Качественные реакции на желчные кислоты

Задание 1. Провести качественные реакции на желчные кислоты.

А) Проба Гая.

Принцип. Желчные кислоты имеют свойство снижать поверхностное натяжение мочи.

Ход работы. В стаканчик прилить 20-30 мл мочи, затем на ее поверхность просеять через марлю тонко измельченный порошок серы. Если моча содержит желчные кислоты, то сера оседает на дно на протяжении 5 мин. При отсутствии желчных кислот в моче сера остается на поверхности даже при легком струшивании стаканчика. Проба становиться положительной при концентрации желчных кислот и их солей в моче выше, чем 0,01%.

Б) Реакция Петенкофера.

Принцип. При взаимодействии желчных кислот с оксиметилфур-фуролом образуются продукты их конденсации, которые имеют красно-фиолетовую окраску. Оксиметилфурфурол образуется из фруктозы (сахарозы) при взаимодействии с концентрированной серной кислотой.

Ход работы. На чашку Петри или стекло нанести 2-3 капли мочи, 2 капли раствора сахарозы и тщательно перемешать стеклянной палочкой. После этого прибавить 7 капель концентрированной серной кислоты и снова перемешать стеклянной палочкой. При наличии желчных кислот через несколько минут появляется красное окрашивание, которое постепенно переходит в красно-фиолетовое.

В) Проба с пептоном и салициловой кислотой.

Ход работы. 5-10 мл мочи фильтровать до полной прозрачности; если необходимо, подкислить уксусной кислотой и развести до относительной плотности ниже 1,008. Отмерить 2 мл отфильтрованной и разбавленной мочи и прибавить 5 мл реактива, который содержит пептон и салициловую кислоту. При наличии в моче желчных кислот появляется молочная муть.

Клинико-диагностическое значение. Желчные кислоты выполняют важную роль в переваривании и всасывании липидов - они обеспе-чивают эмульгирование жиров, активацию панкреатической липазы, образование смешанных мицелл. В норме желчные кислоты подвергаются энтеропечёночной циркуляции и выводятся из организма через кишечник. Нормальная моча, как правило, их не содержит. При механической желтухе они появляются в моче, и их количество увеличивается при длительной закупорке желчных протоков. Желчные кислоты в моче можно выявить и при паренхиматозной желтухе.

Литература

1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 72-85, 396-398.

2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 94-109, 468-470, 478-480.

3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 348-363.

4. Вороніна Л.М. та ін. Біологічна хімія. – Харків: Основа, 2000. – С. 282-304.

5. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 188-203, 363-370.

6. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 370-386.

7. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.: ООО Медицинское информационное агентство, 1998. – С. 270-272, 279-281, 292-295.

8. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Кобилянська Л.І. /За ред. О.Я. Склярова. – К.:Здоров’я, 2002. – С. 119-145.