dis_dovzhenko_nina_aleksandrovna

41

У поросят в возрасте до 5 месяцев активность ГГТ находится в пределах 423,4 - 533,4 нкат/л [136], затем несколько увеличивается до 233,0 – 750,0 нкат/л. Для взрослых свиней характерна активность ГГТ 316-617

нкат/л, которая достигается к 2,5-3 годам [118].

У взрослых собак активность ГГТ находится в границах от 1 до 6 Ед/л (от 16,7 до 100,0 нкат/л) , но у сеттеров может достигать 11,0 Ед/л (183,4

нкат/л). У щенков она значительно выше: в 2 недели – 4-77 Ед/л (66,7-1283,6

нкат/л), а в 4 недели – уже 2-7 Ед/л (33,3-116,7 нкат/л) [5, 141]. Поэтому,

данный показатель в первые дни жизни не рекомендуется использовать в диагностике расстройств гепатобилиарной системы, но данный фермент может служить критерием потребления щенками молозива [5].

Активность ГГТ у кошек составляет от 0 Ед/л (0 нкат/л) до 8 Ед/л (133,4 нкат/л) [8]. При этом могут наблюдаться незначительные возрастные различия данного показателя. Так, в течение первого месяца жизни активность ГГТ находится в пределах от 0 (0 нкат/л) до 3 Ед/л (50,0 нкат/л)

[66].

Щелочная фосфатаза (ЩФ; фосфогидролаза моноэфиров ортофосфорной кислоты; КФ 3.1.3.1) участвует в реакциях обмена ионов фосфорной кислоты. Данный фермент содержится в стенках желчных протоков печени, костях, почках, слизистой оболочке кишечника [41, 42].

Активность ЩФ у поросят-отъемышей составляет 142-891 Ед/л (2,4-

14,9 мккат/л) [152], а к возрасту 20 недель находится в пределах от 255 до

351 Ед/л (от 4,3 до 5,9 мккат/л) [136]. У взрослых свиней данный показатель приближается к 26-362 Ед/л (0,4-6,0 мккат/л) [66].

В сыворотке крови собак выделяют 3 изофермента щелочной фосфатазы: 1) костная, 2) печеночная 3) синтезирующаяся в ответ на кортикостероиды [154]. Это позволяет использовать определение активности ЩФ для диагностики заболеваний костей и печени [170]. Легко определить изоферментный спектр позволяет дисковый электрофорез на полиакриламидном геле [130].

42

Активность щелочной фосфатазы у собак составляет 10-92 Ед/л (0,17-

1,53 мккат/л). Для некоторых пород референтный интервал может быть несколько шире [5, 173]. Так у хаски — до 203 Ед/л (до 3,4 мккат/л), у

сеттеров — до 117 Ед/л (до 1,95 мккат/л) [5]. Эти породы склонны к гепатопатиям и холестазу. Завышенные значения ЩФ могут быть связаны с атипичным адренокортицизмом, к которому склонны собаки породы сеттер

[5]. Также у бернских зенненхундов до были установлена нормальная активность ЩФ до 464 Ед/л (до 7,7 мккат/л). Собаки этой породы предрасположены к злокачественному гистиоцитозу, течение которого негативно влияет на печень, об этом может свидетельствовать и повышение активности ЩФ [5]. Активность ЩФ у щенков до 10-дневного возраста выше, чем у взрослых собак в 20…25 раз и может достигать 8760 Ед/л (146

мккат/л) [5, 87]. Активность данного фермента возрастает в течение 24 часов после рождения и отражает интенсивность поглощения молозива, богатого ферментами, в то же время тканевые факторы в молозиве могут стимулировать эндогенный синтез ЩФ. Начиная с 2-х недельного возраста щенка активность ЩФ доходит до 176-541 Ед/л (2,9-9,0 мккат/л), а в возрасте

4-х недель - до 135-201 Ед/л (2,3-3,4 мккат/л). Значения ЩФ могут превышать норму в 2-2,5 раза в период активного роста, особенно у собак крупных пород, за счет высокой активности костного изофермента [5]. В

течение первых 3 месяцев значения ЩФ составляют уже 92-528 Ед/л (1,5-8,8

мккат/л), а в 3-6 месяцев – 129 - 435 Ед/л (2,2 -7,3 мккат/л) [163].

