Билеты экзамен / Bilet_13

Билет 13

1.Генетические основы многообразия иммуноглобулинов и TCR.

Генетический контроль иммунных ответов.

1.контроль специфичности

2.контроль силы

В иммуногенетике исторически существовало две точки зрения о кодировании специфичности антител и TCR:

1.контроль специфичности. Гены антител и TCR экспрессируются подобно всем другим генам один раз и на всю жизнь, они передаются по наследству в неизменном виде, при этом мутации крайне редки. Иммуногеном представлен огромной библиотекой генов, кодирующих все необходимые специфичности. Действует положение – один ген – одна полипептидная цепь иммунокомпетентной молекулы.

2.иммуногеном, кодирующий специфичности, нестабилен и представлен относительно небольшим количеством генов, которые в зависимости от потребности подвергаются рекомбинациям и мутациям, составляя цистроны – временные ассоциации генов.

Информация как бы хранится в виде букв; действует положение: два гена – одна полипептидная цепь. В дальнейшем развились две точки зрения.

ТОНЕГАВА объединил две точки зрения и показал, что информация хранится как бы в словах. Действует положение: 3, 4 гена – одна полипептидная цепь. Существенным выводом является то, что и в постэмбриональном периоде ДНК в иммунокомпетентных клетках( и только в них) подвергается бесконечным рекомбинациям и мутациям( то есть в лимфоцитах – что обеспечивает кодирование до 1 миллиарда специфичностей антител и TCR, то есть доводка специфичности эффектора происходит в каждом конкретном случае непосредственно в ходе иммунного ответа). Главный механизм рекомбинации – сплайсинг.

В эмбриональном периоде происходит коммитмент в лимфоцитах, результатом является формирование клонов, отличающихся по генетическому набору. ДНК лимфоидной некоммитированной клетки CD10+ характеризуется ограниченным числом V – генов( ответственны за вариабельные участки антител), небольшим и ограниченным числом D, I, C – генов. D, I – соединяющие гены.

Все они пространственно разделены интронами, в результате различных рекомбинаций происходит формирование клонов.

ДНК коммитированного лимфоцита характеризуется сформированным набором, состоящим из L – сегмента, одного V, 1D, 1I и IC – генов, которые частично разделены интронами. К рождению формируется 50 миллионов Т – клонов и около 50 миллионов В – клеток.

В постэмбриональном периоде после попадания антигена, на него начинается иммунный ответ, то есть прайминг( «брачная ночь» - наивный лимфоцит + антиген), целью которого является умножение в числе клеток клона, биосинтез специфических иммунокомпетентных молекул( антител или CD4, CD8), способных уничтожить этот антиген.

У человека гены, кодирующие специфичности, расположены в 4 разных хромосомах и составляют пять кластеров.

Эмбриональный период.

--- - некодирующие последовательности

Гены Н – цепей Ig:

1. ДНК полипотентной( некоммитированной) В – клетки( CD10+)

L---V1, V2, …Vn---D1…D30( для Н - цепей)---I1…I6( обеспечивают

соединение)---s Cμ s Cδ s Cγ3---s Cγ1 s Cα1 s Cγ2 s Cγ4 s Cε s Cα2.

9 С – генов, s – свичь сегмент – обеспечивает переключение

2. ДНК коммитированного В – лимфоцита L---V50 D5 I2 --- s Cμ s Cγ3 s Cα1

Постэмбриональный период.

Варианты цитоплазматической мРНК после прайминга:

L V120 D5 I2 Cμ ( строится тяжелая цепь IgM)→L V120D5 I2 Cγ3→L V120D5 I2 Cγ3

2. Этиопатогенез аллергических реакций I типа. Атопическая конституция

*I тип гиперчувствительности - анафилактический, при котором первичное поступление аллергена вызывает продукцию плазмацитами IgE. Стимулируют выработку IgE-антител ИЛ-4 и ИЛ-10, выделяемые Th2, а угнетают - γ-интерферон и ИЛ-2, выделяемые Тh1.

Синтезированные IgE прикрепляются Fс-фрагментом к Fc-рецепторам (FcεRl) тучных клеток в слизистых оболочках, соединительной ткани и базофилов в крови. При повторном введении аллергена на тучных клетках и базофилах образуются комплексы IgE с аллергеном (перекрестная сшивка FcεRl антигеном), вызывающие дегрануляцию клеток. Из гранул в ткани выбрасываются биологически активные медиаторы: вазоактивные амины (гистамин), протеогликаны (гепарин), липидные медиаторы (лейкотриены, простаuландины, тромбоцитактивирующий фактор), ферменты (триптаза, химаза, карбоксипептидаза, катепсин G), и цитокины (TNF-α, IL-4, -13, -3, -5, GM-CSF)

. Хемотаксические факторы привлекают нейтрофилы, эозинофилы и макрофаги. Эозинофилы выделяют ферменты, катионные белки, лейкотриены и основной белок, повреждающий эпителий.

Тромбоциты тоже выделяют медиаторы аллергии. Перечисленные компоненты вызывает сокращение гладких мышц, ослабление сердечной деятельности, развитие коллапса, повышение сосудистой проницаемости, отек.

