1.Классификация бактериофагов по морфологическому строению:

Различные формы бактериофа­гов (А-Г) и геометрические формы голо­вок фагов (Д, Е). А. Нитевидная форма (колифаг fd). Б. Головка (гексагональный контур) с отростком и сократимым чехлом (например, колифаги Т2, Т4 и Т6). В. Головка с длинным, гибким несокра­тимым отростком (например, колифаги Т1 и Т5). Г. Головка с коротким отрост­ком (например, колифаги ТЗ и Т7, фаг сальмонеллы Р22). Д. Октаэдр. Е. Икосаэдр. (Bradley D. E., Bacteriol. Rev., 31 [1967], 230.)

Каждый бактериофаг обладает специфическими антигенными свойствами, отличными от антигенов бактерии-хозяина и других фагов. Имеются антигены, общие для ряда фагов (особенно содержащих РНК).

Бактериофаги подобно другим вирусам являются абсолютными внутриклеточными паразитами.

2.Классификация бактериофагов по характеру взаимодействия с микробной клеткой.

По характеру взаимодействия с микробной клеткой различают вирулентные и умеренные фаги. Вирулентные фаги вызывают продуктивную инфекцию, заканчивающуюся образованием новых фаговых частиц и лизисом бактериальных клеток. Умеренные фаги вызывают интегративную инфекцию, не приводящую к лизису клеток. ДНК этих фагов включается в хромосому бактерий и передается при их делении по наследству. Такой тип взаимодействия фага с бактериальной клеткой называют лизогенией. А бактерии, несущие в своей хромосоме фаговую ДНК (профаг), являются лизогенными.

Репродукция вирулентного фага в клетках бульонной культуры сопровождается лизисом бактерий и просветлением среды.

Выделение фага из объектов окружающей среды. Для получения вирулентного фага готовят фильтрат, пропуская исходный материал через бактериальные фильтры. Фильтрат вместе с бактериальной культурой засевают в бульон и инкубируют. После лизиса культуры оставшиеся бактерии удаляют центрифугированием или фильтрацией.

Методические указания:

Качественный метод определения фагов (метод Отто).

Чашку Петри с питательным агаром засевают бульонной культурой газоном. Затем на поверхность газона наносят каплю фага и наклоняют так, чтобы капля стекла к противоположному краю. После суточной инкубации в термостате просматривают чашки, отмечая наличие зоны лизиса по месту стекания капли фага.

Фаготипирование бактерий.

Исследуемую бульонную культуру бактерий засевают на поверхность питательного агара в чашке Петри, делят на квадраты, на которые наносят по одной капле различных типоспецифических фагов. После суточной инкубации отмечают те квадраты, в которых имеется лизис бактерий. Фагопип бактериальной культуры определяется тем типом фага, который вызывает ее лизис.

Практическое использование бактериофагов.

1. Фаготерапия. – применение бактериофагов для лечения инфекционных заболеваний.

2. Фагопрофилактика – применение бактериофагов для профилактики инфекционных заболеваний.

3. Фагодифференцировка – применение бактериофагов для определения вида исследуемой культуры.

4. .Фаготипирование – применение бактериофагов для внутривидовой идентификации исследуемых микроорганизмов (определение фаготипа)

5. Санитарно-показательные микроорганизмы. Использование бактериофагов (колифагов) в качестве санитарно-показательных микроорганизмов.

Контрольные вопросы:

1.Каково строение бактериофага?

2. Назовите основные этапы взаимодействия фага с бактериальной клеткой?

3. Что такое профаг?

4.Какие качественные методы идентификации фагов Вам известны?

5. Какова методика титрования фагов в жидкой среде по Аппельману?

6. Назовите основные сферы применения бактериофагов в медицине.