- •Федеральное агентство по образованию
- •Тема 1: иммунологическая лаборатория. Основные модели в иммунологии. Особенности работы с иммунокомпетентными клетками.
- •Тема: инфекция и инфекционный процесс.
- •1. Плазмокоагулаза.
- •2. Фибрннолизин.
- •3. Гиалуронцдаза,
- •4. Лецитовителлаза.
- •Этапы биологического метода диагностики
- •Тема: иммунитет: виды иммунитета, неспецифические факторы защиты.
- •Особенности строения и функций иммунокомпетентных клеток
- •Тема: иммунитет: антигены и антителообразование, иммунные реакции.
- •Строение иммуноглобулина g
- •Тема: иммунитет: иммунологическая память и толерантность.Иммунные реакции.
- •Тема: иммунитет: взаимодействие факторов иммунитета и неспецифической резистентности при инфекциях различной этиологии. Противоопухолевый иммунитет. Комплемензависимые серологические реакции
- •I фаза II фаза
- •Тема: Иммунитет: гнт и гзт. Антитоксический иммунитет.
- •1. Реакция нейтрализации на животных.
- •2. Кожные иммунологические пробы:
- •1. Выявление токсигенности возбудителя дифтерии в реакции преципитации в геле по Оухтерлони.
- •2. Реакция флоккуляции
- •Тема: иммунитет: иммунные реакции с использованием меченых антител или антигенов. Иммунобиологические препараты.
- •Вопросы к коллоквиуму №1
Тема: иммунитет: взаимодействие факторов иммунитета и неспецифической резистентности при инфекциях различной этиологии. Противоопухолевый иммунитет. Комплемензависимые серологические реакции
Цель:.Познакомиться с особенностями взаимодействие факторов иммунитета и неспецифической резистентности при инфекциях различной этиологии. Изучить механизмы противоопухолевого иммунитета. Научиться учитывать р. иммунного гемолиза и РСК, интерпретировать их результаты
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
Особенности взаимодействие факторов иммунитета и неспецифической резистентности при инфекциях различной этиологии
Противоопухолевый иммунитет, его значение.
Реакции с участием комплемента (реакции иммунного бактериолизиса, иммунного гемолиза, РСК).
Получение препаратов: комплемент, гемолитическая сыворотка.
Определение периода болезни с помощью серодиагностики (раздельное определение IgM, IgG).
Антибактериальный иммунитет_____________________________________________________________________________________________________________________________
Противовирусный иммунитет_____________________________________________________________________________________________________________________________
Противогрибковый иммунитет_____________________________________________________________________________________________________________________________
Противоглистный иммунитет_____________________________________________________________________________________________________________________________
Реакции с участием комплемента
Реакция иммунного бактериолизиса - реакция Аг+Ат, в которой происходит лизис бактерий в присутствии комплемента
(+) феномен - лизис (жидкость прозрачная)
(-) феномен - осадок или равномерная муть при встряхивании.
|
Реакция иммунного гемолиза ________________________________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________
Принцип реакции: К эритроцитам барана добавляются гемолитическая сыворотка и комплемент.
(+) феномен - гемолиз ("лаковая" кровь)
(-) феномен - отсутствие гемолиза.
|
Титр комплемента – это _____________________________________________ ____________________________________________________________________
Реакция связывания комплемента (РСК).
Схема РСК
I фаза II фаза
Ингредиенты:
Аг __________________________________________________________________
Ат __________________________________________________________________
Комплемент _________________________________________________________
Гемолитическая система:
эритроциты барана
гемолитическая сыворотка
Для получения достоверного результата необходимо, чтобы все известные ингредиенты были взяты в определенных количествах (рабочие дозы). Для этого колмплемент и гемолитическую сыворотку предварительно титруют и вычисляют их рабочие дозы.
Титрование комплемента.
Тип реакции _________________________________________________________
Ингредиенты:
Исследуемый материал содержит _______
Диагностические препараты 1._________________________содержит _______
2._________________________содержит _______
|
Разведения сыворотки |
Контроль гем. системы | |||||
1/10 |
1/15 |
1/20 |
1/25 |
1/30 |
1/35 | ||
Результат (Г/ЗГ) |
|
|
|
|
|
|
|
Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза
Ответ:
Титр комплемента = _____________
Рабочая доза комплемента (на 20-25% выше титра, обычно берут предыдущее разведение) = ________________________________________________________
Титрование гемолитической сыворотки.
Тип реакции _________________________________________________________
Ингредиенты:
Исследуемый материал содержит _______
Диагностические препараты 1._________________________содержит _______
2._________________________содержит _______
|
Разведения сыворотки |
Контроль | |||||||
1/200 |
1/400 |
1/800 |
1/1600 |
1/3200 |
1/6400 |
сыв. |
компл. |
эритр. | |
Результат (Г/ЗГ) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза
Ответ:
Титр гемолитической сыворотки = _________
Рабочая доза гемолитической сыворотки (в 3-4 раза выше титра) = __________
Применение РСК в экспресс-диагностике
Ингредиенты:
Исследуемый материал содержит _______
Диагностические препараты 1._________________________содержит _______
2._________________________содержит _______
3._________________________содержит _______
4._________________________содержит _______
РСК с целью выявления риккетсиозного антигена в крови больного Q-лихорадкой (ставится на 1-3 день болезни)
|
Разведения сыворотки |
Контроль | |||||||
1/2 |
1/4 |
1/8 |
1/16 |
1/32 |
1/64 |
гем. сист |
компл. |
эритр. | |
Результат (Г/ЗГ) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза
Диагностический титр = 1/8
Ответ: _____________________________________________________________ ____________________________________________________________________
Вывод: ____________________________________________________________ __________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Применение РСК в экспресс-диагностике
Ингредиенты:
Исследуемый материал содержит _______
Диагностические препараты 1._________________________содержит _______
2._________________________содержит _______
3._________________________содержит _______
4._________________________содержит _______
РСК с целью серодиагностики сыпного тифа
Сыворотка на |
Разведения сыворотки |
Контроль | |||||
1/20 |
1/40 |
1/80 |
1/160 |
1/320 |
антигена |
сыворотки | |
8 день |
|
|
|
|
|
|
|
14 день |
|
|
|
|
|
|
|
Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза
Ответ: _____________________________________________________________ ____________________________________________________________________
Вывод: ____________________________________________________________ __________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Применение РСК для определения периода болезни.
Принцип метода: IgM, образующиеся преимущественно в начальный (острый) период заболевания (или при первичной встрече с антигеном), при обработке меркаптоэтанолом разрушаются в отличие от IgG, образование которых характерно для более позднего периода болезни (или повторной встречи с антигеном). Более низкий титр реакции с обработанной сывороткой, свидетельствует о наличии IgM - начале заболевания.
Ингредиенты:
Исследуемый материал 1. ____________________________содержит ________
2. ____________________________содержит _______
Диагностические препараты 1._________________________содержит _______
2._________________________содержит _______
3._________________________содержит _______
4._________________________содержит _______
РСК с целью раздельного определения IgM и IgG в сыворотке больного сыпным тифом
Сыворотка |
Разведения сыворотки |
Контроли | ||||
1/50 |
1/100 |
1/200 |
1/400 |
антигена |
сыворотки | |
нативная |
|
|
|
|
|
|
обработанная меркаптоэтанолом |
|
|
|
|
|
|
Обозначения: Г- гемолиз, ЗГ - задержка гемолиза
Ответ: _____________________________________________________________ ____________________________________________________________________
Вывод: ____________________________________________________________ __________________________________________________________________
____________________________________________________________________
Занятие № 7 Дата______________