- •1. Стафилококки. Микробиологическая диагностика стафилококковой инфекции.
- •2. Стрептококки. Диагностика стрептококковой инфекции.
- •3. Сальмонеллы. Мб диагностика сальмонеллёзов.
- •4. Шигеллы. Микробиологическая диагностика шигеллёзов.
- •5. Кампилобактер. Микробиологическая диагностика кампилобактериозов.
- •6. Эшерихии. Микробиологическая диагностика эшерихиозов.
- •7. Коринебактерии. Микробиологическая диагностика дифтерии.
- •8. Бордетеллы. Микробиологическая диагностика коклюша.
- •9. Микобактерии. Микробиологическая диагностика туберкулёза.
- •10. Клостридии. Микробиологическая диагностика клостридиозов.
- •11. Диагностика заболеваний, вызванных условно-патогенными организмами (Klebsiella, Proteus, Pseudomonas).
- •12. Нейссерии. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции.
- •13. Микробы рода гемофилов. Микробиологическая диагностика гемофильной инфекции.
- •14. Спид–индикаторные инфекции. Микробиологическая диагностика спид–индикаторных заболеваний паразитарной и грибковой природы.
- •15. Иерсинии. Микробиологическая диагностика псевдотуберкулёза и кишечного иерсиниоза.
- •16. Бруцеллы. Микробиологическая диагностика бруцеллёзов.
- •17. Микробиологическая диагностика кишечного дисбактериоза.
- •18. Микробиологические исследования крови при септических состояниях.
- •19. Микробиологическое исследование мочи при уроинфекции.
- •1. Инфекции мочевыводящих путей
- •1. Общие принципы
- •2. Лечение основных форм инфекций мочевыводящих путей
- •20. Вирусы гриппа и парагриппа. Вирусологическая диагностика гриппа и парагриппа.
- •21. Вирус кори. Вирусологическая диагностика кори.
- •22. Энтеровирусы. Вирусологическая диагностика полиомиелита и энтеровирусных инфекций.
- •29. Хламидии. Микробиологическая диагностика хламидиозов.
- •30. Арбовирусы. Вирусологическая диагностика арбовирусов.
- •31. Возбудитель туляремии. Микробиологическая диагностика туляремии.
- •32. Возбудитель сибирской язвы. Микробиологическая диагностика сибирской язвы.
- •33. Микоплазмы. Микробиологическая диагностика микоплазмозов.
1. Общие принципы
а. Концентрации большинства используемых антимикробных препаратов в моче должны быть в 10–100раз выше пикового сывороточного содержания (следует помнить, что определение чувствительности бактерий к антибактериальным препаратам методом антибиотиковых дисков основано на средней концентрации препарата в сыворотке),
б. При банальных инфекциях нет необходимости проводить тест на чувствительность, но он приобретает существенное значение при пиелонефрите и рецидивирующих хронических инфекциях.
2. Лечение основных форм инфекций мочевыводящих путей
а. Уретриты и циститы.Конкретного алгоритма проведения терапии не существует. Обычная схема включает применение низких или умеренных доз препарата в течение 10–15 дней. Нередко при лечении банальных или неосложнённых уретритов и циститов терапевтический эффект оказывает одна доза препарата.
б. Острый пиелонефрит.Цель антимикробной терапии –быстрое создание МБК препарата для скорейшей стерилизации мочевых путей во избежание развития рецидивов и осложнений. Необходимо применять комбинации синергичных препаратов, что снижает риск развитие резистентности у возбудителей. Например, сочетание–лактамов и аминогликозидов позволяет быстрее элиминировать бактерии, чем при применении каждого препарата в отдельности.
20. Вирусы гриппа и парагриппа. Вирусологическая диагностика гриппа и парагриппа.
Сем PARAMYXOVIRIDAE(лат. para – около,myxa– слизь) включает три патогенных: Paramyxavirus (парагриппа и эпидемического паротита), Morbillivirus (корь) и Pneumovirus (респираторно–синтициальный).
