новая папка 2 / 49960

2.2.2. Результаты изучения токсичности при нанесении на кожу

В результате проведенных исследований установлено, что аппликации препаратов на поверхность кожи подопытных животных не вызывали каких-

либо видимых изменений и изменений толщины кожной складки (табл.1),

гибели животных и признаков интоксикации не отмечалось. Вычислить ЛД50

изучаемых препаратов при нанесении на кожу и кожно-оральный коэффициент не представлялось возможным, так как при проведении эксперимента методом накожных аппликаций гибели животных не отмечалось.

Таблица 1 Результаты изучения токсичности препаратов при нанесении на кожу

Группа	Вид	Испытуемый препарат	Толщина кожной
	животных		складки, мм
1	крысы	седимин-Fe+	2,15±0,086
2	мыши	седимин-Fe+	0,78±0,024
3	крысы	седимин-Se+	2,19±0,079
4	мыши	седимин-Se+	0,79±0,032
Контроль	крысы	0,9% раствор NaCI	2,12±0,079
Контроль	мыши	0,9% раствор NaCI	0,81±0,034

2.2.3.Результаты изучение кожно-резорбтивного действия

Учет реакции после погружения хвоста определяли по наличию местных изменений на коже, степени выраженности интоксикации и изменению массы тела животных, количеству смертельных исходов.

У животных всех групп не наблюдалось видимых изменений кожи хвоста, кроме кратковременного изменения цвета, случаев гибели и каких-

либо признаков интоксикации. Исходя из этого можно заключить, что исследуемые препараты не обладают кожно-резорбтивным действием.

11

2.2.4.Результаты изучения местного действия

Результаты постановки конъюнктивальной пробы на крысах показали,

что после инсталляции препаратов клиническое состояние животных оставалось в пределах физиологической нормы. Не выявлено изменений конъюнктивы - чрезмерного кровенаполнения сосудов, лакримации и выделениий, изменений состояния роговицы и век.

2.2.5.Результаты изучения аллергенных свойств

В результате сенсибилизации лабораторных животных препаратами седимин-Fe+ и седимин-Se+ путем многократных аппликаций на выстриженные участки кожи боковой поверхности тела ежедневно в течение двух недель, не выявлено гиперемии, эритемы, отека кожи или дерматита,

что свидетельствует об отсутствии аллергенных свойств у изучаемых препаратов.

2.2.6. Результаты изучения хронической токсичности

Ежедневное внутримышечное введение исследуемых препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ крысам в течение 14 дней не вызывало изменений в поведении и общем состоянии животных. При сравнении общего и среднесуточного приростов массы тела крыс опытных групп с крысами контрольной группы достоверных различий не отмечалось. Так же не установлено значительных различий в общем и среднесуточном приросте массы тела крыс в зависимости от получаемого количества препарата.

Патологоанатомические исследования крыс подопытных групп,

убитых в конце эксперимента, показали общие характерные патологоанатомические изменения. А именно – изменение цвета мышечной ткани в месте инъекции, которая приобретала ржаво-коричневый оттенок,

что связано с цветом вводимых препаратов.

Коэффициент кумуляции рассчитать не удалось, так как не отмечалось гибели животных.

12

В результате анализов крови установлено незначительное повышение железа в сыворотке крови, а так же увеличение содержания ферментов АСТ и АЛТ.

2.2.7. Результаты изучения влияния препаратов

на постнатальное развитие крысят

При изучении влияния препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+ на постнатальное развитие крысят установлено, что во всех опытных группах крысята развивались нормально и не отличались от крысят контрольных групп. Все показатели физического развития крысят достоверно между группами не отличались и были следующими:

-отлипание ушной раковины в среднем происходило на 2-3-й день;

-появление первичного волосяного покрова происходило в среднем на

5-6-й день;

-прорезывание резцов происходило в среднем на 8-9-й день;

-открытие глаз происходило на 14-15-й день;

-опускание семенников в среднем на 25-й день;

-открытие влагалища в среднем на 30-й день.

При исследовании эмоционально-двигательной активности,

способности тонкой координации методом переворачивания в воздухе с последующим вставанием на четыре лапы, различий между опытными и контрольными группами не установлено. Все животные во всех группах приземлялись на 4 лапы одновременно.

Таким образом, можно утверждать, что препараты седимин-Fe+ и

седимин-Se+ не оказывают влияние на постнатальное развитие крысят.

