![](/user_photo/65070_2azrz.gif)
2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Молекулярный_и_генетический_анализ_некоторых_семейств_гликозил_гидролаз
.pdf![](/html/65070/203/html_UeIpPclMTJ._8ZA/htmlconvd-n0iCXr21x1.jpg)
|
|
|
|
|
|
Рисунок 7 |
|
AAB08024 |
218 |
&&EoPz &&z&bb |
&&&&& o |
TG< 4 |
>LCY |
& ozz & GP@z |
|
TERRFFEASW- HKYNG--------KYYFSY |
TGDN-PYGPFTYQ |
|
|||||
AAC67554 |
219 |
STRRFFEGPS- NKVGN--------LYVLQY |
TG< 4 |
>VEI |
TATK-PDGPYYWK |
|
|
CAA89208 |
216 |
DPHRFFEASW- HKYNG--------KYYFSY |
TG< 4 |
>LCY |
VGDN-PYGPFTYQ |
|
|
JQ1936 |
203 |
EGHEFFEAPS- R KGE--------TYYFIT |
SV< 4 |
>LCY |
TSKHPTK -FKYG |
|
|
CAA71485 |
215 |
AGSAQIEAPF-ILRKGD--------YYYLFA |
WG<11>LVVGRSKQ- TGPYLDK |
|
|||
CAA99586 |
209 |
NNGGALEAPT- TYQNG--------YYYLMV |
FD<11>IAYGRSKS- TGPYLDK |
|
|||
BAA20372 |
210 |
NNNGALEAPT- TYQNG--------YYYLMV |
FD<11>IAYGRSKS- TGPYLDK |
|
|||
AAA32682 |
194 |
SGTH EEGSY-MFQYGD--------YYYLFY |
AG<17>IKV |
RSTS-PT D VDS |
|
||
BAA06646 |
218 |
GNHSRIEGPYVLYNP T-------QYYYLYL |
YG< 9 |
>IRV |
RSKK-PDGPYYDA |
|
|
AAC27699 |
180 |
TDIK TEAPH-LYHIGD--------YYYLLT |
EG< 7 |
>ATI |
RSKH- EGPYEIH |
|
|
AAC97375 |
180 |
TPIK TEAPH-LYHIGD--------NYYLLT |
EG< 7 |
>ATI |
RSSH- EGPYEVH |
|
|
AAB97967 |
180 |
TDIA TEGPH-LYYIND--------MYYLMT |
EG< 7 |
>ETI |
RSKT- HGPYEIQ |
GH43 |
|
AAB08692 |
180 |
TPLC TEGA -LYRHA --------WYYLMA |
EG< 7 |
>VVV |
RSKN- DGPYELH |
||
AAA63610 |
179 |
KDVI PEGPH-LYKKDG--------YYYLLH |
EA< 7 |
>ISV |
RSKE- FKWFEGC |
|
|
CAB52932 |
168 |
SGLK PEAPH-LYRIGD--------WWYLLI |
EG< 7 |
>VSV |
RSRS-PRGPWQGA |
|
|
AAD20253 |
182 |
TNVKLVEGPH-LYQIND--------YYYLFA |
QG< 7 |
>EVV |
RSKT- DTLSFEA |
|
|
BAA78558 |
>131 |
YEGPIAEGT -FMKRNG--------WYYLIIPEG< 6 |
>QTV |
RARN- YGPYERR |
|
||
AAB87371 |
220 |
KIDG EEGS -AYKING--------KYYITTIRW< 7 |
>ECV |
RADK- DGPYEGR |
|
||
AAB87371 |
1082 |
PAPFMFEDSG- NKIGN--------TYYYSYCTN<15>IAY |
TSKS-PMGPWEYK |
|
|||
AAB95326 |
1516 |
PAPYMFEDSG- NKIGN--------TYYYSYCTN<13>IAY |
TGKS-PVGPWEYR |
|
|||
CAA40378 |
242 |
DAPYLFEDSG- HKYNG--------KYYYSYCIN<13>IGY |
VSDN-PMGPFTYK |
|
|||
CAB13699 |
245 |
DAPFMFEDSG- HKYNG--------TYYYSYCIN<13>IGY |
TSSS-PMGPFTYR |
|
|||
AAB03089 |
674 |
EGIQGVEGPT-AFKFNK-DDVEEDTWCVLLDHFG--------------------- |
|
||||
CAA63265 |
278 |
GVIG NEGPTGFVDNQD----ASKTW-LYVDEYN--------------------- |
|
||||
CAB66926 |
322 |
MVGQHREAPA-IFKHQN--------TYYMIT |
GC< 7 |
