформировать мотив и, как следствие, активизировать познавательную деятельность студентов
Основная часть занятия				%
1	2	3	4
	Контроль исходных знаний, умений и навыков	Проверка готовности студентов к занятию, выявление исходного уровня знаний, умений и навыков
	Общие и индивидуальные задания на СРС в учебное время	Дифференцированное ориентирование студентов к предстоящей самостоятельной их работе
	Демонстрация методики	Показать ориентировочную основу действия (ООД)
	Управляемая СРС в учебное время	Овладение необходимыми общекультурными, профессиональными компетенциями, исходя из конкретных целей занятия
	Реализация планируемой формы занятия (семинар, практическая работа)	Контроль результатов обучения и оценка с помощью дескрипторов
	Итоговый контроль	Оценивание индивидуальных достижений студента, выявление индивидуальных и типичных ошибок и их корректировка
Заключительная часть занятия				5-10 %
	Подведение итогов занятия	Оценка деятельности студентов, определение достижения цели занятия
	Общие и индивидуальные задания на СРС во внеучебное время	Указание на самоподготовку студентов, ее содержание и характер

5. Ориентировочная основа действия (ООД) по проведению практического занятия (лабораторного, семинарского т.д.).

1. Проверить материалы по самоподготовке (письменные ответы на вопросы домашнего задания, лекции по теме занятия).

2.Сформулировать цель занятия.

3.Контроль исходного уровня знаний.

4.Обсуждение алгоритма фаготипирования бактерий. (см. п.6). Поставить реакцию в лабораторных условиях на культуре E.coli. Провести оценку реакции.

5. Выполнить самостоятельное составление алгоритма фагодиагностики с различным материалом исследования (испражнения, вода):

– выбрать метод и материал для лабораторного исследования; обосновать;

- провести титрование и поставить реакцию,

– обосновать на основании выше перечисленного и данных лабораторных исследований указать предположительный диагноз;

- обеспечить обеззараживание инфекционного материала.

6. Оценить РНТФ (реакцию нарастания титра фага).

7. Оценить явление лизогении и назначение лизогенных бактерий, их негативной роли при лечебно-профилактическом использовании фага, в биотехнологии.

6. Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.

Тестовый контроль итоговый с эталоном ответа

1.Присутствие бактериофага в исследуемом материале определяют

+а)по его литическому действию на бактерии

б)по изменению цвета индикатора питательной среды

в)при помощи микроскопии

г) все перечисленное

2.Фаговая конверсия - это:

а)этап взаимодействия вирулентного фага и клетки

б)передача генетической информации от клетки донора к клетке-реципиенту с помощью вирулентного фага

+в)передача генетической информации от клетки-донора к клетке-реципиенту с помощью умеренного фага

г) все перечисленное

3.Профаг - это:

а)предшественник фаговой частицы на стадии сборки

+б)нуклеиновая кислота умеренного фага, встроенная в ДНК бактерии

в)нуклеиновая кислота вирулентного фага в цитоплазме

г) все перечисленное

4.В исследуемом материале можно определить наличие фаговых частиц (вирионов) методами:

а)Грация

б)Отто

в)Аппельмана

+г) все вышеперечисленное

5.Титр бактериофага - это:

а)максимальное разведение фильтрата исследуемого материала, в котором определяется хоть одна фаговая частица

б)количество фаговых частиц в единице объема исследуемого материала

+в)максимальное разведение или минимальное количество фага, дающее лизис бактерий

г) все перечисленное

6.Реакция нарастания титра фага (РНТФ) позволяет установить:

а) наличие возбудителя в исследуемом материале

б) титр бактериофага

+в)стадию инфекционного процесса

г) все перечисленное

7.Что используется для идентификации неизвестного фага?

а)тест культура

б)субстрат (фильтрат) с фагом

в)среда - плотная или жидкая

+г)все перечисленное

8.Бактериофаг выделяют из исследуемого материала:

+а)путем ультрафильтрации через бактериальные фильтры

б)путем ультрацентрифугирования

в)обрабатывают материал хлороформом

г) все перечисленное

9. Где применяется лизогения?

+а)в научных исследованиях

б)в онкологии

в)как индикатор экологических факторов

г) все перечисленное

10.Что не характерно для репродукции бактериофага?

а) адсорбция и проникновение генома

+б) депротеинизация, освобождение геномавнутри бактериальной клетки

в) репродукция нуклеиновой кислоты и капсида

г) сборка вирионов и высвобождение их из клетки

Задача

Проведена реакция нарастания титра фага (материал – испражнения больного). Результаты: 2-ой день заболевания титр – 10^-3, при повторном исследовании на 3-й день заболевания – титр фага 10^-7, 4-й день – 10^-2.

Вопросы: О чем говорят изменения титра фага? Какая предположительно тест-культура была использована?

Ответ. О фазе развития инфекционного процесса: нарастание титра фага говорит о развитии инфекционного процесса, снижение – реконвалесценции. Инфекция кишечная, тест-культура, предположительно, E.coli.