2.2.8. Результаты изучения влияния препаратов на уровень тиреоидных

гормонов в крови животных и морфологию щитовидной железы

В результате проведенных исследований установлено, что под влиянием изучаемых препаратов отмечается достоверное увеличение содержания трийодтиронина (Т3) и тироксина (Т4) в крови белах крыс (табл. 2).

13

					Таблица 2
Влияние препаратв на уровень тиреоидных гормонов в крови крыс
	После первого введения		После второго введения
Препарат	Т3	Т4	Т3		Т4
	(нмоль/л)	(нмоль/л)	(нмоль/л)		(нмоль/л)
седимин-Fe+	0,82*	53,09*	0,68*		71,23*
седимин-Se+	0,78*	56,00*	0,66		72,45*
Контроль	0,52	49,21	0,63		51,79

* - p≤0,01

Анализ крови телят также позволил судить о достоверном увеличении содержания трийодтиронина (Т3) и тироксина (Т4) у животных подопытных групп (табл. 3).

Таблица 3

Влияние препаратов на уровень тиреоидных гормонов в крови телят

Группа	После первого введения		После второго введения
	Т3 (нмоль/л)	Т4 (нмоль/л)	Т3 (нмоль/л)	Т4 (нмоль/л)
седимин-Se+	2,5±0,13*	232,6±11,5*	3,0±0,19*	319,4±13,3*
седимин-Fe+	2,4±0,15*	229,8±10,4*	2,9±0,16*	315,8±15,2*
Контроль	1,5±0,12	136,8±9,6	1,7±0,21	141,8±12,7

* - p≤0,01

Таким образом, отмечается достоверная тенденция к увеличению содержания тиреоидных гормонов в крови исследуемых животных, что свидетельствует об активации щитовидной железы под влиянием седимина-

Fe+ и седимина-Se+. Рост показателей происходит как после первого введения, так и после второго введения препаратов.

Анализ гистологической структуры щитовидной железы с использованием полуколичественных и количественных методов исследования позволил выявить закономерные изменения морфологических и морфометрических показателей щитовидной железы между контрольной и опытной группой (табл. 4).

14

Оценка гистологических препаратов ткани щитовидной железы у крыс контрольной группы животных указывает на признаки перестройки микроархитектоники железы, соответствующих снижению функциональной активности органа (фото 1).

На гистологических срезах нами наблюдалась значительная гетерогенность размеров фолликулов: от мелких до крупных, с

преобладанием крупных фолликулов. Средняя площадь фолликулов составила 16320,43±1042,2 мкм2, а средний диаметр 137,3±4 мкм. Средняя высота интрафоликуллярного эпителия 4,32±0,22 мкм.

Важными показателями, свидетельствующими о невысокой функциональной активности железы, послужили вычисления индекса накопления коллоида (индекс Брауна) и фолликулярно-коллоидного индекса

(ФКИ). В контрольной группе животных индекс Брауна составил 15,8, а

фолликулярно-коллоидный индекс 1,1.

У животных всех подопытных групп происходит повышение морфофункциональной активности щитовидной железы при сравнении с группой контроля. Морфологические изменения в железе, указывающие на еѐ функциональную активность, выражались в преобладании мелких и средних фолликулов округло-овальной формы, средняя площадь которых в первой опытной группе составила 4410,86±254,7мкм2 (р<0,01), во второй - 4216,54±214,5 мкм2 (р<0,01), средний диаметр фолликулов достигает в первой опытной группе 88,1± 3,88 (р<0,01) мкм, во второй опытной группе

84,5±3,4(р<0,01) мкм (фото 2). Активизируется пролиферация фолликулярного эпителия, о чѐм свидетельствует увеличение показателя процентной доли эпителия в органе, значение которого в первой и второй опытных группах достигает соответственно 53,26±3,11% и 54,22±3,54%, в

контрольной группе животных этот показатель составил 34,64±4,0%.

Большинство фолликулов состоят из кубического эпителия, средняя высота которого составляет для первой опытной группы 4,32±0,22 мкм, для второй опытной группы 8,77±0,35 мкм.

