- •Экспрессия генов у эукариот
- •У эукариот любой ген представляет чередующиеся кодирующими и некодирующими последовательностями. Кодирующие – экзоны,
- •Транскрипция у эукариот происходит в ядре с участием трех разных РНК-полимераз. В отличие
- •3.Первичный РНК-транскрипт подвергается процессингу или созреванию: обычно к 5׳-концу добавляется кэп (шапочка), а
- •РНК-полимеразы эукариот
- •В состав РНК-полимераз эукариот входит большое количество субъединиц, они значительно крупнее прокариотических. РНК-полимеразы
- •егуляторные элементы эукариот
- •2. Последовательность ЦААТ (ЦААТ-бокс) локализован в большинстве промоторов генов эукариот примерно на 80
- •3.ГЦ-мотивы. Последовательность из 10-15 пар Г-Ц находится на расстоянии 300-400 нуклеотидов левее точки
- •5. Сайленсоры (глушители). Эти регуляторные элементы располагаются на большом расстоянии от точки начала
- •Регуляция экспрессии генома у эукариот осуществляется на нескольких уровнях:
- •Строение и экспрессия генов класса II
- •ФакторTF II D непосредственно связывается с ТАТА- боксом, поэтому его называют ТАТА-связывающим белком.
- •Процессинг
- •Процессинг
- •Сплайсинг
- •Собственно сплайсинг характерен для пре-мРНК высших эукариот. Интроны в незрелых предшественниках ядерных мРНК
- •Различные мяРНК по принципу комплементарности связываются с пограничными участками интронов в РНК.
- •Альтернативный сплайсинг.
- •Альтернативный сплайсинг позволяет организму синтезировать разные по структуре и свойствам белки на базе
- •Процесс созревания РНК кроме кэпирования, полиаденилирования и сплайсинга может включать еще ряд модификаций
- •Взаимодействие мяРНК и мяРНП с концами интрона придает ему петлеобразную структуру. При этом
- •Сплайсинг: три типа реакций трансэтерификации
- •Регуляция у эукариот
- •Гормоны могут влиять как на процессы транскрипции, так и процессы трансляции.
- •Различают экспрессию гена:
- •2) Индуцибельная экспрессия гена
- •В роли индукторов м. б. также и факторы внешней
- •Искусственные гены конструируются таким образом, чтобы получить максимальное количество желаемого продукта с минимальными
- •Описаны случаи экспрессии целевого продукта в бактериях до уровня 50% от всего клеточного
- •Трансляция у эукариот
- •В последнее время важные результаты о механизмах трансляции у эукариот были получены с
- •При реализации второго механизма рибосомы инициируют биосинтез белка на внутренних AUG- кодонах, удаленных
- •Помимо субъединиц эукариотических рибосом и белков, обычно ассоциированных с 5'- и 3'- концевыми
- •2. Два других эукариотических фактора eEF1B и eEF2 резко отличаются от бактериальных функциональных
- •4.Замечательным свойством факторов eEF1A и eEF2 является способность связываться с компонентами цитоскелета эукариотических
- •6. У бактерий растущая полипептидная цепь может вызывать уменьшение скорости элонгации, а природа
- •Терминация трансляции
- •Фактор eRF1 необходим:
- •Таким образом, регуляция экспрессии генов осуществляется на уровне клетки и на уровне организма.
- •Гены эукариотических клеток делятся на два основных вида:
- •Хромосомы, гены и опероны эукариотических клеток имеют ряд структурно-функциональных особенностей,
- •3. Сложная последовательность молекулы ДНК. Имеются информативные и неинформативные участки, уникальные и многократно
- •6. Методы молекулярной биологии выявили тормозящее действие белков-гистонов на синтез и- РНК.
- •Меланоцитстимулирующий гормон передней и промежуточной доли гипофиза
Экспрессия генов у эукариот
Особенности транскрипции у эукариот
Процессинг: этапы
Трансляция: стадии, ферменты.
У эукариот любой ген представляет чередующиеся кодирующими и некодирующими последовательностями. Кодирующие – экзоны, некодирующие – интроны. У эукариот встречаются усилители, узнаваемыми белками. Они могут быть расположены достаточно далеко от начала транскрипции.
Механизмы транскрипции у эукариот сходны с хорошо исследованной транскрипцией прокариот. Однако, имеются и значительные различия. Главными из них являются:
Транскрипция у эукариот происходит в ядре с участием трех разных РНК-полимераз. В отличие от прокариот, РНК-транскрипты у эукариот не соединяются с рибосомами до завершения транскрипции. Трансляция (синтез белка) на иРНК происходит после ее выхода из ядра в цитоплазму клетки соответственно.
Ни одна из полимераз эукариот не способна самостоятельно связываться с промоторами транскрибируемых ими генов. Для присоединения к транскриптонам эукариот служат специфичные для каждой РНК-полимеразы белковые факторы транскрипции (TF-факторы). РНК-полимеразы I, II и III требуют участия факторов транскрипции, называемых TFI, TFII, TFIII
3.Первичный РНК-транскрипт подвергается процессингу или созреванию: обычно к 5׳-концу добавляется кэп (шапочка), а к 3׳-концу – хвост (поли (А)-фрагмент), внутренняя последовательность РНК подвергается
сплайсингу.
Первичные транскрипты (пре-мРНК) намного длиннее зрелых мРНК и локализованы в ядре клетки, образуя группу гетерогенных ядерных РНК (гя РНК). Укорочение происходит за счет вырезания не кодирующих белка последовательностей и сшивания смысловых последовательностей (сплайсинг).
Процесс транскрипции состоит из трех этапов:
инициации, элонгации и терминации
РНК-полимеразы эукариот
РНК-полимераза I транскрибирует гены классаI: это гены 28SрРНК, 18SрРНК и 5,8SрРНК (т.е. все типы рРНК, кроме 5SрРНК).
РНК-полимераза II транскрибирует гены классаII: это гены, кодирующие белки (т.е. продуктом РНК- полимеразыII является мРНК). Кроме того, РНК- полимеразаIIсинтезирует малые ядерные РНК (мяРНК) (U1-U5).
РНК-полимераза III транскрибирует гены классаIII, т.е. осуществляет синтез тРНК, 5SрРНК,U6 (это одна из мяРНК).
РНК-полимераза IV транскрибирует все виды РНК митохондрий, по строению сходна с прокариотической.