Уздоровых кошек установлены нормальные значения активности ЩФ

впределах 6–102 Ед/л (0,1-1,7 мккат/л) [180]. В то время как у котят эти значения несколько выше. Так в первый месяц жизни активность щелочной фосфатазы составляет 90-135 Ед/л (1,5-2,3 мккат/л) [87], в течение 3-ех месяцев – 10-558 Ед/л (0,17-9,3 мккат/л), а к в возрасте 3-6 месяцев – 40-330

Ед/л (0,7-5,5 мккат/л) [163].

α-Амилаза (α-(1,4)-глюкан-4-глюканогидролаза, КФ 3.2.1.1) участвует в гидролизе внутренних α-1,4-гликозидных связей гликогена, крахмала и

43

ряда других углеводов. Образуется в поджелудочной и слюной железах [41, 42]. Полупериод жизни фермента в крови – 5 часов [8].

У поросят-отъемышей активность данного фермента составляет 528-

2616 Ед/л (8,8-43,6 мккат/л), затем возрастает и у поросят на откорме и молодых свиней составляет 913-4626 Ед/л (15,2-77,1 мккат/л) и 643-4668 Ед/л

(10,7-77,8 мккат/л) соответственно. В то время как у взрослых животных она варьирует в пределах 433-2170 Ед/л (7,2-36,2 мккат/л) [152].

У собак средняя активность амилазы составляет 162-974 Ед/л (2,7- 16,2 мккат/л), а у ретриверов – до 1158 Ед/л (до 19,3 мккат/л), у сеттеров даже до 1293 Ед/л (21,6 мккат/л) [5]. По данным Бурмистрова Е.Н. среднее значение данного показателя составляет 300 - 1500 Ед/л (5,0-25,0 мккат/л), у

хаски и родственных пород несколько ниже – 190-800 Ед/л (3,2-13,3 мккат/л)

[8]. У щенком и молодых собак в течение первого года жизни активность амилазы может доходить до 1683 Ед/л (28,1 мккат/л) [169].

У кошек активность амилазы составляет в среднем 500 - 1200 Ед/л (8,3-

20,0 мккат/л) [8]. Имеются данные об отличии данного показателя у различных пород. Так, установлено, что у «восточных» пород кошек активность амилазы в сыворотке крови несколько выше (до 2200 Ед/л

(36,7 мккат/л)). У котят данный показатель ниже, по сравнению со взрослыми животными. Так у новорожденных он составляет 310-637 Ед/л (5,2-10,6

мккат/л), в первую неделю жизни – 187-438 Ед/л (3,1-7,3 мккат/л), в первый месяц - 275-677 Ед/л (4,6-11,3 мккат/л), в два месяца – 407-658 Ед/л (6,8-10,97

мккат/л). В возрасте 1 года активность амилазы уже может доходить до 1800

Ед/л (30,0 мккат/л) [169].

1.4. Динамическое поверхностное натяжение как один из физиолого-

биохимических параметров сыворотки крови. Изменение его

параметров в онтогенезе

Кровь является жидкой тканью организма, в которой отражается его физиологическое состояние. Она осуществляет связь всех органов и систем между собой и организма в целом с внешней средой. Кровь состоит из

44

плазмы и форменных элементов, после удаления которых остаётся густая соломенного цвета жидкость - плазма. При свертывании цельной крови образуется кровяной сгусток и отделяется сыворотка. В ней содержатся все вещества крови, кроме форменных элементов и фибриногена и она чаще всего используется для проведения различных исследований [19, 38, 40, 42, 55, 80].

В плазме (сыворотке) крови присутствует большое количество биологически активных веществ (как поверхностно-активных, так и поверхностно-инактивных) (ПАВ и ПИВ) [65, 70]. Многие низко- и

высокомолекулярные ПАВ способны адсорбироваться на жидких границах раздела фаз и изменять поверхностное натяжение, ускорять или замедлять процессы переноса вещества и энергии через биологические мембраны

[21,70]. Одним из параметров, характеризующих сыворотку (плазму) крови является её поверхностное натяжение [25, 28, 65, 70].

Определение динамического поверхностного натяжения биологических жидкостей методом межфазной тензиометрии позволяет быстро оценить состояние организма и может служить экспресс-методом для диагностики различных заболеваний [20, 24-28, 69-70]. При этом параметры ДПН имеют ряд особенностей, зависящих от возраста, пола, физиологического состояния.

Использование методы межфазной тензиометрии в медицине.

