- •Научный руководитель доктор медицинских наук, профессор
- •Реферат
- •Настоящий отчет составлен в соответствии с требованиями гост 7.32 -2001.
- •Содержание
- •1.2 Нефтеокисляющие микроорганизмы как маркеры загрязнения морской экосистемы
- •1.3 Анализ существующих микробиологических показателей для оценки степени чистоты (загрязненности) морской воды
- •1.4 Выбор направления исследований
- •2.2.2. Изучение основных культурально-морфологических свойств микроорганизмов, выделенных из морской воды в разное время года
- •2.3.2. Динамика численности нефтеокисляющих микроорганизмов
- •2.4 Разработка способа биотестирования степени загрязнения морской воды по ингибированию роста тест-культуры
- •2.5 Обобщение и оценка результатов исследований
2.2.2. Изучение основных культурально-морфологических свойств микроорганизмов, выделенных из морской воды в разное время года
Образцы морской воды были взяты в разное время года в определенных местах. Точки отбора поверхностного горизонта воды (10-20 см) отстояли от дна на 1-6 метров. Одна из проб воды отбиралась вблизи пляжа (станица Голубицкая).
В лаборатории образцы воды, доставленные из Краснодарского края, высевали на агар Хоттингера в чашках Петри для определения типов морфологии колоний. Чашки Петри с посевами образцов воды инкубировали в термостате при температуре (27-29)С и просматривали каждые 24 часа. По количеству видов колоний образцы воды были различными в разное время года (табл. 3).
Таблица 3 – Характеристика аэробной микрофлоры по морфологии колоний, выросших на агаре Хоттингера
Место отбора |
Максимальное количество морфологически различимых типов колоний, выделенных из проб воды, взятых в … 2005 г. |
||||
июле |
августе |
октябре |
|||
G 2-1 |
10 |
- |
1 |
||
G 2-2 |
6 |
- |
1 |
||
G 2-3 |
6 |
- |
1 |
||
G 2-4 |
3 |
- |
1 |
||
G 2-5 |
11 |
- |
3 |
||
G 2-6 |
5 |
- |
3 |
||
G 2-7 |
8 |
- |
1 |
||
G 2-8 |
12 |
- |
1 |
||
G 2-9 |
4 |
- |
1 |
||
G 2-10 |
5 |
- |
1 |
||
G 2-11 |
12 |
- |
1 |
||
G 2-12 |
13 |
- |
1 |
||
G 2-13 |
7 |
- |
1 |
||
G 2-14 |
6 |
- |
1 |
||
G 2-15 |
5 |
- |
1 |
||
G 2-16 |
5 |
- |
1 |
||
G 2-17 |
7 |
- |
1 |
||
G 2-18 |
5 |
- |
3 |
||
G 2-19 |
6 |
- |
1 |
||
G 2-20 |
6 |
- |
1 |
||
Продолжение таблицы 3 |
|||||
Место отбора |
Максимальное количество морфологически различимых типов колоний, выделенных из проб воды, взятых в … 2005 г. |
||||
июле |
августе |
октябре |
|||
G 2-21 |
11 |
- |
1 |
||
G 2-22 |
14 |
- |
1 |
||
G 2-23 |
8 |
- |
2 |
||
G 2-24 |
4 |
- |
2 |
||
G 3-2 |
5 |
- |
- |
||
G 3-3 |
2 |
- |
- |
||
G 3-5 |
8 |
- |
- |
||
G 3-6 |
7 |
- |
- |
||
G 3-7 |
6 |
- |
- |
||
G 3-8 |
3 |
- |
- |
||
G 3-9 |
9 |
- |
- |
||
G 3-10 |
2 |
- |
- |
||
G 3-11 |
6 |
- |
- |
||
G 3-12 |
5 |
- |
- |
||
G 3-13 |
5 |
- |
- |
||
G 3-14 |
11 |
- |
- |
||
G 3-15 |
5 |
- |
- |
||
G 3-16 |
6 |
- |
- |
||
G 3-17 |
7 |
- |
- |
||
G 3-18 |
5 |
- |
- |
||
G 3-19 |
4 |
- |
- |
||
G 3-20 |
7 |
- |
- |
||
G 3-21 |
1 |
- |
- |
||
G 3-22 |
2 |
- |
- |
||
G 3-23 |
5 |
- |
- |
||
G 3-24 |