15

				Таблица 4
	Морфометрические показатели щитовидной железы крыс
	Показатель	Контроль	седимин-Fe+	седимин-Se+
	Доля эпителия (Е%)	34,64±6,32	53,26±3,11*	54,22±3,54*
	Доля коллоида (С%)	34,25±6,38	15,44±2,02*	14,3±4,3*
	Доля стромы (S%)	31,11±3,7	31,1±2,74	31,48±3,14
	Средняя площадь	16320,43	4410,86	4216,54
	фолликулов, мкм2	±1042,2	±254,7*	±214,5*
	Средний диаметр	137,3±4,0	88,1±3,88*	84,5±3,4*
	фолликулов, мкм
	Высота тироцитов, мкм	4,32±0,22	8,26±0,3*	8,77±0,35*
	ФКИ, ед.	1,1	3,5*	3,79*
	Индекс Брауна, ед.	15,8	5,3*	4,8*
	* - p≤0,01

Фото 1–Микроструктура щитовидной железы. Контроль - окраска гематоксилином-

эозином, объектив 40х, окуляр 10х. а – тироциты сильно уплощѐнной формы; б - разрыв фолликула

Фото 2–Микроструктура щитовидной железы. Опыт - окраска гематоксилином-

эозином, объектив 40х, окуляр 10х. а – кубической формы тироциты; б – резорбционные вакуоли; в – однородный оксифильный коллоид.

16

2.2.9.Результаты изучения противоанемического действия

препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+

В результате проведенных исследований установлено, что внутримышечное введение препаратов поросятам и телятам в терапевтических дозах не вызывало каких-либо неблагоприятных изменений в их общем состоянии.

Анализ крови поросят позволил судить о достоверном увеличении содержания гемоглобина в группах получавших железодекстрановые препараты. У поросят, инъецированных препаратом седимин-Fe+, этот показатель увеличился с 6,72±1,1 до 8,9±2,2 ммоль/л (р<0,01) после первого введения. После второго введения отмечался рост количества гемоглобина до

9,8±2,4 ммоль/л.

Количество эритроцитов так же возросло с 3,68±0,9 (р<0,01) до

5,42±0,63 х1012/л (р<0,01) после первого введения. После второго введения количество эритроцитов в опытной группе поросят составило 6,61±0,68х

1012/л (р<0,01).

Гематокрит увеличился с 20,15±2,66 в начале экспериментов до

28,53±3,59 (р<0,01) к концу опыта.

Среднее содержание и средняя концентрация гемоглобина в эритроците также увеличивались на протяжении опыта в опытных группах животных. Наибольший рост был в группе животных, получавших препарат седимин-Fe+, к концу опыта среднее содержание гемоглобина в эритроците достигало 21,11±0,88 Пг (р<0,01), средняя концентрация гемоглобина в эритроците достигла 30,78±2,92 % (р<0,01). Средний объем эритроцита на протяжении опыта в опытной группе поросят, также увеличился и составил к концу опыта 55,71±4,19 мкм3 (р<0,01).

При анализе биохимических показателей сыворотки крови поросят опытной группы, отмечалось достоверное увеличение уровня сывороточного железа. Уровень железа в сыворотке крови поросят возрос с 11,15±2,19 до

16,37±2,78 мкмоль/л после первого введения и до 19,76±3,59 в дальнейшем.

17

При сравнении среднесуточного и общего прироста массы тела поросят, получавших и не получавших железосодержащие препараты,

установлено, что среднесуточный прирост поросят, получавших седимин-Fe+

и ферранимал-75, составил соответственно 265,2±4,16 и 262,1±3,94 г, а

поросят контрольной группы - 226,7±5,2 г.

Анализ крови телят также позволил судить о достоверном увеличении содержания гемоглобина у животных под влиянием исследуемого препарата.

У телят, инъецированных препаратом седимин-Fe+, этот показатель увеличился с 4,7±0,5 до 6,1±0,8 ммоль/л (р<0,01) после первого введения, до

7,8±1,2 ммоль/л после второго введения.

Количество эритроцитов увеличилось с 5,22±0,33 до 6,17±0,52 х 1012/л (р<0,01) после первого введения. Количество эритроцитов после второго введения составило 8,11±0,49 х 1012/л.

Гематокрит увеличился с 18,56±1,37 до 20,34±2,27 (р<0,01) после первого введения препарата, после второго введения рост величины гематокрита был менее заметным.

Среднее содержание и средняя концентрация гемоглобина в эритроците также увеличивались на протяжении опыта и к концу опыта среднее содержание гемоглобина в эритроците достигало 14,62±0,92 Пг

(р<0,01), а средняя концентрация гемоглобина в эритроците достигла

30,13±1,77 % (р<0,01). Средний объем эритроцита на протяжении опыта также увеличился и составил к концу опыта 32,46±2,67 мкм3

При анализе биохимических показателей крови телят отмечалось достоверное возрастание уровня железа в сыворотке крови с 10,53±1,25 до

13,53±1,12 мкмоль/л после первого введения и до 14,97±2,25 мкмоль/л (р<0,01) после второго введения.