Одним из первых изучением поверхностного натяжения (ПН) биологических жидкостей человека занимался M. Polányi. В дальнейшем систематические исследования ПН сыворотки крови и цереброспинальной жидкости человека были проведены O. Kűnzel [34, 65, 176]. Существуют различные работы,

касающиеся ПН крови, цереброспинальной и амниотической жидкостей,

желудочного сока, слюны и др.биологических жидкостей [128, 138-140, 157, 176].

В работе сотрудников Донецкого государственного медицинского университета [34] представлены данные по ДПН крови, мочи, спинномозговой жидкости для людей разного пола и разных возрастных групп и установлена

45

прямая корреляционная связь между отдельными биохимическими показателями и ДПН для различных времен существования поверхности [34, 65].

Ряд авторов предлагают использовать метод межфазной тензиометрии для диагностики различных заболеваний, контроля за течением заболевания и состоянием больных. Так, Черний В.И. с соавторами предлагают включать в комплексную оценку эффективности терапии острой химической болезни при отравлении грибами тяжелой степени измерение ПН сыворотки крови.

Ими были отобраны наиболее информативные показатели, отражающие физико-химические процессы, происходящие в крови больных при данном заболевании: ПН 3 - равновесное поверхностной натяжение, при времени существования поверхности, стремящемся к бесконечности, отражающее изменения в высокомолекулярных фракциях белков; ПН 4 - поверхностное натяжение определенное методом висячей капли; УНК 1 - угол наклона кривой изменения максимального давления в пузырьке биологической жидкости (мН/м*с1/2). При более выраженных изменениях белкового и электролитного обмена в организме локальное снижение ПН 2обусловлено вытеснением из адсорбционного слоя более активного сурфактанта

(протеина) менее поверхностно-активным соединением (например,

электролитами), которые в больших концентрациях, как правило, снижают показатели межфазной тензиометрии. Такие изменения можно считать прогностически значимыми [115].

При некоторых заболеваниях, например, при рассеянном склерозе (РС)

нарушаются белковый, липидный и электролитный метаболизмы с проявлением в биологических жидкостях различных ПАВ и поверхностно-

инактивных веществ (ПИВ), которые могут изменять ПН сыворотки крови и цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) [2, 65, 96]. Выявляют фракции низко-,

средне- и высокомолекулярных ПАВ. Как известно, низко- и

среднемолекулярные ПАВ влияют на ПН в диапазоне короткого времени,

высокомолекулярные – в диапазоне длительного времени [ 65, 88, 96].

46

По данным Статиновой Е.А. и Омельченко Р.Я., у больных рассеянным склерозом, независимо от пола, повышены показатели ПН σ1 и σ3

крови и ЦСЖ, также снижен угол наклона тензиограмм (λ1). Концентрация среднемолекулярных ПАВ (σ2) в ЦСЖ у всех пациентов с РС и всех здоровых обследуемых не отличались. σ2 крови больных РС было достоверно выше в сравнении с показателями контрольной группы (здоровые люди) [96].

Синяченко Ю.О. было установлено, при ишемической болезни сердца

нарушения интегрального состояния протеино-липидного сурфактантного комплекса и отдельных его составляющих зависят от тяжести течения патологического процесса, а параметры коррелируют с динамическим поверхностным натяжением. Так, содержание в крови общего белка и альбуминов влияет на разницу между поверхностным натяжением при средних и длинных временах существования поверхности, а с уровнем

альбуминов также имеет обратную корреляцию с поверхностным

натяжением в области коротких времен «жизни поверхности». Содержание

2-микроглобулина коррелирует со всеми параметрами динамической межфазной тензиометрии, но особенно с поверхностной активностью в области коротких времен. Количество общих липидов и триглицеридов

оказывает влияние	на поверхностное	натяжение при t=0,01 сек,
аполипопротеидов А1	– на статическое (равновесное) поверхностное
натяжение. Уровень холестерола коррелирует		с углом наклона тензиограмм

[92-93].

В работе И.Ф. Полулях и соавторов показано, что все показатели межфазных тензиограмм прямо коррелируют с уровнем липопротеидов очень низкой плотности, но обратно зависят от уровня фибриногена.

Полулях И.Ф. с соавторами полагают, что рост параметров МТ можно отнести к негативным признакам течения обтурационной желтухи при холедохолитиазе [83].

