- •1. Принципы и современная классификация вирусов.
- •2. Вирион. Ультраструктура, химический состав, типы симметрии капсида.
- •3. Репродукция вирусов. Стадии взаимодействия вирусов с клеткой.
- •4. Методы культивирования вирусов
- •5. Способы индикации вирусов. Цпд, рга, га, внутриклеточные включения.
- •6. Методы идентификации вируса. Ртга, рн, цветная реакция.
- •7. Вирусы, их строение, биологические свойства, размножение вирусов, культивирование в живых системах. Классификация вирусов.
- •8. Вирусологический метод исследования. Средства индикации и идентификации вирусов.
- •9. Вирус бешенства. Культивирование, внутриклеточные включения. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
- •§ 2. Род Flavivirus.
- •11. Пикорнавирусы. Классификация. Характеристика вирусов полиомиелита, Коксакки и есно. Паттогенез, иммунитет. Лабораторная диагностика, специфическая профилактика полиомиелита.
- •§ 1. Характеристика семейства.
- •§ 2. Род Enterovirus.
- •12. Вирусы гриппа. Антигены. Классификация. Изменчивость. Патогенез заболевания. Лабораторная диагностика. Эксперсс - диагностика. Специфическая профилактика и терапия гриппа.
- •§ 1. Характеристика семейства.
- •§ 2. Род Influenzavirus a.
- •§ 3. Род Influenzavirus в.
- •§ 4. Род Influenzavirus с.
- •13. Вирус парагриппа человека: свойства, заболевания, которые вызываются. Лабораторная диагностика и профилактика.
- •§ 1. Характеристика семейства.
- •§ 2. Подсемейство Paramyxovirinae.
- •§ 1. Характеристика семейства.
- •§ 2. Род Orthohepadnavirus.
- •§ 3. Род Hepacivirus.
- •15. Вирус иммунодефицита человека (вич). Свойства, классификация. Источники инфекции, пути передачи. Патогенез.
- •§ 1. Характеристика семейства.
- •16. Вирус гепатита а, пути передачи возбудителей человеку. Характеристика вирусов. Патогенез. Лабораторная диагностика гепатита а, лечение и профилактика.
- •17. Вирусы гепатитов е, пути передачи возбудителей человеку. Характеристика вирусов. Патогенез. Лабораторная диагностика гепатита е, лечение и профилактика.
- •18. Лабораторная диагностика, профилактика и лечение вич - инфекций.
- •19. Этиология внутрибольничных инфекций.
- •20. Профилактика внутрибольничных инфекций. Методы микробиологического котроля за внутрибольничными инфекциями, их значение. Профилактика внутрибольничных инфекций
- •21. Задачи клинической микробиологии, разновидности и свойства условно - патогенных организмов.
- •22. Вирус герпеса
- •23. Онкогенные вирусы
- •24. Аденовирусы
5. Способы индикации вирусов. Цпд, рга, га, внутриклеточные включения.
Перед выявлением вируса в клетках его обычно отделяют от клеток хозяина путем их разрушения с помощью многократного замораживания и оттаивания или растирания со стерильным песком. Полученный вирусосодержащий материал центрифугируют или пропускают через бактериальный фильтр, обрабатывают антибиотиками для предотвращения бактериального загрязнения.
Индикация (выявление) вирусов
Индикация вирусов в культуре клеток осуществляется, прежде всего, по цитопатическому действию (ЦПД) вирусов, сроки и характер которого зависят от свойств вируса, проявляясь дегенеративными изменениями клеток с последующей их гибелью и отслаиванием от стекла.
Полная дегенерация клеток сопровождается значительными изменениями в виде пикноза ядра и цитоплазмы, отслаиванием клеточного монослоя от стекла. Частичная дегенерация культур кл. может протекать по следующим типам:
гроздеобразования (округление, увеличение и слияние клеток с образованием гроздевидных скоплений, типично для аденовирусов),
очаговой деструкции (очаги пораженных клеток на фоне в целом сохранившегося монослоя), характерной для вирусов гриппа;
симпластообразования (слияние кл. с образованием гигантских многоядерных клеток в виде симпластов или синцитиев, характерных для вирусов кори, паротита, парагриппа, респираторно-синцитиального, герпеса, иммунодефицита человека).
Пролиферативный тип ЦПД с трансформацией клеток в злокачественные, обладающие неограниченными потенциями к росту, способны вызывать онкогенные вирусы.
Сроки, в течение которых наступает ЦПД, вариабельны (например, 1-2 дня у полиовирусов, 7-14 суток у аденовирусов).
Если в инфицированных культурах клеток ЦПД отсутствует или слабо выражено, проводят «слепые пассажи», т.е. заражают культуральной жидкостью новые культуры клеток.
Индикация вирусов с помощью реакции гемадсорбции (РГа).Сущность этой реакции заключается в способности эритроцитов человека или животных адсорбироваться на поверхности клеток, инфицированных рядом вирусов в ранние сроки их репродукции (до развития ЦПД) в результате действия гемагглютининов – гликопротеидов, входящих в состав суперкапсида вируса. Для постановки РГА в культуру клеток добавляют 0,2 мл 0,5%-й взвеси эритроцитов, выдерживают 15-20 мин при температуре 40, 200 или 370 С в зависимости от свойств вируса, после чего взвесь эритроцитов удаляют и производят учет реакции под малым увеличением микроскопа по скоплению эритроцитов на отдельных клетках или на всем монослое.
Индикация вирусов по внутриклеточным включениям. Репродукция некоторых вирусов (оспы, герпеса, бешенства) приводит к образованию внутриклеточных включений, локализующихся в цитоплазме или в ядре клеток и представляющих собой скопления вируса (или его антигенов). Включения выявляют путем световой микроскопии культур клеток, окрашенных по Романовскому- Гимзе или другими методами, а также с помощью прямого флюорохромирования (например акридиновым оранжевым) с последующей микроскопией препаратов в люминесцентном микроскопе.