5 |
- |
- |
||
G 3-25 |
6 |
- |
- |
||
G 3-26 |
1 |
- |
- |
||
G 3-27 |
1 |
- |
- |
||
G 3-28 |
5 |
- |
- |
||
G 3-29 |
1 |
- |
- |
||
G 3-30 |
9 |
- |
- |
||
G 3-31 |
2 |
- |
- |
||
G 3-32 |
1 |
- |
- |
||
G 3-33 |
1 |
- |
- |
||
G 3-34 |
1 |
- |
- |
||
G 3-35 |
2 |
- |
- |
||
G 3-36 |
4 |
- |
- |
||
Продолжение таблицы 3 |
|||||
Место отбора |
Максимальное количество морфологически различимых типов колоний, выделенных из проб воды, взятых в … 2005 г. |
||||
июле |
августе |
октябре |
|||
G 3-38 |
5 |
- |
- |
||
G 3-39 |
6 |
- |
- |
||
G 3-40 |
1 |
- |
- |
||
G 3-41 |
1 |
- |
- |
||
G 3-42 |
5 |
- |
- |
||
G 3-43 |
14 |
- |
- |
||
G 3-44 |
6 |
- |
- |
||
Соловьевское гирло |
1 2 4 6 |
- - - - |
4 1 1 1 |
- - - - |
|
Куликовское гирло |
2 4 6 |
- - - |
1 1 1 |
- - - |
|
Пересыпское гирло |
2 4 6 |
- - - |
31 3 4 |
- - - |
|
Керченский пролив (Кучугуры) |
2 4 6 |
- - - |
1 3 1 |
- - - |
|
Открытая часть Темрюкского залива |
2 4 6 |
- - - |
8 1 4 |
- - - |
|
Пляж (ст. Голубицкая) |
1 1 |
- - |
5 6 |
- - |
|
Примечания: 1. Буквой G и цифровой группой обозначен код станции 2. ״-״ отбор проб морской воды не проводился 3. Точки отбора поверхностного горизонта воды (10-20 см) отстояли от дна на 1-6 метров |
Сравнительно большее разнообразие микробов отмечено в пробах, отобранных в июле на станциях G 2-5, G 2-8, G 2-11, G 2-12, G 2-21, G-2-22. Сравнение этих проб с пробами, отобранными из данных мест в октябре показало, что количество морфологически различимых типов колоний резко сократилось. Вероятно, данные колебания связаны со временем года. Отмечено также заметное морфологическое разнообразие колоний из проб морской воды, отобранной в открытой части Темрюкского залива и в районе пляжа. Данный факт можно объяснить тем, что в близи Темрюкского залива расположен населенный пункт (г. Темрюк), судоходный порт, и река Кубань впадает в залив. Что касается пляжа, то он расположен вблизи населенного пункта (станица Голубицкая).
Практически в каждой пробе содержались микроорганизмы, формирующие на агаре Хоттингера неправильной формы прозрачные желтоватые колонии, склонные к ползучему росту. По экспансивности роста данный тип колоний напоминает колонии Proteus vulgaris. Колонии указанного типа к 4 суткам инкубации посевов в чашках Петри полностью сливались, образуя сплошной газон. По культурально-морфологическим свойствам микробы, формирующие указанный тип колоний, были отнесены к роду Pseudomonas.
2.3. Изучение количественных показателей популяции микроорганизмов акватории Азовского моря
2.3.1 Фоновое состояние аэробной микрофлоры в различных точках акватории Азовского моря
Фоновое состояние определяли в поверхностных водах Азовского моря, взятых в местах предполагаемого бурения.
Бактерии выделяли из проб морской воды чашечным методом на ППС на основе перевара Хоттингера с добавлением 3% NaCl. Чашки Петри с посевами образцов воды инкубировали в термостате при температуре (27- 29)С и просматривали каждые 24 часа. Результаты представлены в таблицах 4, 5.