*УЧАСТНИКИ: антитела( IgE, IgG4), Th2, В – лимфоциты, клетки – мишени 1 – ого и 2 – ого порядков( тучные клетки, эозинофилы, базофилы).

*АЛЛЕРГЕНЫ – антигены, способные формировать сенсибилизацию организма. Mr. = 10 – 70 кДа. Антиген с маленькой молекулярной массой не образует эфирных мостиков между молекулами IgE на тучных клетках, антиген с массой более 70 кДа с трудом проникает через оболочку. По молекулярной массе выделяют: полные антигены( пыльца) и гаптены( лекарственные антигены).

*Примеры :Анафилактический шок - протекает остро с развитием коллапса, отеков, спазма гладкой мускулатуры; часто заканчивается смертью.

Крапивница - увеличивается проницаемость сосудов, кожа краснеет, появляются пузыри, зуд.

Ангиоэдема - отек подкожных и субмукозных тканей; часто сочетается с крапивницей.

Аллергический ринит или риноконъюнктивит - развивается отек, раздражается слизистая.

*Медиаторы воспаления

1.медиаторы ранней фазы воспаления – через 10 – 20 минут и длится всего 1 – 2 часа. Проявления – на коже: гиперемия, зуд, волдыри; на бронхах: быстро купирующийся бронхоспазм.

•Предсуществующие, быстро высвобождающиеся при активации клеток. Это гистамин( повышает сосудистую проницаемость, гиперсекреция слизи, сокращение гладких мышц, зуд и т. д.), он опосредован через три рецептора к гистамину: Н1, Н2, Н3.

Также к этим медиаторам относят: эозинофильный хемотаксический фактор, нейтрофильный хемотаксический фактор, серотонин, арилсульфатаза.

•Предсуществующие медиаторы прочно связаны с гранулами: гепарин – антикоагулянт, высвобождает фосфолипазу С, липопротеинкиназу, тормозит активность комплемента; химаза – повышает сосудистую проницаемость; триптаза – протеолиз и деградация пениногена; пероксидаза – вызывает инактивацию лейкотриенов.

2.медиаторы поздней фазы воспаления. Поздняя фаза наступает через 6 – 8 часов и длится до 24 – 48 часов. Проявления: кожная реакция – гиперемия, папула, зуд; бронхи – пролонгированный бронхоспазм. Для купирования поздней фазы используют стабилизаторы клеточной мембраны тучных клеток и кортикостероиды.

•Медиаторы, которые образуются в ходе активации клеток( лейкотриены С4, D4, F4 – вызывают сокращение гладкой мускулатуры, увеличивают проницаемость, генерация простагландинов).

Относят: простагландины Е2 – повышают артериальное давление, сокращают гладкие мышцы; тромбоксан А2 – стимулирует агрегацию тромбоцитов и сокращение гладкой мускулатуры; фактор активации тромбоцитов – повышение сосудистой проницаемости, усиление агрегации тромбоцитов; эозинофильный и нейтрофильный факторы – катионные белки, энзимы и прочее.

К атопической конституции отнесены, прежде всего, аллергический ринит, атопический дерматит и атопическая форма бронхиальной астмы - у детей она составляет до 95%. У взрослых другая пропорция: на долю атопической бронхиальной астмы приходится меньше случаев - приблизительно 70%.

3. Лабораторные методы диагностики аутоиммунных заболеваний

Специфическая диагностика аутоиммунных заболеваний основана на выявлении аутоантител или аутореактивных Т-лимфоцитов, специфичных к различным тканевым, клеточным и внутриклеточным аутоантигенам

Иммунофлюоресценция и ИФА

Аутоиммунная патология	Аутоантигены	Диагностические тесты
Аутоиммунный тиреоидит Хасимото	Тиреоглобулин, микросомальная фракция (тиреопероксидаза)	ИФА, радиоиммунный
Тиреотоксический зоб Грейва	Рецептор к ТТГ	Иммунофлюоресценция
Хронический атрофический гастрит типа А в сочетании с пернициозной анемией	Внутренний фактор Касла Аутоантигены париетальных клеток	Иммунофлюоресценция
Миастения гравис	Ацетилхолиновый рецептор Аутоантигены скелетных мышц	Иммунофлюоресценция
Сахарный диабет типа I	Аутоантигены -клеток	Иммунофлюоресценция
Синдром Гудпасчера	Аутоантигены базальных мембран лёгких и почек	Иммунофлюоресценция
Вульгарная пузырчатка	Эпидермальный кадхерин	Иммунофлюоресценция
Идиопатическая нейтропения	Аутоантигены нейтрофилов	Иммунофлюоресценция
Рассеянный склероз	Основной белок миелина	ИФА, радиоиммунный
СКВ	ДНК, РНК, нуклеопротеины	ИФА, радиоиммунный, иммунофлюоресценция
Ревматоидный артрит	Fc-фрагмент IgG Синовиальный антиген	Ревматоидный фактор Иммунофлюоресценция