Структура и хим состав.Вирионы сферической формы. В центре– нуклеокапсид со спиральным типом симметрии, окружен внешней оболочкой с шиловидными отростками. Односпиральная «–» РНК. В составе нуклеокапсида есть несколько вирусспецифических ферментов, в том числе РНК-полимераза. Имеет суперкапсид и 3 вирусспецифических белка: 2 – гликопротеины NH (обладают гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью), 3 – белок F (участвует в слияниимембран с вирусной оболочкой).
АГ.2 видоспецифических АГ: внутренний S- (нуклеопротеин) и наружный Y-АГ (гликопротеины шиповидных отростков). Общий АГ для всего семейства отсутствует. У ряда парамиксовирусов Y-АГ содержит 2 самостоятельных компонента –гемагглютинин (Н-АГ), др – нейраминидаза (N-АГ).
Репродукция.Парамиксовирусы с помощью рецепторов адсорбируются на клетках. Проникновение – путем рецепторного эндоцитоза или при слиянии вирусной оболочки с цитоплазматической мембраной. Репликация В! РНК – в цитоплазме. При формировании вирионов происходит модификация отдельных участков мембраны-хозяина (снаружи встраиваются гликопротеины, изнутри – мембранный белок). К этим участкам мембраны по актиновым нитям цитоскелета транспортируются вирусные нуклеокапсиды. Выход В! частиц – почкованием. В цитоплазме инфицированныхобразуются ацидофильные включения.
Экология и распространение.Высокочувствительны к действию детергентов, дезинфектантов, кt°С. ИСТОЧНИК –больные и вирусоносители. ПЕРЕДАЮТСЯ аэрозольным, иногда контактным путем. Наиболее тяжело протекает у детей раннего возраста. При паротите, кори больной опасен для окружающих начиная с инкубационного периода.
Диагностика.Вирус выделяют из материала (слюна, моча, кровь, смывы из зева и др.) в культуре клеток. Идентификацию вирусов производят по характеру ЦПД и в серологических реакциях (РСК, РВН, РТГА). Для обнаружения В! АГ в материале используют иммунофлюоресцентный метод.
Серодиагностика проводится в РСК, РВН, РТГА – с парными сыворотками больных.
ВИРУСЫ ПАРАГРИППА ЧЕЛОВЕКА (ВПГЧ)
Известно 5 серотипов вируса парагриппа (ВПГЧ-1– ВПГЧ-5).
Парагриппозные вирусы обладают гемадсорбирующей активностью, к/я проявляется в инфицированных культурах при добавлении эритроцитов морской свинки. Имеют гемагглютинирующие свойства (у разных серотипов выражены по разному). Все серотипы обладают нейраминидазной активностью и умеренно выраженными гемолитическими и симпластобразующими свойствами. Репродуцируются в первичных, и перевиваемых культурах клеток человека и обезьян. Выраженность ЦПД варьирует в зависимости от серотипа и штамма. Вирусы ВПГЧ-1 и ВПГЧ-4 типов наименее цитопатогенны.
Патогенез.Парагриппозные инфекции протекают по типу ОРЗ. Среди ОРЗ встречается примерно в 10% случаев. В! репродуцируются в эпителиальных клетках слизистой носоглотки → в кровь→ вирусемия.
Иммунитет.Типоспецифический гуморальный, сохраняется в течение нескольких лет. В сыворотке обнаруживаются комплементсвязывающие, вируснейтрализующие, антигемагглютинирующие АТ. Большое значение имеют SIgA.
Вакцинопрофилактика не применяется.
Сем ORTHOMYXOVIRIDAE (греч. orthos – правильный, myxa – слизь) – В!! гриппа типов А, В и С, как и парамиксовирусы, обладают сродством к муцину. В! типа А поражают человека и некоторых Ж!! и птиц. В! типов В и С патогенны только для людей.
При КЛАССИФИКАЦИИ – трудности, связанные с АГ изменчивостью. В! подразделены на три типа А, В и С.