Таблица 4 – Общее микробное число в образцах морской воды, отобранных на станциях в июле и ноябре 2005 г. ( Х±I95, n=5)
Код станции |
Количество микробов в пробах воды (тыс ж.м.к.см-3), отобранных в…2005 г. |
|
июле |
ноябре |
|
G 2-1 |
870±104 |
10±2 |
G 2-2 |
530±67 |
11±2 |
G 2-3 |
560±61 |
11±3 |
G 2-4 |
260±36 |
25±3 |
G 2-5 |
1380±166 |
44±2 |
G 2-6 |
260±34 |
89±7 |
G 2-7 |
780±94 |
12±2 |
G 2-8 |
1460±192 |
2±0,2 |
G 2-9 |
260±29 |
3±0,2 |
G 2-10 |
380±51 |
5±0,3 |
G 2-11 |
1150±150 |
1±0,07 |
G 2-12 |
1440±158 |
8±0,9 |
G 2-13 |
580±70 |
0,06±0,02 |
G 2-14 |
570±74 |
0,08±0,02 |
G 2-15 |
380±51 |
0,03±0,01 |
G 2-16 |
340±41 |
2±0,02 |
G 2-17 |
640±77 |
0,05±0,01 |
G 2-18 |
270±35 |
78±9 |
G 2-19 |
330±36 |
0,04±0,01 |
G 2-20 |
430±47 |
2±0,2 |
G 2-21 |
1080±140 |
0,07±0,01
|
Продолжение таблицы 4 |
||
Код станции |
Количество микробов в пробах воды (тыс ж.м.к.см-3), отобранных в…2005 г. |
|
в июле |
в ноябре |
|
G 2-22 |
1590±160 |
3±0,02 |
G 2-23 |
720±94 |
10±2 |
G 2-24 |
590±71 |
40±5 |
G 3-2 |
240±31 |
- |
G 3-3 |
90±10 |
- |
G 3-5 |
710±85 |
- |
G 3-6 |
560±73 |
- |
G 3-7 |
360±51 |
- |
G 3-8 |
130±17 |
- |
G 3-9 |
750±96 |
- |
G 3-10 |
102±12 |
- |
G 3-11 |
540±71 |
- |
G 3-12 |
330±46 |
- |
G 3-13 |
280±31 |
- |
G 3-14 |
1440±174 |
- |
G 3-15 |
220±24 |
- |
G 3-16 |
390±47 |
- |
G 3-17 |
510±56 |
- |
G 3-18 |
190±57 |
- |
G 3-19 |
150±21 |
- |
G 3-20 |
550±62 |
- |
G 3-21 |
40±5 |
- |
G 3-22 |
60±11 |
- |
G 3-23 |
240±32 |
- |
G 3-24 |
250±28 |
- |
G 3-25 |
320±43 |
- |
G 3-26 |
10±2 |
- |
G 3-27 |
30±4 |
- |
G 3-28 |
230±28 |
- |
G 3-29 |
50±7 |
- |
G 3-30 |
780±93 |
- |
G 3-31 |
112±14 |
- |
G 3-32 |
20±3 |
- |
G 3-33 |
12±1 |
- |
G 3-34 |
2±0,1 |
- |
G 3-35 |
110±14 |
- |
G 3-36 |
140±15 |
- |
G 3-37 |
10±2 |
- |
G 3-38 |
220±45 |
- |
Продолжение таблицы 4 |
||
Код станции |
Количество микробов в пробах воды (тыс ж.м.к.см-3), отобранных в…2005 г. |
|
июле |
ноябре |
|
G 3-39 |
380±56 |
- |
G 3-40 |
17±4 |
- |
G 3-41 |
10±2 |
- |
G 3-42 |
270±24 |
- |
G 3-43 |
1710±173 |
- |
G 3-44 |
420±54 |
- |
Примечание – «-» - отбор проб морской воды не проводили |
Таблица 5 – Общее микробное число в образцах морской воды, отобранных в районе предполагаемого бурения в августе 2005 г. (Х±I95, n=5)
Место отбора |
Точка отбора |
Количество микробов в пробах воды, тыс ж.м.к.см-3 |
Соловьевское гирло |
1 2 4 6 |
150±18 50±7 3±1 0,06±0,01 |
Куликовское гирло |
2 4 6 |
12±2 10±3 22±6 |
Пересыпское гирло |
2 4 6 |
160±31 130±21 330±35 |
Керченский пролив (Кучугуры) |
2 4 6 |
8±2 150±34 14±3 |
Открытая часть Темрюкского залива |
1 2 4 6 |
700±85 440±65 10±2 560±75 |
Пляж (ст. Голубицкая) |
1 1 |
320±48 570±74 |
Примечание - Точки отбора поверхностного горизонта воды (10-20 см) отстояли от дна на 1-6 метров |
Результаты исследований, представленные в таблицах 4, 5, отражают зависимость изменений общего количества аэробных микроорганизмов от сезона отбора проб. Данный показатель составил: в июле - (10 - 1710) тыс ж.м.к.см-3, в августе – (0,06 - 700) тыс ж.м.к.см-3 и октябре – (0,03 -89) тыс м.к.см-3. Указанные значения можно считать фоновыми для соответствующего периода.