Справочный материал для оформления протоколов

Некоторые методы выделения чистых культур бактерий

Культуральный способ

Этот способ используется для выделения бактерий рода Proteus, которые растут, как правило, на обычных питательных средах сплошной пленкой («ползучий рост»). Для выделения чистой культуры протея исследуемый материал засевают по методу Шукевича у основания скошенной части агара в конденсационную воду. Через сутки на всей поверхности скошенной части агара отмечается рост протея, в то время как другие ассоцианты остаются на месте нанесения материала.

Физический способ выделения чистой культуры бактерий

Он используется для выделения споровых бактерий. Для этого смесь бактерий, содержащих споровые микроорганизмы, подвергают кипячению в течение 5 минут для уничтожения неспоровых бактерий. После этого кипяченый материал засевается штрихом в чашки Петри на одну ее половину, а на другую засевается смесью до кипячения.

Химический способ выделения бактерий

Этот метод используется для выделения кислотоустойчивых бактерий. Исследуемый материал обрабатывается 5% серной кислотой, все некислотоустойчивые микробы погибают. После этого материал засевают на питательную среду.

Биологический способ выделения чистой культуры

Этот способ заключается в том, что исследуемым материалом заражают лабораторное животное, чувствительное к какому-то микробу, содержащемуся в этом материале. У животных возникает типичный инфекционный процесс с накоплением соответствующего возбудителя во внутренних органах, из которых легко выделяется чистая культура.

занятие №5

Питание, дыхание и размножение микроорганизмов

Бактериологический метод диагностики (продолжение)

Вопросы для подготовки

1. Конструктивный метаболизм: биосинтез углеводов и аминокислот у прокариот. Энергетические затраты клетки.

2. Общая характеристика энергетических процессов у прокариот – брожение (классификация, продукты) и дыхание. Выход АТФ.

3. Классификация микроорганизмов по типу дыхания (строгие аэробы, факультативные анаэробы, строгие анаэробы, микроаэрофилы, капнофилы). Дыхательные цепи аэробов, факультативных анаэробов и облигатных анаэробов. Сущность анаэробиоза.

4. Методы культивирования анаэробов. Питательные среды.

5. Ферменты бактерий. Конститутивные и индуцибельные ферменты, их роль в сохранении вида. Понятие «хемовар».

6. Бактериологический метод диагностики (III и IV этапы/дни исследования). Цель и задачи. Этапы идентификации чистой культуры микроорганизмов:

а) методы изучения протеолитических свойств у бактерий.

б) методы изучения сахаролитических свойств у бактерий: среды Гисса («пестрый ряд»), комбинированные среды типа Ресселя, Олькеницкого.

в) панели биохимической идентификации и система индикаторных бумаг (СИБы), их преимущество.

г) автоматизированные системы идентификации микроорганизмов. Принцип, достоинства и недостатки.

7. Заполнить таблицу «Среды для культивирования разных групп микроорганизмов»:

Группа микроорганизмов	Тип питания	Тип дыхания	Пример питательной среды
Стафилококки
Клостридии
Риккетсии
Хламидии

8. Заполнить таблицу «Схемы дыхательных цепей»:

Аэробы	Факультативные анаэробы	Облигатные анаэробы