К типу А отнесены несколько подтипов, отличающихся др от др по АГ (NH). По классификации ВОЗ В! гриппа типа А разделены на 13 подтипов по гемагглютинину (Н1–10) и на 10 по нейраминидазе (N1–10). Из них в состав В!! гриппа человека типа А входит 3 гемагглютинина (H1–3) и две нейраминидазы (N1 и N2). Но недостатком этой классификации является объединение в единый подтип H1 трех вирусов, отличающихся по характеру вызываемых ими пандемий и эпидемий прошлых лет.
В!! типов В и С имеют стабильные АГ, хотя гемагглютинин вируса гриппа В также претерпевает во времени антигенный дрейф.
НОМЕНКЛАТУРА включает ряд обязательных показателей:
тип вируса (А, В и С);
естественный хозяин, если не человек животное;
географическое место выделения;
лабораторный номер штамма;
год выделения
у В! типа А в скобках указывается подтип гемагглютинина и нейраминидазы (Хабаровск/90/77 (H1N1)).
Стрк и хим состав.Имеет сферическую форму, реже – нитевидные формы. Нуклеокапсид спиральной симметрии – это РНП тяж, уложенный в виде двойной спирали, которая составляет сердцевину вириона. С ней связаны РНК-полимераза (белок Р1) и эндонуклеазы (Р3). Сердцевина окружена мембраной, состоящей из белка M (соединяет РНП с липидным бислоем внешней оболочки и шиловидными отростками, состоящими из Н иN). Липиды и углеводы в составе внешней оболочки и имеют клеточное происхождение. Геном – фрагментированная РНК (В!! типов А и В имеют 8 фрагментов, из них 5 кодируют по одному белку, а 3 – по 2 белка).
АГ.В!! гриппа А, В и С отличаются по типоспецифическому АГ, связанному с РНП и М-матриксным белком, стабилизирующим структуру вириона. Эти АГ выявляются в РСК. Более специфичны для В! типа А два других АГ – Н и N. Гемагглютинин – сложный гликопротеид, обладает протективными свойствами, индуцирует в образование вируснейтрализующих АТ, выявляемых в РТГА. Изменчивость Н-АГ определяетАНТИГЕННЫЙ ДРЕЙФ И ШИФТВ! гриппа. АГ дрейф – незначительные изменения Н-АГ, вызванные точечными Мт. При накоплении изменений в потомстве → изменение АГ свойств Н. АГ шифте – полная замена гена, в основе – рекомбинации между двумя вирусами. Это приводит к смене подтипа Н илиN, и появлению принципиально новых АГ вариантов → крупные эпидемии и пандемии.
С помощью гемагглютинина В! адсорбируется на чувствительных клетках (в т.ч. эритроцитах → склеивание и гемолиз).
Нейраминидаза – фермент, катализирующий отщепление сиаловой кислоты от субстрата. Обладает АГ свойствами, участвует в освобождении вирионов из хозяина.
Культивирование и репродукция.Культивируются в куриных эмбрионах и в культурах клеток (первичные культуры клеток почек эмбриона человека и некоторых Ж!!) → слабовыраженное ЦПД.
Адсорбируются на гликопротеиновых рецепторах эпителиальных клеток → проникают путем рецепторного эндоцитоза. В ядре – транскрипция и репликация.
Патогенез.Первичная репродукция – в эпителиальныхдыхательных путей → в кровь (вирусемия) → повреждение эндотелиальныхкапилляров↑ их проницаемость. В тяжелых случаях – кровоизлияния в легкие, ♥ и другие внутр органы. Попадая в лимфоузлы, повреждают лимфоциты → приобретенный иммунодефицит → вторичные Б! инфекций.
М.б. интоксикация организма различной степени тяжести.
Иммунитет.Механизм связан с неспецифической защитой (интерферон и НКК).