>ALAHAAES- MGPWETL |
|
||
CAB61805 |
234 |
AIADDIEGPY-HRCPA PVTNSGHETCVWRY |
D------GI |
AML -TDGPE NT |
|
||
AAD32559 |
697 |
TTKNLFEAPQ-VYKVQG-----QNQYFMIVE |
RG< 6 |
>FRS |
TATS- NGPWTPQ |
|
|
AAC26524 |
355 |
TKANLFEGV -VYKVQG-----QNQYLMIVE |
MG< 5 |
>FRS |
TASS- S SWTPQ |
GH62 |
|
BAA85252 |
208 |
TKENLFEAV -VYTVDG-----QNKYLMIVE |
MG< 5 |
>FRS |
TADS- D EWTVQ |
||
CAB01408 |
208 |
ARNDLFEAV -VYTVDG--GEGDTKYLMIVE |
IG< 6 |
>FRS |
TASS- G EWTAQ |
|
|
CAA38390 |
497 |
GNSYLFEAA -VYKLDG-----QNRYLLMVE |
YI< 1 |
>GRA |
S PG-QRPA MAH |
|
|
AAD36914 |
79 |
DELYGVEDPR- TKIGD-------EYYMVYT |
YS<30>DAA |
FPEK- N K VMF |
|
||
BAA30206 |
75 |
WEKKGIEDPR-VVKLGK-------RYVMTYT |
YD<39>SGA |
LPQK- N E IMY |
|
||
CAB50037 |
75 |
CEIMGVEDPR-IVKIGK-------DYLMTYT |
YD<39>SGA |
LPEK- S E VMY |
GHLP |
||
AAD36300 |
99 |
FQPSYAYDPR-VVKIED-------TYYITFCTDD<28>NGV |
FPRK- N K VML |
||||
AAD35864 |
108 |
QEFLGCEDPR-VFFR S-------RFELLYT |
KG<28>KRY |
SIKS-TL E VPV |
|
||
AAC07180 |
110 |
YDLWGVEDPR-VYEIDG-------KLFMTYT |
RT<45>NAF |
VKTD-KLMLYHRL |
|
||
BAA79294 |
123 |
IDFWGAEDPR- TSVNS-------HDVLTYT |
RT<35>DEAPLATS- KNA ILS |
|
|||
CAB02016 |
204 |
SDNSAACR Y-VVRDA -------VYRMWFC |
RG<34>DMIEYPCVDHRG RF |
|
|||
AAD36485 |
184 |
ETTKEIECPD-LVRIGEKD------ILIYSITST< 2 |
>VLFSMGEL-KE K-LNV |
|
|||
AAA27562 |
217 |
DLGYMWECPD-FFEINGQS------VMLFSPQGV< 8 |
>KNI |
SVAY- V DQLNL |
|
||
AAA25568 |
216 |
ARGYMIECPn-lvwidqqp------vllfcpQGL< 7 |
>QNI |
PNMYVADQLNL |
|
||
CAA68542 |
217 |
SHGGVWECPD-LFELPVDGNPNQKKWVMQVSVGN< 3 |
>SGGSGM Y- V DFDGT |
|
|||
BAA24915 |
226 |
HALGGIECPD-LFEMTAGDGTRH--WVFGASMDA< 3 |
>GLP |
TFAY- T SWNGT |
|
||
AAB51115 |
286 |
CHDGVWEC A-VLKVDGK-------WVILLNINP< 3 |
>FGGSAT Y- V EFDGH |
GH32 |
|||
CAA24618 |
217 |
FLGYQYEC G-LIEVPTEQDPSKSYWVMFISINP< 3 |
>AGGSFN Y- V SFNGT |
||||
BAA12320 |
227 |
SSVTGWEVPD-MFQLPIQGTNETT-WVIIFTPAQ< 3 |
>AGGNGVVA- T SFDGE |
|
|||
CAA04131 |
235 |
AQGGVWEC G-LFKLPLDGGSSTK-WVITSGLNP< 5 |
>TVGSGT Y- V EFDGT |
|
|||
S33920 |
265 |
RWAFNFETG -VFSLDEYGYNPHGQIFSTIGTEG< 9 |
>TSIHDMLW- S NV RN |
|
|||
BAA24360 |
1015 |
ELGTVWEL V-LLPLGTDSTGKKKHIFIINPHEK<10>QRD |
EVYY- I TWDRD |
|
|||
CAA21433 |
238 |
DLDHMFECPD-FFTLK GGEH----YLKVSTMPS-------HRDYI- Y SYQLN |
|
||||
AAA03516 |
249 |
ANTGMWECPD-FFP SLKGLNG------------<18>DLTRYEYY-TV T LTD |
|
||||
BAA01107 |
302 |
PGTGMWECV -FFP SKKNGNG------------<18>DDDRHDYY- I TYDDN |
|
||||
CAB08015 |
336 |