Использование метода межфазной тензиометрии в ветеринарии и

зоотехнии. В области ветеринарии и зоотехнии исследование динамического

47

поверхностного натяжения биологических жидкостей различных видов животных впервые были проведены сотрудниками кафедр химии и физиологии ФГБОУ ВПО МГАВМиБ. Прежде всего были изучены параметры ПН для сельскохозяйственных животных (лошадей, крупного рогатого скота, свиней),

их чаще всего использует человек для получения продукции, и контроль за состоянием их организма особенно важен [15, 20, 24-28, 68-72]. Были получены показатели ДПН для животных разного пола, возраста и продуктивности и проведен их сравнительный анализ, что дает возможность использовать их для комплексной оценке содержания поверхностно-активных веществ в сыворотке крови животных и своевременной диагностики патологических изменений в организме [68-72].

Для каждого вида животных характерны различные значения параметров поверхностного натяжения сыворотки крови, что обусловлено её качественным и количественным составом [20, 24-28, 68-72].

Особенности динамического поверхностного натяжения сыворотки

крови лошадей. У лошадей установлено, что их рост и развитие, адаптация организма в постнатальный период сопровождаются закономерными изменениями в системе крови, что в свою очередь отражается на поверхностном натяжении сыворотки крови. Эти изменения связаны со степенью функциональной активности данной системы в зависимости от возраста и пола [60, 70, 71].

Так, установлено, что для лошадей в возрасте 1 месяца наблюдаются минимальные значения ДПН сыворотки крови: от 77,5 0,9 мН/м (σ0) до

61,1 0,7 мН/м (σ3). У взрослых животных параметры ПН устанавливаются к

2 годам и составляют: σ1 – от 75,5 1,2 мН/м до 77,9±1,1 мН/м; σ2 – от

72,5 1,3 мН/м до 73,9±0,9 мН/м; σ3 - от 62,8±0,9 мН/м до 65,6±1,3 мН/м. У

жеребят при этом значения угла наклона λ0 (9,5 0,2 мН∙м-1с-1/2) выше в 2

раза по сравнению с взрослыми животными (4-10 лет). А λ1, наоборот, ниже на 15-40% по сравнению с лошадьми в возрасте 4-10 лет [71].

48

У лошадей параметр σ2 сравнительно высок, что объясняется присутствием в крови животных высокого количества солей [55, 159]. В

дальнейшем резкое снижение значений σ3 вызывается непрерывной адсорбцией на границе раздела жидкость-воздух [22, 126, 137, 143, 159, 164].

Средние значения σ2 и σ3 у жеребцов в возрасте 2-4 лет составляют 71,9

и 64,2 мН/м соответственно, а углы наклона тензиограм: λ0 – 5,6 мН∙м-1с-1/2; λ1 - 8,4 мН∙м-1с1/2. У кобыл этого же возраста средние величины ПН при средних и больших временах существования поверхности составляют 72,7 и

63,4 мН/м, а углы наклона начального и конечного участка кривой соответственно 3,4 мН∙м-1с-1/2 и 9,4 мН∙м-1с1/2. В возрасте старше 10 лет у жеребцов все значения ДПН выше на 3-5 %, чем у кобыл, λ0 на 2 % выше у кобыл, а λ1 – на 7 % у жеребцов[20,70, 71].

Установленные различия в показателях ДПН у животных разного пола связаны с физиологическими особенностями самцов и самок [20,70, 71],

свойствами их гормональной системы, что влияет на соответствующие компоненты крови [55, 159]. Это подтверждается наличием корреляционных связей разного типа между ними (сильные, средние, слабые) и направления

(положительные, отрицательные) [55, 70,71, 159].

Таким образом, все параметры ДПН у лошадей зависят от возраста животного, а углы наклона тензиограм в свою очередь также и от пола [70,71,

159].
Особенности	параметров	динамического	поверхностного

натяжения сыворотки крови у крупного рогатого скота. У крупного

рогатого скота также установлены изменения параметров поверхностного натяжения, зависящие от их возраста. Наступление половой зрелости и достижение телочками 12 месячного возраста приводит к адаптивным изменениям параметров ДПН. Так, σ0-σ3 увеличиваются в среднем на 3-5%

по сравнению с телочками 6 месяцев: σ0 - от 72,07±0,17 до 73,94±0,49 мН/м; σ1 - 71,91±0,43 до 73,52±0,14 мН/м; σ2 - 66,80±0,30 до 70,11±0,42 мН/м; σ3 -

61,19±0,66 до 64,35±0,64 мН/м. Значения коэффициента наклона кривой в

49

области малых (λ0) времен существования поверхности, напротив, снижаются от 5,96±0,15 до 3,16±0,39 мН∙м-1с-1/2 (на 47%). А параметр λ1 снижается на 7% (от 6,12±0,23 до 5,70±0,49 мН∙м-1с1/2) [70-72].