Специфический иммунитет – МКфаги и Т-киллеры (клеточный) + Ig (антигемагглютинины и антинейроминидазные АТ). Последние в отличие от антигемагглютининов только частично нейтрализуют вирус гриппа, препятствуя его распространению.
АТ обнаруживаются в сыворотке через 3–4 сут после начала заболевания, достигают Мах через 2–3 нед. Продолжительность специфического иммунитета – несколько десятилетий, т.е. напряженный, строго специфический к тому подтипу вируса (по Н- и N-АГ), который вызвал его образование.
У новорожденных – пассивный, обусловлен IgG к соответствующему подтипу вируса А, сохраняется в течение 6–8 мес.
Эпидемиология.Источник – больные и вирусоносители. Передача воздушно-капельным путем. Грипп относится к эпидемическим инфекциям, возникают в зимние и зимне-весенние месяцы. Примерно через каждые 10 лет эпидемии гриппа принимают характер пандемий, охватывающих население разных континентов. Объясняется сменой у гриппа А типа Н- иN-АГ вируса типа А (АГ дрейф и шифт). Например, вирус гриппа А с гемагглютинином HSW1 вызвал в 1918 г. пандемию «испанки» (20 млн погибло). В 1968 г. появился новый вариант – В! гриппа A (H3N2) «гонконгский», он продолжает циркулировать до настоящего времени. В 1977 г. к нему присоединился вирус типа А (H1N1).
Прекращение циркуляции В! объясняется коллективным иммунитетом населения к данному варианту селекция вариантов, иммунитет к которым еще не сформировался.
Возможно, что резервуаром вирусов являются дикие и домашние животные, особенно птицы. При этом в организме птиц происходят рекомбинации между птичьими и человеческими вирусами → новые АГ варианты.
По другой гипотезе В!! постоянно циркулируют среди населения, но становятся эпидемически актуальными лишь при снижении коллективного иммунитета.
Вирусы типов В и С более стабильны, вызывают менее интенсивные эпидемии и локальные вспышки.
В! быстро разрушается под действием t°, УФ, дезинфектантов, детергентов, но сохраняются при низких температурах.
Специфическая профилактика.Для ПРОФИЛАКТИКИ используют ремантадин, который подавляет репродукцию вируса гриппа типа А. Для пассивной профилактики – противогриппозный Ig из сыворотки доноров, иммунизированных гриппозной вакциной. Используют также человеческий лейкоцитарный интерферон.
Для ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ – живые и инактивированные вакцины. При введении живых вакцин формируется как общий, так и местный иммунитет. + индукция интерферона.
Получены ИНАКТИВИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ различных типов:
Вирионные – получают путем высококачественной очистки вирусов, выращенных в куриных эмбрионах.
Субъединичные – очищенные поверхностные АГ (Н иN) – ↓ реактогенность и ↑ иммуногенность.
Расщепленные илидезинтегрированные –получают из очищенной суспензии инрионов путем обработки детергентами.
Инактивированные вакцины индуцируют иммунный ответ в системе общего и местного гуморального иммунитета, но в меньшей степени по сравнению с живыми вакцинами индуцируют синтез интерферона.
Вакцины неэффективны, т.к. вакцинные штаммы не соответствуют эпидемическим
Диагностика.ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ – выявление В! АГ в цитоплазме эпителиальных клеток слизистой носа и носоглотки в мазках-отпечатках с помощью ИФА и иммуноферментного анализа.
ВЫДЕЛЕНИЕ путем заражения вируссодержащим материалом (смывы из носоглотки в первые дни заболевания) куриных эмбрионов или культур клеток.
ТИПОВУЮ принадлежность – РСК. Подтип гемагглютинина – РТГА, подтип нейраминидазы – в реакции ингибирования нейраминидазной активности.
Для СЕРОДИАГНОСТИКИ – парные сыворотки, взятые с интервалом в 8-14 дней: в начале заболевания и в период выздоровления. Нарастание титра вирусспецифических антител устанавливают в РСК и РТГА и др методами.