- •1.История микробиологии. Роль пастера и коха в развитии микробиологии
- •2. Систематика микроорганизмов. Основы систематики и таксономические группы микроорганизмов.
- •2. Морфология бактерий.
- •3. Методы микробиологических иследований
- •4. Основные формы бактерий Структура бактериальной клетки
- •5.Простые и сложные способы окраски микроорганизмов. Окраска по грамму
- •6. Спирохеты. Их морфология,классификация,роль в патологии человека.
- •8. Питание бактерий. Клсф питательных сред, их состав.
- •9. Культивирование микроорганизмов на питательных средах, культуральные свойства. Значение культуральных признаков в индефикации бактерий.
- •10.Споры и спорообразование
- •11. Питательные среды. Классификация
- •12. Ферменты бактерий.
- •13. Дыхание бактерий.
- •14. Рост и размножение бактерий.
- •15. Чистые культуры микроорганизмов
- •Выделение и изучение культуральных свойств бактерий–аэробов
- •Особенности выделения и изучения культуральных свойств бактерий–анаэробов
- •16. Генетический аппарат бактериальной клетки
- •17 Генетическая рекомбинация
- •18. Плазмиды бактерий
- •19. Бактериофаги
- •20 Грибы
- •21. Стерилизация
- •22. Принцип обработки инструментария в стоматологии
- •23. Вирусы
- •24. Взаимодействия вирусов с клеткой
- •27 Методы изучения антибиотикочувствительности бпактерий
- •28. Хламидии и рикетсии
- •29. Микоплазмы и уреаплазмы
- •Морфология
- •Культуральные и биохимические свойства
- •Антигенная структура
- •Факторы патогенности
- •30 Актиномицеты
14. Рост и размножение бактерий.
Бактериальные клетки размножаются в результате деления. Основные стадии размножения микробов в жидкой среде в стационарных условиях:
- лаг- фаза (начальная стадия адаптации с медленным темпом прирости биомассы бактерий);
- экспоненциальная (геометрического роста) фаза с резким ростом численности популяции микроорганизмов (2 в степеии n);
- стационарная фаза (фаза равновесия размножения и гибели микробных клеток);
- стадия гибели - уменьшение численности популяции в связи с уменьшением и отсутствием условий для размножения микроорганизмов (дефицит питательных веществ, изменение рH,rH2, концентрации ионов и других условий культивирования).
Данная динамика характерна для периодических культурс постепенным истощением запаса питательных веществ и накоплением метаболитов.
Если в питательной среде создают условия для поддержания микробной популяции в экспоненциальной фазе- это хемостатные (непрерывные) культуры.
Характер ростабактерий на плотных и жидких питательных средах: сплошной рост, образование колоний, осадок, пленка, помутнение.
Чистая культура- популяция одного вида микроорганизмов.
Основные принципы получения чистых культур: механическое разобщение, рассев, серийные разведения, использование элективных сред, особых условий культивирования (с учетом устойчивости некоторых микробов к определенным температурам, кислотам, щелочам, парциальному давлению кислорода, рН и мн.др).
15. Чистые культуры микроорганизмов
Чистая культура – это определенный вид микроорганизма, по наличию которого в организме больного человека и животного можно подтвердить поставленный диагноз инфекционного заболевания.
Получение чистой культуры и умение установить ее видовую принадлежность в медицинской микробиологии имеют первостепенное значение. При выполнении этой задачи следует иметь в виду, что в патологических материалах возбудитель заболевания, как правило, находится в ассоциации с банальной (посторонней) микрофлорой. Следовательно, для его изоляции гной, мокроту, осадки мочи, испражнения и прочие экскреты необходимо засеять так, чтобы получить колонии. С этой целью бактериальной петлей или шпателем материалы засевают на агаризованные среды в чашках Петри. Выросшие колонии после детального изучения пересевают на скошенные и жидкие среды для накопления биомассы. В процессе накопления исследуются культуральные свойства чистой культуры (I этап идентификации вида).
Окончательное заключение о природе чистой культуры (вида) делают только после всестороннего изучения биохимических свойств, которые тесно переплетены с культуральными; серологических реакций (действие специфических сывороток); фагочувствительности культуры и ее патогенности для экспериментальных животных (II этап идентификации). При этом следует учитывать некоторые различия в выборе метода получения чистых культур аэробных и анаэробных бактерий.
Выделение и изучение культуральных свойств бактерий–аэробов
Бактерии–аэробы выращивают в обычных условиях кислородной среды при температуре 37С в термостате (рис. 18). Схематично начальный этап исследования материала можно представить следующим образом.
Первый день исследования. Изучаемый материал микроскопируют и высевают на плотную среду в чашки Петри шпателем или бактериальной петлей (в отдельных случаях – в жидкую среду обогащения). Посевы помещают в термостат на 18–24 ч при температуре 37С.
Второй день исследования. На извлеченных из термостата чашках Петри с посевами изучают специфические признаки выросших на поверхности питательной среды колоний.
1. Вначале рассматривают их невооруженным глазом со стороны дна чашки Петри в проходящем свете. Если имеются два различных вида колоний, их нумеруют и описывают каждую в отдельности. В протоколе отмечают следующие данные: а) размеры колоний (крупная – 4–5 мм в диаметре и более, средняя –2–4 мм, мелкая – 1–2 мм, карликовая – менее 1 мм); б) форму очертаний (правильно или неправильно округлая, розеткообразная, ризоидная и др.); в) степень прозрачности (непрозрачная, полупрозрачная, прозрачная).
2. Далее колонии описывают в отраженном свете со стороны крышки, отмечая: а) цвет (бесцветная, пигментированная); б) поверхность (гладкая, блестящая, влажная или морщинистая, матовая, сухая); в) положение на питательной среде (возвышающаяся над средой, погруженная или сливающаяся с ней, плотно прилегающая к среде, уплощенная).
3. Приступают к микроскопическому изучению структуры колоний. Чашку Петри устанавливают вверх дном на предметном столике микроскопа, опускают конденсор и объективом х8 изучают: а) характер краев (ровные, волнистые, зазубренные, бахромчатые); б) структуру (гомогенная или аморфная, зернистая, волокнистая).
Из колонии готовят мазок, окрашивают по Граму и микроскопируют. Остаток колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры в достаточном количестве. Пробирки с посевами помещают в термостат на 18–24 ч при температуре 37 °С.
Техника посева колонии на скошенный агар. Чашку Петри с отмеченной колонией берут в левую руку. Бактериальную петлю держат ближе к концу петледержателя и фиксируют руку, опираясь мизинцем о борт чашки. Снимают петлей остаток отмеченной колонии, чашку Петри вкладывают в крышку и засевают скошенный агар.