К возрасту 18 месяцев (наступление физиологической зрелости)

значения σ3 снижаются на 3% и достигают 62,22±0,55 мН/м. При этом углы наклона тензиограм λ0 и λ1 повышаются на 48% (до 4,59±0,39 мН∙м-1с-1/2 ) и

28% (до 7,34±0,38 мН∙м-1с1/2) соответственно [28, 70].

Также существенные изменения параметров ПН установлены у коров в

зависимости от физиологического состояния. В частности при беременности

в организме самок происходят многочисленные сложные изменения.

Особенно сильным изменениям подвергается обмен веществ, в результате чего в крови изменяется активность и количество различных поверхностно-

активных веществ, что приводит к изменениям значений ДПН сыворотки

крови стельных	животных.	Так, было	установлено, что	у	коров,
находящихся на	2-м месяце	стельности	значения параметров	σ2	и σ3

снижаются в среднем на 8,5 % (σ2 - от 69,86±0,76 до 64,24±0,43 мН/м и

62,22±0,55 до 56,80±0,59 мН/м) по сравнению с тёлками 17-18 месяцев; затем к 6 месяцу стельности значения несколько повышаются в среднем на 2,8 % (до 65,62±0,37 и 58,97±0,69 мН/м соответственно). Значения углов наклона претерпевают еще большее изменения. У коров на 2 месяце стельности λ0 составляет 5,47±0,36 мН∙м-1с-1/2, а к 6-му уже 7,33±0,36 мН∙м-1с-1/2. Изменения угла наклона λ1 носит несколько другой характер: вначале увеличивается от

7,34±0,38 мН∙м-1с1/2 до 9,14±0,35 мН∙м-1с1/2, а затем снижается до 7,98±0,60

мН∙м-1с1/2. При этом нетели и коровы на 5-6 месяце стельности имеют значения ДПН выше на 3-6% (σ0 выше в среднем на 1,6%, σ2 - на 2,5%, σ3 - на

6 и 3,6% соответственно) и λ0 (выше на 10 и 25% соответственно), и более низкие значения λ1 (соответственно на 35 и 15% ниже) по сравнению с коровами, находящимися на 1-2 месяце стельности [28, 70]. Таким образом,

можно сказать, что параметры ПН у коров зависят как от возраста, так и от физиологического состояния.

50

Особенности параметров динамического поверхностного

натяжения сыворотки крови свиней. У свиней установлены свои особенности динамического поверхностного натяжения как одного из физиолого-биохимических показателей обмена веществ [24-28].

Максимальные значения ДПН были зафиксированы при очень малом времени существования поверхности (σ0), что определяется солевым составом крови [24-26, 28]. В свою очередь ПН при коротких (σ1) и длинных

(σ3) временах для животных разного возраста практически не изменяются:

они колеблются в пределах от 75,1±1,7 до 75,6±0,9 мН/м и от 59,6±1,6 до

60,1±1,3 мН/м соответственно. Только в возрасте 1 года отмечаются минимальные значения данных параметров: 73,5± 1,4 мН/м (σ1) и 58,5±0,9

мН/м (σ3) [24-26, 28].

Минимальные значения установлены при времени существования поверхности 100 с, определяемые постепенной адсорбцией белков на межфазную границу (сыворотка/воздух) [24-26, 28].

У свиноматок параметры ДПН с возрастом претерпевают изменения:

значения σ0 и σ2 повышаются на 5 % и 2% соответственно, а значения снижаются, причем его минимум наблюдается в возрасте 1 года

(3,3±0,2 мН∙м-1с-1/2), а затем незначительно повышаются, но первоначального уровня. Угол наклона конечного участка кривой (λ1) к возрасту 1 года достигает максимума (14,7±0,3 мН∙м-1с1/2). В 1,5 -2,5 года данный параметр изменяется в пределах от 11,2 до 13,6 мН∙м-1с1/2 [24-26, 28].

Взаимосвязь между параметрами динамического поверхностного

натяжения и физиолого-биохимическими показателями крови

животных разных видов.

Известно, что белки, в частности сывороточный альбумин, понижают ПН [34, 65]; добавка к воде неорганических ионов (К +, Li +, Na +, Ca2+, Mg2+, Fe2+(3+), Cl , F , HPO42 , PO43и т.д.), т.е. поверхностно-инактивных веществ,

повышают ее поверхностное натяжение [145], добавки фруктозы понижают,

а добавки мочевины повышают ДПН исследуемых растворов как в области