TVTDEIERA -VFKMNG--------KWYLFTDSR<15>MLG |
VSNS- TGPYKPL |
|
|||
CAB39327 |
348 |
LVTDEIERA -VFKMNG--------LWYLFT |
TR<15>MLG |
VSTS- TGPYKPL |
|
||
AAA88584 |
495 |
MVSDELERPN-VVKLGD--------KYYLFT |
SR<22>MLG |
VSDQLTN -YKPL |
|
||
AAA71925 |
541 |
MVTDEVERPS-VVKMGG--------KYYLFT |
SR<22>MLG |
VSDS- R KYRPL |
GH68 |
||
AAB36606 |
395 |
CVNDQT RPQ-VYLHNG--------KYYIFTISH<13>VYG |
VGDG- RSDFQPM |
||||
AAC36458 |
281 |
GVNDQT RPH-FVFQDG--------KYYLFTISH<13>VYG |
LSDN- TGPYSPM |
|
|||
AAC36056 |
281 |
GVNDQT RPH-YVFQDG--------KYYLFTISH<13>VYG |
VGEH- FGPYRPM |
|
|||
AAA27702 |
272 |
GVNDQT RPH-VVFQNG--------LTYLFTISH<13>VYG |
VSENG FGPYEPL |
|
|||
AAC36942 |
270 |
GVNDQMERPH-VIFQNG--------LTYLFTISH<13>LYG |
VSENG FGPYEPL |
|
|||
|
|
*** ************************** |
|
************ |
|
||
|
|
|
N5 |
|
|
N6 |
|
ВЫВОДЫ
1.У молочнокислых бактерий Lactobacillus plantarum NRRL B-4496 и Pediococcus pentosaceus NRRL B-11465 обнаружена сходная структура локуса утилизации сахарозы: дивергентно расположенные ген scrA, кодирующий сахарозоспецифичный второй фермент фосфотрансферазной системы, и гены scrB, scrR и agl, кодирующие β-фруктозидазу, регуляторный белок и α-глюкозидазу
соответственно. Сходство 5′-концевых частей генов scrB у L. plantarum и
P.pentosaceus достигает 98.6%.
2.Проведено картирование в субтеломерных районах хромосом Saccharomyces cerevisiae девяти полимерных генов ферментации мелибиозы: ген MEL2 локализован в левом плече седьмой хромосомы (VII L), MEL3 – в XVI L, MEL4 –
в XI L, MEL5 – в IV L, MEL6 – в XIII R, MEL7 – в VI R, MEL8 – в XV R, MEL9 – в
XR и MEL10 – в XII R.
3.У штамма S. cerevisiae CBS 2888 обнаружено три гена ферментации мелибиозы MEL12-MEL14, представляющие новое дивергентное семейство α-галактозидазных генов. Проведено картирование этих генов в субтеломерных районах левых плечей хромосом S. cerevisiae: MEL12 в – IX, MEL13 – в XV и
MEL14 – в X.
4.Обнаружена закономерность локализации полимерных генов семейств утилизации углеводов у S. cerevisiae. Гены ферментации сахарозы, мальтозы и мелибиозы, принадлежащие одному семейству (SUC, MAL, MEL1-MEL11 или MEL12-MEL14), никогда не находятся в противоположных концах одной и той же хромосомы (даже в разных штаммах).
5.Обнаружена гомология аминокислотных последовательностей β-фруктозидаз, принадлежащих двум разным семействам гликозил-гидролаз: GH32 и GH68. Эти два семейства объединены в β-фруктозидазное суперсемейство.
