- •1. Введение
- •1. Допастеровская эра (до 1865 г.).
- •2. Послепастеровская эра (1866 – 1940 гг.).
- •3. Эра антибиотиков (1941-1960 гг.).
- •4. Эра управляемого биосинтеза (1961 – 1975 гг.).
- •5. Эра новой биотехнологии (после 1975 г.).
- •Вопросы для самоконтроля
- •2. Живая клетка – основа биологических систем
- •Эндоплазматический ретикулум (эр)
- •Аппарат Гольджи
- •Цитоплазматический матрикс
- •Клеточные органеллы
- •Хлоропласты
- •Клеточная стенка
- •3. Общая характеристика организмов – объектов биотехнологии
- •Эукариоты. Водоросли
- •Принципы подбора биотехнологических объектов
- •Вопросы для самоконтроля
- •4. Основы генетики микроорганизмов
- •Репликация
- •Синтез белка
- •Регуляция генной активности
- •Изменчивость
- •Генетическая рекомбинация
- •Плазмиды
- •Вопросы для самоконтроля
- •5. Метаболизм и принципы его регуляции
- •Анаболизм и катаболизм
- •Углеводы как источник энергии
- •Анаэробное дыхание
- •Брожение
- •Молочнокислое брожение
- •Спиртовое брожение
- •Маслянокислое брожение
- •Аминокислоты как источник энергии
- •Липиды как источники энергии
- •Двууглеродные соединения как источники энергии
- •Рост микроорганизмов на углеводных средах, спиртах, органических кислотах, углеводородах, с1-соединениях
- •Вопросы для самоконтроля
- •6. Ассимиляция у автотрофных и гетеротрофных организмов
- •Биосинтез углеводов
- •Поглощение света и возбуждение пигментов.
- •Биосинтез нуклеиновых кислот
- •Синтез пуриновых нуклеотидов:
- •Регуляция метаболизма
- •Первичные метаболиты
- •Производство аминокислот.
- •Производство органических кислот.
- •Производство спиртов.
- •Производство витаминов.
- •Вторичные метаболиты
- •Антибиотики.
- •Вопросы для самоконтроля
- •7. Питание микроорганизмов
- •Механизм поступления веществ в клетку
- •1) Пассивная диффузия.
- •4) Перенос (транслокация) групп.
- •1.Фотолитотрофия.
- •2. Фотоорганотрофия.
- •3. Хемолитотрофия.
- •4. Хемоорганотрофия.
- •Потребности микроорганизмов в дополнительных питательных веществах
- •Минеральные элементы.
- •Ростовые вещества.
- •Вопросы для самоконтроля
- •8. Рост, размножение и культивирование микроорганизмов
- •Рост бактериальной клетки
- •Размножение бактерий
- •Размножение бактериальной популяции
- •Непрерывные культуры
- •Синхронные культуры
- •Вопросы для самоконтроля
- •9. Подготовка биологических объектов для биотехнологического процесса
- •Гибридизация микроорганизмов
- •1. Получение генов.
- •2. Введение гена в вектор.
- •3. Перенос генов в клетки организма-реципиента.
- •4. Идентификация клеток-реципиентов, которые приобрели желаемый ген (гены).
- •Генетическая инженерия и конструирование новых организмов
- •Улучшение продуцентов, используемых в производстве, методами генетической инженерии
- •Клеточная инженерия
- •Получение гибридных клеток
- •Возможности клеточной инженерии
- •Культуры тканей и клеток высших растений
- •Культуры клеток животных и человека
- •Трансплантация эмбрионов
- •Гибридомная технология
- •Вопросы для самоконтроля
- •10. Культивирование биологических объектов
- •Принципы действия и конструкции биореакторов
- •Системы перемешивания и аэрации
- •1. Аппараты с механическим перемешиванием.
- •2. Аппараты с пневматическим перемешиванием.
- •3. Аппараты с циркуляционным перемешиванием.
- •Лабораторные, пилотные и промышленные биореакторы: проблемы масштабирования
- •Биотехнологические процессы и аппараты периодического и непрерывного действия
- •Периодические процессы.
- •Специализированные типы биотехнологических процессов и аппаратов Анаэробные процессы.
- •Твердофазные и газофазные процессы.
- •Поверхностные процессы.
- •Вопросы для самоконтроля
- •11. Словарь терминов
- •12.Список использованной литературы
Вопросы для самоконтроля
1. Что относится к объектам биотехнологии?
2. Почему в биотехнологии применяется так много разных биологических объектов?
3. Что представляют собой поверхностные и внутренние структуры бактерий? Каковы их функции?
