Лабораторная работа №6 обеззараживание воды ионами серебра и методом хлорирования Обеззараживание воды ионами серебра

Одним из надежных методов обеззараживания воды является обработка ионами тяжелых металлов, в частности ионами серебра.

Бактерицидные свойства серебра объясняются способностью его ионов и ионогенных соединений разрушать плазму микроорганизмов. Степень активности серебра зависит от концентрации ионов в растворе. В природных водах, со держащих различные ионы и органические вещества в коллоидном состоянии и имеющих различные значения рН, бактерицидный эффект ионов серебра может значительно изменяться. Это объясняется образованием комплексов и малорастворимых соединений, адсорбцией ионов серебра коллоидными частицами, изменением условий адсорбируемости серебра, а также другими процессами, снижающими концентрацию ионов в растворе или ухудшающими условия контакта.

Оптимальными количествами серебра для большинства прозрачных вод, не содержащих большого количества примесей солей (в пределах 5–25 мг/л) являются дозы от 0,05 до 0,2 мг/л.

Целью настоящей работы является определение эффективности обеззараживания воды ионами серебра.

Ход определения. Для более точного количественного учета бактерий, воду загрязненного водоема следует разбавлять (разводить). Разведение производят следующим образом. В две или три пробирки наливают по 9 мл стерильной дистиллированной воды пипеткой на 10 мл и пробирки нумеруют. Отбирают 1 мл исследуемой воды и вносят в пробирку №1 (разведение получилось 1:10). После перемешивания из пробирки №1 отбирают 1 мл и вносят в пробирку №2 (разведение будет 1:100) и так далее. Степень разведения следует подбирать в каждом случае в зависимости от бактериальной загрязненности водоема. Последнее разведение делают в двух параллелях.

Выделение микроорганизмов и их учет производится путем высева на плотные питательные среды. Для этого навеску среды разводят в 150 мл дистиллированной воды в колбе на 250 мл, размешивают и доводят до кипения, непрерывно помешивая стеклянной палочкой. Далее дают среде остыть до 45–48С, прикрыв горлышко колбы бумажным фильтром. Затем среду разливают по чашкам Петри (делают по две, три параллели и разливают примерно по 15–20 мл среды на одну чашку). Прикрывают чашки со средой на три четверти и оставляют до полного остывания и затвердения.

Из одной пробирки последнего разведения отбирают аликвоту 1 мл пипеткой на 1 мл и выливают на поверхность питательной среды в чашке Петри, разравнивают по поверхности осторожными круговыми движениями, используя стерильную изогнутую палочку. Палочку стерилизуют перед каждым употреблением, окуная ее в стаканчик со спиртом и обжигая в пламени горелки. Чашки закрывают и маркируют. Следует дать воде впитаться в питательную среду, после чего чашку переворачивают вверх дном, чтобы избежать конденсации паров воды на крышке.

Грязную воду во второй пробирке последнего разведения обеззараживают солями серебра, в частности AgNO₃. Для этого из бюретки в пробирку наливают отмеренное расчетное количество 0,01 н раствора AgNO₃ и пере­мешивают. Доза азотнокислого серебра задается руководителем. Через 20 минут отбирают из 0,1 мл обеззараженной воды, и делают посев на твердую питательную среду. Подписывают чашки и помещают вместе с первыми чашками в сушильный шкаф, где они хранятся при температуре 37–40 ºС в течение 24 часов. Через сутки чашки вынимают из шкафа и производят подсчет всех выросших колоний, т. е. устанавливают микробное число и определяют эффект обеззараживания:

, (6.1)

где N – общее число микроорганизмов в 1 мл, экз/мл; n – среднее число выросших колоний на поверхности среды чашки Петри; m – разведение образца; а – аликвота, взятая для посева данного образца.

Результаты сводят в табл. 6.1.

Таблица 6.1

Доза	Число бактерий до введения AgNO3	Время контакта, мин	Число бактерий после обеззараживания	Эффект, %