Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методы / 5.doc
Скачиваний:
141
Добавлен:
19.06.2017
Размер:
103.42 Кб
Скачать

МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА № 5

ТЕМА: Микробиологический метод исследования. Физиология микроорганизмов. Питание и его обеспечение в лабораторных условиях: питательные среды, стерилизация, дезинфекция, контроль их качества

МОТИВАЦИОННАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА: Обнаружение возбудителя в материале от больного, в объектах внешней среды, пищевых продуктах – один из прямых и доказательных методов диагностики. Осуществить его, не зная культуральных свойств микроба невозможно. Учитывая это, студент должен ознакомиться с каждым слагаемым термина «культуральные свойства». Особое внимание уделено конструированию питательных сред, на котором выращивают, выделяют чистые культуры возбудителей, методам их приготовления, стерилизации. Методы стерилизации необходимо знать врачу любой специальности. Навыки проверки её эффективности нужны врачам хирургам, акушерам-гинекологам, отоларингологам, стоматологам, окулистам (всем специальностям, которым необходимы стерильный перевязочный и другой материал).

УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ:

- ознакомиться с подготовительной работой, предшествующей посевам и выделению чистой культуры возбудителей;

- научиться работать со справочной литературой, посвященной способам приготовления питательных сред и их контролю;

- обучится методам стерилизации, дезинфекции, проверки их качества.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ И ВВОДНОГО

КОНТРОЛЯ ЗНАНИЙ

  1. Конечная цель микробиологического исследования.

  2. Суть терминов: «культуральные свойства микробов».

  3. Особенности питании бактерии и его формы.

  4. Ферменты микробной клетки, классификация.

  5. Процесс усвоения углеводов, белков, жиров.

  6. Дыхание как акт биологического окисления у микробов.

  7. Энергетический и конструктивный обмен у микробов, особенности метаболизма.

  8. Питательные среды: простые, сложные, элективные, дифференциально-диагности-ческие. Требования к ним и контроль качества.

  9. Способы стерилизации (аппаратура, режим для определения объектов, назначение).

  10. Проверка качества стерилизации.

  11. Условия культирования: температурный оптимум, аэрация, рН, скорость и характер роста.

  12. Понятие об асептике и антисептике (дезинфекция), контроль.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ С ПОЛНЫМ РЕГЛАМЕНТОМ ПРОТОКОЛА ЗАНЯТИЯ И ЕГО ОФОРМЛЕНИЕМ

№ п/п

Наименование учебного элемента (задания)

Методическое решение

Регламент

протокола

1.

Основные механизмы питания, их этапы:

-диосмотический процесс (питание, освобождение от метаболитов)

- электрокинетический механизм (4 этапа)

-ферменты микробов: экзо-и эндоферменты

-классификация типов питания (основные группы и виды)

Поздеев О.И. Медицинская микробиология. Под редакцией Покровского В.И. М., 2006.

Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2005

Зарисовать при подготовке дома

2.

Классификация и основа питательных сред

Приложение 1, 2

Заполнить таблицу, составить кроссворд по вопросам при самоподготовке дома

3.

Общие требования к качеству питательных сред

Справочник по микробиологическим, вирусологическим методам исследования под ред. М.О. Биргера. М., 1982

Составить перечень при самоподготовке дома

4.

Микроорганизмы, по-разному относящиеся к температуре, температурный оптимум

Медицинская микробиология. Под ред. В.И. Покровского. М., 1999

Дать определение и примеры, вписать в протокол

5.

Методы стерилизации, аппаратура, их назначение

-физический методы

-химические методы

Приложение 3-4

Приложение 5

Составить обоб- щающую таблицу при самоподготовке дома.

Составить кросс-ворд по вопросам при самоподготовке дома с коррекцией на занятии

6.

Способы контроля стерилизации и стерильности

Медицинская микробиология. Под ред. В.И. Покровского. М., 1999.

Приложение 6

Составить перечень способов при самоподготовке дома

7.

Стерилизация стеклянной посуды, пипеток.

Подготовить к стерилизации пипетки, чашки Петри, пробирки под руководством ассистента

На занятии

8.

Техника посева культуры на питательную среду: плотную, жидкую, учесть готовые

Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2005.

Приложение 7

Пересеять культуру с МПА на чашку Петри, на скошенный агар (МПА), в МПБ

Приложение 1

КЛАССИФИКАЦИЯ И НАЗНАЧЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД (ЗАПОЛНИТЬ ТАБЛИЦУ)

Среда

Общий состав

По назначению

Простая среда

Сложная среда

Для посева

Накопление

Транспортировка,

консервирующие

Элективная

Дифференциально-диагностическая (ДДС)

1. МПА

2. Кровяной МПА

3. Сахарный МПА

4. МПБ: простой, сахарный

5. Асцит – агар

6. Сывороточный МПА

7. Пептонная вода

8. Среда Гисса

9. Среда Пешкова

10. Среда Эндо

11. Среда Левина

12. Среда Рапопорт

Приложение 2

ВОПРОСЫ К СОСТАВЛЕНИЮ КРОССВОРДА (СКАНВОРДА) ПО ТЕМЕ «ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ»

1. Сокращенное название мясо-пептонный агар.

2. Сокращенное название мясо-пептонный бульон.

3. Жидкая среда для определения углеводолитической активности (автор).

4. Полужидкая среда для тех же целей (автор).

5. Питательная основа в средах Левина, Плоскирева, Эндо.

6. Общее дифференцирующее вещество в средах Левина, Плоскирева, Эндо.