4. Каковы особенности грамположительных и грамотрицательных бактерий?
5. В чем отличие нуклеоида прокариот от ядра эукариот?
6. Актиномицеты: особенности строения, роль в биотехнологическом процессе.
7. Мицелиальные грибы: особенности строения, значение в природе и биотехнологическом производстве.
8. Дайте характеристику дрожжам. Их значение.
9. Каковы особенности строения водорослей? Каково их значение для биотехнологической промышленности?
10. Вирусы: систематическое положение, особенности строения и роль в биотехнологическом процессе.
11. Каковы принципы подбора объектов для биотехнологической промышленности? Критерии, предъявляемые к продуцентам.
4. Основы генетики микроорганизмов
Непрерывность существования и историческое развитие живой природы обусловлены двумя фундаментальными свойствами жизни: наследственностью и изменчивостью. Наследственность – это сохранение специфических структурных и функциональных свойств организмов, т.е. постоянство признаков на протяжении многих поколений.
Главным носителем генетической информации является дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК), расположенная в ядрах эукариот и нуклеоиде прокариот (рис. 23).
Рис. 23. Структура ДНК
Молекулы ДНК имеют вид длинных двойных цепей полимеров – полинуклеотидов, состоящих из мономеров – нуклеотидов. Каждый нуклеотид включает одно из четырех азотистых оснований – аденин (А), гуанин (Г), цитозин (Ц) или тимин (Т), одну молекулу пентозы (пятиуглеродный сахар) и одну молекулу фосфорной кислоты. Обычно молекула ДНК состоит из двух комплементарных нитей, которые образуют двойную спираль. При этом аденин одной нити находится в паре с тимином другой (стабилизируется двумя водородными связями), а гуанин аналогично связан с цитозином (тремя водородными связями). Последовательность азотистых оснований в молекуле ДНК несет информацию, необходимую для синтеза белков.
В бактериальной клетке ДНК имеет форму нити, замкнутой в виде кольца – бактериальная хромосома. У эукариот генетический материал ядра клетки сосредоточен в хромосомах. Они состоят из хроматина, который содержит около 40% ДНК, 40% гистонов, около 20% негистоновых хромосомных белков и немного РНК.
Бактериальная хромосома, как и хромосомы всех живых организмов, имеет отдельные участки – гены, дискретно расположенные и несущие генетическую информацию относительно всех признаков, присущих клетке. Ген – главный фактор, отвечающий за наследственные свойства микроорганизмов.
Генетический материал микроорганизмов может содержаться не только в хромосоме, но и во внехромосомных структурах – плазмидах, расположенных автономно в цитоплазме или в интегрированном с хромосомой состоянии. Хромосома и плазмида способны к автономному самокопированию – репликации, поэтому их называют репликонами.
Репликация
Репликация(удвоение) ДНК осуществляется на основе комплементарности, так как каждая из двух новых цепей тоже является комплементарной родительской цепи. При репликации ДНК цепи разделяются и каждое пуриновое и пиримидиновое основание притягивает к себе комплементарный свободный нуклеотид и удерживает его с помощью водородных связей. Затем нуклеотиды сшиваются вместе за счет образования фосфодиэфирных связей между соседними остатками дезоксирибозы, образуя новую полинуклеотидную молекулу. В результате образуются две молекулы ДНК, состоящие из одной родительской и одной вновь синтезированной цепи (рис. 24).
ДНК бактерий и многих вирусов представляет собой кольцевую молекулу, она реплицируется, оставаясь в кольцевой форме. При этом репликация происходит в двух направлениях, т.е. образуются две репликативные вилки. Обе вилки возникают в одной точке и удаляются от нее в обоих направлениях одновременно, пока снова не встретятся в одной точке. В этой точке два полностью синтезированных дочерних полинуклеотидных кольца разделяются.
Рис. 24. Синтез комплементарной цепи ДНК
Репликация ДНК – сложный процесс, требующий большого числа ферментов. Например, с помощью фермента геликазы, разрывающего водородные связи, двойная спираль ДНК расплетается в точках начала репликации. Однако основную роль играет ДНК-полимераза, которая последовательно присоединяет новые звенья к растущей полинуклеотидной цепи в соответствии с принципом комплементарности и катализирует образование фосфодиэфирных связей.
У бактерий репликация ДНК начинается в особой точке – точке начала (сайт инициации) репликации. В ДНК эукариот существует несколько таких сайтов, и репликация может начинаться в каждом из них. Образующиеся сегменты эукариотической ДНК сшиваются друг с другом с помощью особых ферментов.