Методы клинической генетики
Выполнила: Студентка 4 курса Группы ЛД2А-С14 Живова М.А.
Цитогенетический метод
Цитогенетика - область науки, изучающая структуру и функции хромосом. Для этого применяются следующие методы: световая
микроскопия, электронная и конфокальная лазерная микроскопия, люминисцентная микроскопия.
Цитогенетический метод включает исследование кариотипа, определение частоты сестринских хроматидных обменов, частоты и типов аббераций хромосом, исследование полового
хроматина.Бочков Н.П. Клиническая генетика:
Учебник. - М.: Медицина,1997
Объектом исследования служат
соматические, мейотические и интерфазные клетки. В различных ситуациях применяется культивирование фибробластов, клеток костного мозга, эмбриональных тканей, хориона, клеток амниотической жидкости.
Наиболее удобным объектом является
культура лимфоцитов периферической крови. Для этого у консультируемого производится забор 1-2 мл. венозной крови с последующим культивированием ее на фитогемагглютинине в течение 48-72 часов. За 2-3 часа до завершения культивирования используют колцемид (колхицин), который
разрушает веретено деления клетки на стадии
Бочков Н.П., Захаров А.В., Иванов В.И. Медицинскаяметафазыгенетика(метод.- М.: Медицина,метафазных1984 пластинок).
На следующем этапе культуру клеток обрабатывают
гипотоническим раствором с целью разрушения ядерных мембран. После фиксации клеточной суспензии препарат окрашивают. Для этого используются простые (Q,G,R,С), дифференциальн .
Бочков Н.П., Захаров А.В., Иванов В.И. Медицинская генетика.- М.: Медицина, 1984
В настоящее время разработаны молекулярно-цитогенетические методы диагностики хромосомных перестроек. Один из них - метод флюоресцентной гибридизации "in situ" (FICH). Он основан на обработке денатурированной хромосомной ДНК специфическими зондами, которые обладают тропизмом к определенным сегментам ДНК. Далее проводится окрашивание флюорохромами. После этого окрашенные хромосомы визуализируются с помощью люминисцентной микроскопии. Метод более информативен по сравнению с простыми и позволяет идентифицировать незначительные по размерам внутри- и межхромосомные перестройки, а также любой вариант известных хромосомных мутаций.
Бочков Н.П. Клиническая генетика: Учебник. - М.: Медицина,1997
Показания для проведения цитогенетического исследования:
1)наличие случая хромосомного заболевания (ХЗ) в семье, либо подозрение на ХЗ по клиническим проявлениям: множественные микро- и макроаномалии у пробанда, особенно в сочетании с отставанием в психо-речевом и моторном развитии; задержка умственного и физического развития;
2)первичное невынашивание беременности (2 и более спонтанных аборта, либо выкидыша, мертворождения), первичная аменорея, бесплодие у женщин и мужчин, что может быть обусловлено носительством кого-либо из родителей
сбалансированных хромосомных перестроек;
Давиденкова Е.Ф., Либерман И.С. Клиническая генетика. - М.: Медицина, 1975
3)пренатальная диагностика хромосомной патологии, а также в случае, если у кого-либо из родителей имеет место наличие транслокационного синдрома;
4)подозрение на синдромы с хромосомной нестабильностью (пр.: лейкоз, наследственные анемии, иммунодефицитные состояния);
5)оценка эффективности лечения, прогноза при лейкозах;
6)оценка
Давиденкова Е.Ф., Либерман И.С. Клиническая генетика. - М.: Медицина, 1975
Популяционно-статистический метод (ПСМ)
Основное направление метода - исследование частот генов, спектра, распространенности наследственной патологии в различных этнических группах (популяциях), а также влияния на эти показатели факторов популяционной динамики (инбридинг, дрейф генов, миграции и др.). Популяционно- статистические исследования в СССР
были начаты в 70-х гг. сотрудниками лаборатории генетической эпидемиологии Института медицинской генетики АМН
СССР, переименованный в настоящее время в Медико Генетический Научный
Центр РАМН (МГНЦБочковРАМН).П..Клиническая генетика: Учебник. - М.: Медицина,1997
Результаты подобных работ имеют важное значение в научном плане и для практического здравоохранения регионов, так как в ходе исследований одномоментно проводится скрининг населения по всем формам наследственной патологии, отягощенным семьям оказывается квалифицированная медико-генетическая консультативная помощь ведущими сотрудниками МГНЦ РАМН, применяются новейшие диагностические методы (ДНК-типирование, цитогенетическое, биохимическое исследование, компьютерная диагностика). В итоге такие исследования позволяют оценить объем медико-генетической, лечебно-реабилитационной помощи населению, региональные медико-генетические консультации получают возможность для формирования диагностических, профилактических регистров.
Иными словами результаты популяционно-статистических исследований являются
залогом адекватной диспансеризации населения в области наследственной
патологии. Бочков Н.П. Клиническая генетика: Учебник. - М.: Медицина,1997
Биохимический метод (БМ)
Методы аналитической биохимии применяются, главным образом, для диагностики наследственных болезней обмена (НБО). Для этого выделяют несколько этапов:
1 этап: применяются ориентировочные биохимические тесты, являющиеся основой массового скрининга всех новорожденных, либо селективного
"просеивания" в группах риска по конкретной наследственной патологии обмена. В России проводится массовый скрининг с целью раннего выявления фенилкетонурии (ФКУ) (проба Феллинга, тест Гатри) и врожденного гипотиреоза(ВГ) (исследование тироксина -Т4 и тиреотропного гормона - ТТГ).
Эти исследования возлагаются на региональный уровень медико-генетического консультирования (МГК).
Бочков Н.П. Клиническая генетика: Учебник. - М.: Медицина,1997