У поросят, инъецированных препаратом седимин-Se+, этот показатель увеличился с 6,72±1,1 до 7,4±2,1 ммоль/л (р<0,01) после первого введения.

После второго введения также отмечался рост величины гемоглобина, до

8,2±1,2 ммоль/л. Количество эритроцитов так же возросло с 3,68±0,9 (р<0,01)

18

до 4,22±0,46х1012/л (р<0,01) после первого введения. После второго введения количество эритроцитов в опытной группе поросят составило 5,47±0,73 х

1012/л (р<0,01) . Гематокрит увеличился с 20,15±2,66 до 25,34±2,13 (р<0,01) к

завершению экспериментов.

Отмечалось достоверное увеличение среднего содержания и средней концентрации гемоглобина в эритроците на протяжении опыта. К концу опыта среднее содержание гемоглобина в эритроците в опытной группе животных достигало 20,21±0,45 Пг (р<0,01), средняя концентрация гемоглобина в эритроците достигла 28,31±2,42 % (р<0,01). Средний объем эритроцита у подопытных поросят также увеличился и составил к концу опыта 54,99±4,23 мкм3 (р<0,01).

Уровень сывороточного железа возрос с 11,15±2,19 до 13,23±1,23

мкмоль/л после первого введения, до 14,41±3,42 после второго введения.

Среднесуточный прирост поросят, получавших седимин-Se+ и

ферранимал-75, составили соответственно 259,7±3,49 и 262,1±3,94 г, а

поросят контрольной группы 226,7±5,2 г.

У телят, инъецированных препаратом седимин-Se+, количество гемоглобина увеличилось с 4,7±0,5 до 5,8±0,3 ммоль/л (р<0,01) после первого введения, а после второго введения до 6,3±1,7 ммоль/л. Количество эритроцитов увеличилось с 5,22±0,33 до 6,01±0,67 х 1012/л (р<0,01) после первого введения. После второго введения составило 7,89±0,49 х 1012/л.

Гематокрит увеличился с 18,56±1,37 до 19,93±2,69 (р<0,01) после первого введения, после второго введения - сохранился на достигнутом уровне.

Среднее содержание и средняя концентрация гемоглобина в эритроците у телят, получавших седимин-Se+, увеличивались на протяжении опыта и к концу опыта составили 14,78±0,45 Пг (р<0,01) и 29,56±1,27 % (р<0,01), соответственно. Средний объем эритроцита на протяжении опыта,

также увеличился и составил к концу опыта 31,63±3,63 мкм3 (р<0,01).

19

При этом отмечался рост количества железа в сыворотке крови с

10,53±1,25 до 11,53±2,52 мкмоль/л после первого введения и до 12,97±1,24

мкмоль/л (р<0,01) после второго введения.

2.2.10.Результаты ветеринарно-санитарной экспертизы мяса поросят

получавших препаратов седимин-Fe+ и седимин-Se+

Установили, что органолептические, химические и микроскопические показатели мяса животных подопытных и контрольных групп не различаются и соответствуют требованиям, предъявляемым к доброкачественному мясу. Мясо характеризуется как созревшее и доброкачественное, реакция на продукты первичного распада белка отрицательная, а реакция на пероксидазу положительная.

2.2.11. Экономическая эффективность применения препаратов

седимин-Fe+ и седимин-Se+

Проведение мероприятий с использованием препаратов седимин-Fe+ и

седимин-Se+ экономически выгодно, так как на каждый рубль ветеринарных затрат хозяйство сохраняет 5,97 руб.

ВЫВОДЫ

1. Препараты седимин-Fe+ и седимин-Se+ относятся к 4-му классу опасности - вещества малоопасные, в соответствии с нормативами ГОСТ

12.1.007-76.

2.Препараты седимин-Fe+ и седимин-Se+ не обладают раздражающим действием при нанесении на слизистые оболочки и кожу, не обладают кожно-резорбтивным и аллергенным действием.

3.Ежедневное введение изучаемых препаратов белым крысам на протяжении 14 дней в дозах 1 мл/кг и 3 мл/кг не вызывает признаков токсикоза и не влияет на постнатальное развитие крысят.

20