Самостійна робота 4

Самостійна робота №4

1. Рекомбінантна ДНК (recombinant DNA, rDNA) - молекула ДНК, отримана за допомогою методів генетичної інженерії (молекулярне клонування). Молекула поєднує в собі генетичний матеріал, виділений з різних біологічних джерел, створюючи таким чином певну ДНК послідовність. Отримана таким чином векторна ДНК може реплікуватись в клітинах-хазяях. Векторами для рекомбінантної ДНК можуть бути плазміди, віруси, штучні хромосоми на основі дріжджових чи тваринних хромосомальних елементів. Існує велика кількість різних систем, що дозволяють здійснювати експресію привнесених генів. Окрім загальної назви "рекомбінантна ДНК", таку молекулу іноді називають химерною ДНК. В технології рекомбінантної ДНК загалом використовують паліндромну послідовність, котра після відповідних маніпуляціях має тупі та липкі кінці. За допомогою технології рекомбінантної ДНК можливо привнести в геном одного організму певний ген, виділений з геному іншого організму, створюючи таким чином генетично модифікований організм. Технологія рекомбінантної ДНК і генетична рекомбінація є різними поняттями.

Білки, синтезовані в результаті експресії рекомбінантної ДНК називаються рекомбінантними білками. Інколи, під час присутності привнесеної молекули ДНК в геномі, експресія протеїну не відбувається. В цьому випадку вимагається використання специфічних векторних систем та певної структури ДНК конструкції

Полімеразна ланцюгова реакція - це метод, що імітує природну реплікацію ДНК і дозволяє виявити єдину специфічну молекулу ДНК в присутності мільйонів інших молекул.  Відкриття методу полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) стало одним з найбільш визначних подій в галузі молекулярної біології за останнє десятиліття. Це дозволило підняти медичну діагностику на якісно новий рівень.  Вперше складу інгредієнтів, що входять у реакційну суміш для постановки полімеразної ланцюгової реакції, і основні принципи використання праймерів (коротких штучно синтезованих молекул ДНК) для одержання копій ДНК були описані Kleppe з співавт. в 1971 році. Проте тоді ще не була продемонстрована основна риса ПЛР - експоненційний збільшення кількості копій фрагмента вихідної ДНК як результат реакції.  У 1983 році Kary Mullis запропонував метод, який став надалі відомим як полімеразна ланцюгова реакція. Суть методу полягає в багаторазовому копіюванні (ампліфікації) в пробірці певних ділянок ДНК у процесі повторюваних температурних циклів. На кожному циклі ампліфікації синтезовані раніше фрагменти знову копіюються ДНК-полімеразою. Завдяки цьому відбувається багаторазове збільшення кількості специфічних фрагментів ДНК в мільярди разів, що значно спрощує подальший аналіз.  У цей період було виявлено унікальні мікроорганізми, що живуть в гейзерах. Їх ферментна система, зокрема ДНК-полімераза, витримує високі температури гарячих джерел і зберігає свою біологічну активність аж до 95 ° С, що є необхідною умовою для проведення полімеразної ланцюгової реакції.  Результатом відкриття ПЛР стало майже негайне практичне застосування методу.  Перспективи практичного використання ПЛР-діагностики  В даний час найбільш швидко розвиваються п'ять основних напрямів генодіагностікі:  діагностика інфекційних захворювань;  діагностика онкологічних захворювань;  діагностика лейкемій та лімфом;  діагностика раку грудей;  діагностика інших злоякісних захворювань;  діагностика генетичних захворювань;  ідентифікація особи;  судова медицина, криміналістика;  трансплантація органів і тканин;  визначення батьківства;  діагностика патогенів в їжі. 

Денатурація

Відпал

Елонгація

→ →

Постановка ПЛР

Ампліфікація

Контроль за проходженням реакції ампліфікації

→ →

2.

1. Використання джерел літератури останніх 3 років

Літературних джерел останніх трьох років немає.

2. Легкість сприйняття матеріалу

Реферат написаний доволі зрозуміло та легко.

3. Застосування наукових термінів

Так, наукові терміни присутні.

4. Наявність латинської термінології

Латинської термінології немає.

5. Наявність розгорнутого плану та його дотримання

Розгорнутого плану немає.

6. Чи є цікава інформація з наукових публікацій

Ні, немає.

3. Ключові слова

Полімеразна ланцюгова реакція, ампліфікація РНК, аналіз ПЛР-ампліфікованої ДНК, підготовка ПЛР-продуктів, гель-електрофорез, гібридизація, контролі, чутливість.

4. Джерела

-http://ru.osvita.ua/vnz/reports/biolog/27015/

-https://uk.wikipedia.org/wiki/%D0%A2%D0%B5%D1%85%D0%BD%D0%BE%D0%BB%D0%BE%D0%B3%D1%96%D1%8F_%D1%80%D0%B5%D0%BA%D0%BE%D0%BC%D0%B1%D1%96%D0%BD%D0%B0%D1%82%D0%BD%D0%B8%D1%85_%D0%94%D0%9D%D0%9A

-http://ua-referat.com/%D0%9F%D0%BE%D0%BB%D1%96%D0%BC%D0%B5%D1%80%D0%B0%D0%B7%D0%BD%D0%B0_%D0%BB%D0%B0%D0%BD%D1%86%D1%8E%D0%B3%D0%BE%D0%B2%D0%B0_%D1%80%D0%B5%D0%B0%D0%BA%D1%86%D1%96%D1%8F_2