- •Окраска бактерий в мазках
- •Для обнаружения возбудителей используют различные методы и группы методов.
- •Окраска метиленовым синим Лефлера Методика окраски.
- •Окраска основным фуксином по Пфейферу
- •Окраска генциановым или метиловым фиолетовым
- •Окраска карболовым тионином Николя
- •Окраска акридиновым оранжевым по Дарту-Тернеру
- •Окраска по Граму Красящие растворы.
- •Красящие смеси для грамположительных бактерий:
- •Красящие смеси для грамотрицательных бактерий:
- •Методика окраски.
- •Окраска по Романовскому-Гимзе Приготовление красителя
- •Методика окраски
- •Окраска плазмодиев малярии в мазках по Романовскому-Гимза
- •Методика окраски «толстой капли».
- •Метод Френкеля
- •Флюоресцентное окрашивание мазков мокроты (метод Хагеманна) ,
- •Метод Киньуна (для срезов)
- •Метод Файта (для срезов)
- •Серебрение бактерий в мазках — метод Фонтана
- •Выявление жгутиков и ресничек Метод Леффлера
- •Метод Лайфзона
- •Метод Меллера
- •Окраска малахитовым зеленым Шеффера-Фултона
- •Метод Ожешки
- •Метод Битгера
- •Выявление возбудителей сыпного тифа и других риккетсий Выявление риккетсий в мазках (метод Маккиавелло)
- •Выявление риккетсий в срезах (метод Ника)
- •Выявление коринебактерий дифтерии
- •Выявление стрептококков
- •Выявление стафилококков
- •Выявление пневмококков
- •Выявление менингококков
- •Выявление гонококков
- •Выявление возбудителей чумы
- •Выявление анаэробных спорообразующих бактерий группы клостридии
- •Выявление возбудителей сибирской язвы
- •Выявление возбудителей кишечной инфекции
- •Выявление спирохет и других спиралевидных бактерий
- •Выявление возбудителей возвратного тифа
- •Выявление лептоспир
Выявление гонококков
Гонококки, имеющие вид диплококка с капсулой, грамотрицательные, окрашиваются метиленовым синим по Леффлеру. В срезах гонококки окрашиваются с трудом. Эти микроорганизмы можно идентифицировать с помощью коммерческих иммунофлюоресцентных наборов.
Выявление возбудителей чумы
Возбудитель чумы грамотрицателен. В. мазках патологического, материала он имеет характерный вид палочек оксидной формы, концы которых окрашиваются метиленовым синим более интенсивно, чем середина. Палочки часто собраны в цепочки. Созданы коммерческие иммунофлюоресцирующие препараты для идентификации возбудителей чумы и иммуноферментные тёст-системы на чумные антигены» пригодные для идентификации возбудителя в мазках и тканях.
Выявление анаэробных спорообразующих бактерий группы клостридии
Клостридии — крупные грамположительные палочки, все они могут образовывать споры. У возбудителя столбняка спора располагается на конце палочки, что придает ему вид барабанной палочки. Иногда споры могут находиться в центре клетки. У большинства видов есть перитрихиальные жгутики. Окрашивают клостридии карбол-фуксином либо по методу Ожешки для выявления спор.
Возбудители ботулизма (Cl. botulinum). Их выявляют с помощью биологической пробы на присутствие ботулинического токсина. Бактериоскопию не проводят.
Возбудители газовой гангрены (Cl. perfringens) и другие клостридии. При окраске мазков гнойного отделяемого из ран по Граму выявляют крупные грамположительные палочки, окруженные капсулой. Для окрашивания капсул на стекло наносят каплю туши и рядом петлей размазывают исследуемый материал. Смесь материала и туши тщательно перемешивают, делают тонкий мазок, высушивают, фиксируют любым способом. После фиксации мазок промывают протонной водой, окрашивают карболфуксином Циля, разведенным в соотношении 1:3, в течение 3 — 5 мин, промывают водой, высушивают и изучают при иммерсии. Выявление грубых или полиморфных палочек, имеющих капсулу, позволяет заподозрить наличие в исследуемом материале возбудителя газовой гангрены.
Выявление возбудителей сибирской язвы
Мазки из мокроты при подозрении на легочную форму сибирской язвы, мазки из содержимого карбункула (при кожной форме) или мазки из кала, фиксированные любым способом, окрашивают по Граму. Окраску капсул проводят так же как при выявлении возбудителей газовой гангрены. Обнаружение крупных грубых грамположительных палочек, имеющих капсулу и расположенных в виде коротких цепочек, является основанием для установления предварительного диагноза сибирской язвы.
Выявление возбудителей кишечной инфекции
Возбудители кишечных инфекций относятся к нескольким семействам, все представители которых являются грамотрицательными, неспорообразующими палочками, имеют сходную морфологию и с трудом различаются бактериоскопически, поэтому они хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Идентификацию этих возбудителей лучше всего проводить иммуноцитохимически либо с помощью иммунолюминесцентного или иммуноферментного метода. Холерные вибрионы выявляют как с помощью анилиновых красителей типа метиленового синего, так и иммунолюминесцентным способом с препаратами люминесцирующих антихолерных антител.
Выявление спирохет и других спиралевидных бактерий
Для выявления возбудителя сифилиса (Treponema pallidum) используют темное поле или иммунофлюоресцентную окраску. Они плохо окрашиваются анилиновыми красителями, но импрегнируются по методу Левадити в тканях.