ГБОУ ВПО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России

Кафедра гистологии, эмбриологии и цитологии

Тема:

Световая микроскопия

Световая

микроскопия является основным, специфическим методом изучения микроскопических биологических объектов : клеток и внутриклеточных структур.

Возможности световой микроскопии

Световой микроскоп позволяет изучать объекты с размерами в десятые доли микрометра - в тысячи раз более мелкие , чем объекты , доступные для изучения невооруженным глазом.

1 мкм = 10-6м = 10-3мм

Световой микроскоп – это точный оптико- механический прибор. Существует множество моделей световых микроскопов.

БИОЛАМ

МИКМЕД

Устройство светового микроскопа

1 – окуляр

2 - тубус

3 - тубусодержатель

4 - винт грубой наводки 5 - микрометренный винт

6 - подставка

7 - зеркало

8 - конденсор, ирисовая диафрагма и светофильтр 9 - предметный столик

10 - револьверное устройство 11 - объектив

Методы световой микроскопии

Методы микроскопии выбираются в зависимости от характера и свойств изучаемых объектов, так как последние влияют на контрастность изображения.

Метод светлого поля

Метод светлого поля в проходящем свете применяется при изучении прозрачных препаратов с включенными в них абсорбирующими (поглощающими свет) частицами и деталями. При наличии в препарате абсорбирующего элемента происходит частичное поглощение и частичное рассеивание падающего на него света, что и обусловливает появление изображения.

Микроскопия в темном поле

Темнопольная	микроскопия может применяться
для прижизненного изучения		неокрашенных
биологических	объектов —	простейших,

изолированных клеток, тканевых культур, для исследования субклеточных структур живых

неокрашенных клеток.

Свет от осветителя и зеркала направляется на препарат конденсором специальной конструкции — т. н. конденсором тёмного поля.

Фазово-контрастная микроскопия.

Этот метод служит для получения контрастных изображений прозрачных и бесцветных живых объектов.

Метод фазового контраста обеспечивает контрастность изучаемых неокрашенных структур за счет специальной кольцевой диафрагмы, помещаемой в конденсоре, и так называемой фазовой пластинки, находящейся в объективе.

Метод интерференционного контраста

В интерференционном микроскопе пучок света от осветителя разделяется на два потока: один проходит через объект и изменяет по фазе колебания, второй идет, минуя объект. В призмах объектива оба пучка

соединяются и интерферируют между собой. В результате строится изображение, в котором участки микрообъекта разной толщины и плотности различаются по степени

контрастности.

А – светлопольное изображение; В – флуоресцентное изображение; С- изображение, полученное методом дифференционно-интерференционного контраста при большом увеличении; D – флуоресцентное изображение при большом увеличении; Е – наложение С