- •Общая биотехнология
- •Оглавление
- •Работа 1. Культивирование клеток микроорганизмов с использованием ферментационного комплекса Biostat a plus
- •Работа 2. Определение интенсивности аэрации сульфитным методом
- •Ход анализа Определение объема раствора йода, необходимого для работы
- •Определение сульфитного числа до и после аэрации
- •Расчет сульфитного числа
- •Зависимость скорости поступлений кислорода в раствор сульфита от интенсивности аэрации
- •Определение азота и белка в кормовых дрожжах
- •Работа 3. Определение содержания общего азота (сырого протеина)
- •Проведение испытания
- •Обработка результатов
- •Работа 4. Определение массовой доли белка по Барнштейну
- •Проведение испытания
- •Работа 5. Определение липидов в кормовых дрожжах
- •Проведение испытания
- •Обработка полученных результатов
- •Техника безопасности при выполнении работы
- •Работа 6. Продукты метаболизма микроорганизмов. Спиртовое брожение
- •Динамика выделения со2в процессе брожения осуществляемого дрожжами
- •Работа 7. Дихроматно-йодометрический метод определения концентрации спирта
- •Проведение испытания
- •Основы микробиологического контроля биотехнологических производств
- •Работа 8. Определение общей бактериальной обсемененности.
- •Проведение испытания
- •Обработка результатов.
- •Рекомендации по оформлению отчета
- •Правила техники безопасности
- •Список литературы
Проведение испытания
В коническую колбу вместимостью 500 мл отмеряют пипеткой10 мл раствора К2Сr2O7и осторожно по стенке прибавляют 5 мл серной кислоты. Когда колба остынет, в нее отбирают 5 мл испытуемого раствора. Спустя 15 мин (этого времени достаточно для окисления спирта при комнатной температуре) к смеси добавляют 10 мл 10 %-ного раствора KJ и колбу прикрывают часовым стеклом.
Через 5 мин в колбу прибавляют 200—250 мл дистиллированной воды, и выделившийся йод титруют 0,1 н. раствором тиосульфата натрия, прибавляя в конце титрования 2—3 мл 1 %-ного раствора крахмала. Титрование заканчивают при появлении голубовато-зеленой окраски раствора.
Количество спирта (С) определяют с учетом расхода 0,5 н. раствора дихромата калия на его окисление и эквивалента 0,5 н. раствора дихромата калия по спирту (1 мл раствора соответствует 0.0073 мл спирта).
,
где V1— количество 0,5 н. раствора дихромата калия, взятое на окисление спирта, мл;
V2— количество 0,1 н. раствора тиосульфата натрия, израсходованное на титрование избытка дихромата калия, мл.
Основы микробиологического контроля биотехнологических производств
Микробиологический контроль биотехнологических производств является обязательной и важной стадией общего контроля производства и управления технологическим процессом.
Важность микробиологического контроля обусловлена необходимостью обеспечения доминирования промышленного штамма на стадии культивирования и строгой последовательности биосинтетических процессов, гарантирующих эффективность производства целевого продукта высокого качества, а также требованиями создания экологически чистого производства с целью обеспечения безопасности занятого в производстве персонала и охраны окружающей среды.
Микробиологический контроль биотехнологических производств включает:
Микробиологическую характеристику жидкостных и воздушных потоков:
Определение инфицированности входящих потоков;
Определение санитарного состояния производственного оборудования и помещений.
Микробиологическую характеристику производственной культуры:
Определение чистоты (отсутствие контаминации) засевной и производственной культуры (при защищенных процессах) или доминирования производственного штамма (при незащищенном процессе);
Определение показателей физиолого-биохимического состояния культуры, определяющих получение целевого продукта требуемого качества.
Микробиологическую характеристику качества готового продукта:
Определение общей обсемененности;
Определение живых клеток продуцента.
Санитарно-микробиологический контроль:
Состояние рабочей зоны;
Состояние отходящих потоков (воздух, вода) и окружающей среды.
Показатели микробиологического контроля и критерии оценок этапов 1, 2 и 3 определяются требованиями технологического регламента и рабочими инструкциями. Методы контроля и допустимые показатели этапа 4.1 основаны на утвержденных нормах ПДК и содержания техногенных факторов в рабочей зоне (воздухе, рабочих поверхностях и т.п.).
Методы контроля и допустимые показатели по п. 4.2 основаны на нормах ПДВ и ПДС, утвержденных для каждого предприятия. Методы контроля и требуемые показатели по п. 3 определяются нормативно-техническими документами (технические условия, ГОСТ и др.) на выпускаемый продукт.
Определение по п. 2.1 проводится при осуществлении непрерывного процесса культивирования, поскольку в результате протекающих автоселекционных процессов может происходить изменение структуры популяции культивируемого штамма.
При защищенных процессах культивирования (стерильных) контролируется стерильность (т.е. отсутствие контаминации) входящих потоков, отсутствие контаминации засевного материала и готового продукта.