1. Получение рекомбинантных днк

Для получения таких молекул первоначально выделяют ДНК из 2 разных источников (рис. 4-65).

Каждую из них в отдельности фрагментируют, используя одну и ту же рестриктазу, расщепляющую ДНК с образованием "липких" концов. После процедуры нагревания и медленного охлаждения (отжига) наряду с исходными молекулами ДНКX и ДНКY могут образовываться рекомбинантные молекулы, состоящие из фрагментов ДНКX и ДНКY связанных между собой "липкими" концами. Ковалентное сшивание фрагментов осуществляют с помощью ДНК-лигазы в присутствии АТФ как источника энергии.

Генная терапия - лечение наследственных, многофакторных и инфекционных заболеваний путём введения в соматические клетки пациентов генов, которые обеспечивают исправление генных дефектов или придают клеткам новые функции.

Для успешной генотерапии необходимо:

• обеспечить эффективную доставку чужеродного гена в клетки-мишени;

• создать условия для длительной экспрессии гена в этих клетках.

8