6.Обнаружена гомология белков β-фруктозидазного суперсемейства с β-D-ксилозидазами и α-L-арабинофуранозидазами семейств GH43 и GH62 гликозил-гидролаз. Оба семейства включены в состав β-фруктозидазного суперсемейства. В состав этого суперсемейства также включена группа гипотетических белков, вероятно, кодирующих гликозидазы.
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
Статьи:
1.Naumoff D.G. β-fructosidase superfamily: homology with some α-L-arabinases and β-D-xylosidases // Proteins: Structure, Function, and Genetics, 2001, V. 42, P. 66-76.
2.Наумов Д.Г. и Лившиц В.А. Молекулярная структура локуса утилизации сахарозы
Lactobacillus plantarum: сравнение с Pediococcus pentosaceus // Молекулярная биология, 2001,
т. 35, No1, стр. 19-27.
3.Naumoff D.G. Conserved sequence motifs in levansucrases and bifunctional β-xylosidases and α-L-arabinases // FEBS Letters, 1999, V. 448, P. 177-179.
4.Наумов Д.Г. Гомологичный локус геномов Bacillus subtilis и Bacillus stearothermophilus,
содержащий гены левансахаразы и леваназы // Молекулярная биология, 1999, т. 33, Nо2,
стр. 207-210.
5.Naumoff D.G. Levanase gene sequence from strain Bacillus sp. L7 (letter) // FEMS Microbiology Letters, 1998, V. 164, P. 227-228.
6.Наумов Д.Г. и Дорошенко В.Г. β-фруктозидазы: новое суперсемейство гликозил-гидролаз // Молекулярная биология, 1998, т. 32, Nо5, стр. 902-907.
7.Наумов Г.И. и Наумов Д.Г. Генетическое картирование нового дивергентного семейства α-галактозидазных генов MEL у дрожжей Saccharomyces cerevisiae // Биотехнология, 1997, Nо1, стр. 26-28.
8.Наумов Г.И. и Наумов Д.Г. Суперсемейство α-галактозидазных генов MEL у дрожжей
Saccharomyces cerevisiae // Доклады АН, 1997, т. 353, Nо3, стр. 426-429.
9.Наумов Г.И., Наумов Д.Г. и Луис Э.Д. Локализация семейства α-галактозидазных генов MEL в правых и левых теломерах дрожжей Saccharomyces cerevisiae // Доклады АН, 1995, т. 341, Nо1,
стр. 134-136.
Тезисы конференций:
10.Наумов Д.Г. Новое суперсемейство гликозил-гидролаз: β-фруктозидазы гомологичны β-ксилозидазам и α-L-арабиназам // Материалы конференции “Биосфера и человечество”, 20-21 сентября 2000, Обнинск, стр. 116-122.
11.Naumoff D.G. Enzymes of fructan synthesis and degradation: sequence analysis and classification // Abstracts of 4th International Fructan Symposium “Fructan 2000”, August 16-20, 2000, Arolla, Switzerland, P. 1.4.
12.Наумов Д.Г. и Лившиц В.А. Сравнительный анализ систем утилизации сахарозы молочнокислых бактерий Lactobacillus plantarum и Pediococcus pentosaceus // Тезисы школы-конференции “Горизонты физико-химической биологии”, 28 мая – 2 июня 2000, Пущино, т. 2, стр. 130.
13.Наумов Д.Г. Новое суперсемейство гликозил-гидролаз: β-фруктозидазы генетически родственны β-ксилозидазам и α-L-арабиназам // Тезисы докладов II съезда Вавиловского общества генетиков и селекционеров. 1-5 февраля 2000, Санкт-Петербург, т. 2, стр. 231-232.
14.Наумов Д.Г., Дорошенко В.Г. и Лившиц В.А. Секвенирование фрагмента гена сахаразы из Lactobacillus plantarum (Тезисы стендовых сообщений конференции, посвящённой 30-летию журнала “Молекулярная биология”, 17-19 декабря 1997, Москва) // Молекулярная биология, 1998, т. 32, Nо2, стр. 373.
15.Наумов Д.Г., Дорошенко В.Г. и Лившиц В.А. Секвенирование гена сахаразы из Lactobacillus plantarum // Тезисы V научной конференции ГосНИИгенетика, 28-31 октября 1997, стр. 23.
16.Наумов Д.Г. Генетическое картирование суперсемейства α-галактозидазных генов MEL дрожжей Saccharomyces cerevisiae в теломерах // Тезисы IV научной конференции ГосНИИгенетика, 22-26 апреля 1996, стр. 21.