7. Почему среда Плоскирева называется еще «бактоагаром Ж»? Какой дополнительный дифференцирующий компонент в нее входит?

8. Как называется по типу питания микроб, самостоятельно синтезирующий из свободных химических элементов сложные соединения и обеспечивающий себя всем необходимым?

9. Дайте синоним слову «паратроф».

10. Каково назначение микробов, хорошо растущих и в условиях живого организма, клеток и на мертвом органическом субстрате (питательная среда).

11. Микробы, растущие только на искусственной питательной среде.

12. Стеклянное дополнение к средам Гисса и Рапопорт.

Примечание: Кроссворд составить и зарисовать дома. Последовательность вопросов можно не соблюдать.

Приложение 3

МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ (ФИЗИЧЕСКИЕ), АППАРАТУРА, РАЗЛИЧИЕ

МЕТОДЫ

АППАРАТУРА

ТЕМПЕРАТУРА

ВРЕМЯ

ОБЪЕКТ СТЕРИЛИЗАЦИИ

Кипячение

Стерилизатор

+100С0

20-30мин

Инструменты: Шприцы, иглы, шелк

Прокаливание

Газовая горелка, спиртовка

До покраснения

не лимитировано

Бактериальные петли, препаровательная игла, инструмент

Автоклавирование

Автоклав

120С0

0,5-1атм.

20-30 мин.

МПА, МПБ, пептонная вода, физиологический раствор

Текучим паром

Аппарат Коха, и его заменители

+80,+100С0

30-60 мин. ежедневно

3 дня подряд

Среды с углеводами

Сухим паром

Печь Пастера

+160,+170С0

90 мин.

Стеклянная посуда

Пастеризация

Аппарат Коха,

водяная баня

65-70С0

70-80С0

60 мин.

5-10 мин.

Молоко, заготовки и пр.

Тиндализация (дробная стерилизация)

Аппарат Коха

56-58С0

70-80С0

По 1 часу

5 дней

Сыворотки, витамины и пр.

Фильтрование

Фильтры Зейтца:

(диски из смеси асбеста с целлюлозой), мембранные фильтры (из коллодия ацетата, целлюлозы). Свечи Шамберлана, Беркефельда

(коалин в смеси с кварцевым песком)

22-25С0

Не регламентировано

Сыворотки, лекарства, все, боящиеся температуры

Ультрафиолетовое облучение

Бактерицидные лампы БУФ-30, ЛКУФ-3

Комнатная t0

Зависит от объема и назначения помещения

Очистка воздуха от бактерий, вирусов

ДЕЗИНФЕКЦИЯ - химическое обеззараживание.

Химические методы (обеззараживание материала с помощью химических веществ): используют 3-5% раствор карболовой кислоты, фенола, 3% лизола, 4% формалина, 10-20%

раствора хлорной извести, антисептики (борная кислота, глицерин, фенол), добавляя к сывороткам, вакцинам.

Приложение 5

Вопросы к кроссворду «Дезинфекция, дезинсекция, дератизация»

1. Способ химического уничтожения микробов вне живого организма.

2. Способ химического уничтожения насекомых-распространителей или переносчиков инфекций.

3. Общедоступное средство для дезинфекции.

4. Физический фактор отпугивания насекомых.

5. Физические способы защиты человека от насекомых.

6. Какой способ для защиты человека от грозящих нападением животных (собак, кошек) является наиболее эффективным в неблагоприятной эпидемической обстановке.

7. Способ уничтожения грызунов - источников инфекции.

Примечание: цифру правильного ответа округлить.

Приложение 6

Контроль стерильности

1. Физические методы:

- максимальные контактные термометры;

- манометры на автоклавах (соответствие шкалы давления шкале температуры: 0,5 атм. - 112-115С0, 1 атм - 119-120С0);

Приложение 4 Методы стерилизации и аппаратуры

Стерилизуемый материал

Методы стерилизации

Аппаратура

Паром под давлением

Прокаливание в пламени

Сухим жаром

Кипячение

Пастеризация

УФО

Текучим паром

Ультра фильтрация по Зейтцу

Стерилизатор

Аппаррат

Коха

Автоклав

Горелка

Печь Пастера

Бактерицидная лампа

Фильтр Зейтца

Лабораторная стеклянная посуда

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

Перевязочный материал

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

Шпатели

31

32

33

34

35

36

37

38

39

40

41

42

43

44

45

Питательные среды без углеводов

46

47

48

49

50

51

52

53

54

55

56

57

58

59

60

Питательные среды с углеводами

61

62

63

64

65

66

67

68

69

70

71

72

73

74

75

Лекарственные формы (жидкие)

76

77

78

79

80

81

82

83

84

85

86

87

88

89

90

Таблетированные лекарственные формы

91

92

93

94

95

96

97

98

99

100

101

102

103

104

105

Примечание: выделить цифру правильного ответа

- изменение физических свойств бумаги, ваты (+163С0 - бумага желтеет, +175С0 и выше - бумага и вата обугливаются, сгорают).

2. Химические методы:

- регистрация плавления порошка S, кристаллизации, карамелизации углеводов, изменение цвета различных веществ: бензонафтол – 110С0, сера – 119С0, бензольная кислота - 120С0 и пр.

3. Биологические методы (бактериологические)

- среды с тест-объектами бактерий помещают с объектами стерилизации, а после в термостат (при качественной стерилизации роста микробов не будет, при плохой - рост);

- «посев» простерилизованного объекта (пипетки, стекла, шприцы и пр.) на МПА, затем в термостат на 18 часов, при появлении роста стерилизация некачественная.

Приложение 7

Соседние файлы в папке Методы