- •Внимание!
- •Занятие № 1. «Строение, свойства и функции белков».
- •Инструктаж по технике безопасности при работе в биохимической лаборатории.
- •Тема занятия: «Строение, функции и свойства белков».
- •Вопросы для контроля:
- •Тема: «Получение яичного альбумина».
- •Ход работы.
- •Анализ аминокислотного состава. Цветные реакции на белки.
- •1. Реакция на ароматические аминокислоты (реакция нитрования).
- •Ход работы.
- •2. Реакция на цистеин (реакция Фоля).
- •Ход работы.
- •Ход работы:
- •Занятие № 3 «Ферменты» (часть 1)
- •Тема: “влияние температуры на активность амилазы”.
- •Занятие 4 «Ферменты» (часть 2)
- •Лабораторная работа №4.
- •Ход работы.
- •Занятие 5. Строение и функции нуклеиновых кислот.
- •Лабораторная работа 6 «Выделение дезоксирибонуклеопротеидов из тканей животных»
- •Ход работы
- •Лабораторная работа 7. «Определение состава биополимера по результатам качественных реакций на продукты его гидролиза».
- •Ход работы
- •Лабораторная работа № 8. Тема: «качественная реакция на витамины (в1, с)».
- •Аскорбиновая кислота легко окисляется в дегидроаскорбиновую кислоту
- •Лабораторная работа № 9.
- •Ход работы.
- •Весенний семестр.
- •Ортотолуидиновый метод: определение глюкозы в сыворотке крови.
- •Ход работы:
- •Ход работы:
- •Указания к составлению отчета:
- •Лабораторная работа № 14. Определение содержания белка в моче.
- •Ход работы:
- •Принцип метода:
- •Реактивы, оборудование и исследуемый материал:
- •Ход работы.
- •Контрольные вопросы:
- •Тема: «определение содержания общих липидов в сыворотке крови».
- •Тема: «определение сиаловых кислот в сыворотке крови методом гесса».
- •Тема: «определение перекиси липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой».
- •Ход работы.
- •(Метод мойдина и зака)».
- •Ход работы.
- •Тема: «качественная реакция на адреналин и фолликулин».
- •Ход работы.
- •Ход работы.
- •Для спиртового раствора фолликулина.
- •Для масляного раствора фолликулина.
- •Тема: «качественные реакции на гормон поджелудочной железы – инсулин».
- •Ход работы.
- •Тема: «реакция на билирубин».
- •Ход работы:
- •Тема: «определение содержания триацилглицеролов в сыворотке крови».
- •Ход работы:
Внимание!
Для выполнения лабораторной работы №2 необходимо принести молоко (домашнее или жирность 3,2%) на каждую подгруппу.
Занятие № 1. «Строение, свойства и функции белков».
Инструктаж по технике безопасности при работе в биохимической лаборатории.
Тема занятия: «Строение, функции и свойства белков».
Вопросы для контроля:
Место биохимии среди других наук.
История развития биохимии белков.
Пептидная теория строения белков (основные аминокислоты, их классификация, нестандартные аминокислоты, пептидная связь).
Первичная структура белков (аминокислотная последовательность, экспериментальное определение последовательности аминокислот).
Вторичная структура белков (спираль и слой; взаимодействия, стабилизирующие вторичную структуру).
Третичная структура белков и взаимодействия, стабилизирующие ее.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 1
Тема: «Получение яичного альбумина».
Яичный белок представляет собой 10%-ный водный раствор нескольких белков и, в противоположность желтку, не содержит в заметных количествах других органических соединений, таких как липиды и углеводы. Это заметно упрощает процедуру выделения белков. Почти 70% яичного белка составляет яичный альбумин, который легко отделить от глобулиновой фракции путем 10-кратного разведения яичного белка дистиллированной водой. В этом случае белки глобулиновой фракции выпадают в осадок и их легко отделить от раствора фильтрованием или центрифугированием. Яичный альбумин остается в растворе.
Материал исследования: Белок куриного яйца, 1%-ный раствор желатина.
Реактивы: Дистиллированная вода, 10%-ный и 30%-ный растворы NaОН, азотная
кислота конц., 5%-ный раствор ацетата свинца, 1% р-р CuSO4.
Оборудование: 1. Химические стаканы на 500 и 100 мл
2. Цилиндры на 500 и 250 мл
3. Мерные колбы на 100 мл
4. Воронки
5. Стеклянные палочки
6. Фильтры.
7. Штативы с пробирками, пипетки, спиртовки.
Ход работы.
1. Чтобы отделить белок от желтка, осторожно проделывают отверстие в скорлупе с двух концов и выливают белок в стакан на 500 мл. В тот же стакан приливают 250 мл дистиллированной воды и содержимое тщательно перемешивают стеклянной палочкой.
2. Затем раствор переносят в мерный цилиндр и объем раствора доводят до 300 мл добавлением дистиллированной водой. Раствор оставляют на 30 мин при комнатной температуре для образования хлопьевидного осадка глобулинов.
15 мл полученной суспензии фильтруют через фильтр. Фильтрат, содержащий яичный альбумин используют для дальнейших работ.
Анализ аминокислотного состава. Цветные реакции на белки.
1. Реакция на ароматические аминокислоты (реакция нитрования).
При нагревании с крепкой азотной кислотой растворы белка дают желтое окрашивание. Реакция обусловлена наличием в белках ароматических аминокислот (фенилаланина, тирозина, триптофана) и основана на образовании нитропроизводных этих аминокислот.
После подщелачивания раствора NH4OH или NaOH желтое окрашивание переходит в оранжевое окрашивание.