навыки в фак хирургии
.pdf5. Через 3-4 минуты для снятия возможной неспецифической агглютинации к каждой капле добавляют 5-6 капель физиологического раствора. Затем пластинку покачивают в течение 5 минут.
6. Оценка результатов: результат оценивают по наличию или отсутствию агглютинации невооруженным глазом.
oНаличие хорошо выраженной агглютинации в капле - резус-
положительная принадлежность исследуемой крови.
oОтсутствие агглютинации в этой капле (гомогенная окраска) - резус-
отрицательная принадлежность исследуемой крови (Rh-).
NB! Результат считается истинным лишь при отсутствии признаков
агглютинации в правой
(контрольной) капле.
31
Метод коиглютинации с желатином
(лабораторный способ определения резус-фактора)
1. Реакцию проводят в центрифужных пробирках, в которые помещают:
o равные объемы исследуемых эритроцитов,
o сыворотки антирезус
o 10% раствор желатина.
32
2. Инкубируют на водяной бане при температуре 45-48°С на 10 минут.
3. После чего добавляют десятикратный объем изотонического раствора хлорида натрия.
33
4. Пробирки 2-3 раза переворачивают и учитывают результаты реакции по наличию агглютинатов, видимых невооруженным глазом:
oПри появлении агглютинатов - исследуемая кровь относиться к Rhположительной,
o При их отсутствии - Rh-отрицательной.
34
На заметку
35
Проба на индивидуальную совместимость
Пробы на индивидуальную совместимость проводятся в процессе подготовки к гемотрансфузии.
Пробу на совместимость следует производить двояко: проба на совместимость по группам крови системы АВО проба на совместимость по резус-фактору.
Предварительно для постановки реакций у реципиента из вены берут кровь, которую разделяют на сгусток и сыворотку (отстаиванием или центрифугированием).
а) Проба на индивидуальную совместимость по системе АВО
1. На белую поверхность (тарелку, пластинку) наносят крупную каплю (0,1 мл) сыворотки крови реципиента и маленькую капельку (0,01 мл) крови донора из флакона.
2. Смешивают их между собой, периодически покачивая тарелку (пластинку).
Реакция проводится при температуре 15-25°С.
3.Оценивают результат через 5 минут:
o Отсутствие агглютинации эритроцитов донора свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента по системе АВО. Необходимо сразу приступить к проведению пробы на совместимость по резус-фактору.
o Появление агглютинации указывает на их несовместимость — такую
кровь данному больному переливать нельзя.
36
б) Проба на индивидуальную совместимость по резус-фактору
2варианта пробы на совместимость по резус-фактору:
■проба с использованием 33% полиглюкина,
■проба с использованием 10% желатина.
Проба с использованием 33% полигл юкина
1. Реакция проводится в центрифужной пробирке без подогрева в течение 5 минут. На дно пробирки вносят 2 капли сыворотки реципиента, 1
каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина.
2. Содержимое перемешивают, наклоняя пробирку и вращая ее вокруг оси, распределяя содержимое по стенкам ровным слоем. Пробирку вращают в течение 5 минут.
3. Добавляют 3-4 мл физиологического раствора и аккуратно перемешивают, 2-3 раза наклоняя пробирку до горизонтальной плоскости (не взбалтывая!).
37
4. Оценивают результат:
oНаличие агглютинации эритроцитов свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента по резус-фактору, такую кровь переливать нельзя.
o Равномерное окрашивание содержимого в пробирке, отсутствие реакции агглютинации указывает на совместимость крови донора и
реципиента по резус-фактору.
38
Проба с использованием 10% желатина
1. На дно пробирки помещают 1 каплю эритроцитов донора, предварительно отмытых десятикратным объемом физиологического раствора.
2. Добавляют 2 капли подогретого до разжижения 10% раствора желатина и 2 капли сыворотки реципиента. Раствор желатины перед употреблением необходимо тщательно просмотреть. При помутнении или появлении хлопьев - желатина непригодна.
3.Содержимое пробирки перемешивают и помещают в водяную баню при температуре 46-48°С на 10 минут.
4.После этого в пробирку добавляют 6-8 мл физиологического раствора, перемешивают содержимое, переворачивая пробирку 1-2 раза
5.Оценивают результат:
o наличие агглютинации свидетельствует о
несовместимости крови донора и реципиента, ее переливание недопустимо.
o Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным и в ней не наблюдается реакция агглютинации,
кровь донора совместима с кровью реципиента по резус-
фактору.
Для большей надежности рекомендуется контролировать результат под микроскопом при малом увеличении.
При совместимости крови донора и реципиента по системам АВО и резус-фактора можно приступать к дальнейшим операциям. Однако у некоторых реципиентов (при наличии неполных скрытых или блокирующих антител, низкой активности иммунных антител) указанные пробы не выявляют несовместимости. В этих случаях проводится индивидуальный подбор крови донора, который выполняется в специальных лабораториях и требует особого оснащения. При этом проводят более чувствительные пробы на совместимость (реакция агглютинации в солевой среде, непрямая проба Кумбса, проба на совместимость с желатином).
39
На заметку
40