- •Хроматографические методы в контроле качества лекарственных средств
- •Определение хроматографии
- •Классификация хроматографических методов
- •Ионообменная хроматография
- •Практическое применение
- •Хроматография в тонком слое сорбента
- •Стадии метода хроматографии в тонком слое
- •Практическое применение
- •Газовая, газожидкостная и высокоэффективная жидкостная хроматография. Краткая характеристика
- •Основные характеристики гх, гжх и вэжх
- •Критерии хроматографических процессов
- •Практическое применение газовой и газожидкостной хроматографии
- •Особенности высокоэффективной жидкостной хроматографии (жидкостной хроматографии высокого давления)
- •Характеристики детекторов для вэжх
- •Практическое применение
Характеристики детекторов для вэжх
Детектор |
Измеряемое физическое свойство |
Чувствительность, мг в пробе |
Селективность |
Фотометрический |
Оптическая плотность при фиксированной длине волны |
10 -10 |
высокая |
Спектрофотометрический |
Оптическая плотность при выбираемой длине волны |
10-9 |
высокая |
Рефрактометрический |
Разность показателей преломления в сравнительной и измерительной ячейках |
10-5 |
малая |
Флуориметрический |
Интенсивность флуоресценции исследуемых веществ в подвижной фазе |
10-11 |
очень высокая |
Амперометрический |
Ток окисления или восстановления электрохимически активных соединений |
10-9 - 10 -10 |
очень высокая |
Принцип анализа в ВЭЖХ. Анализируемую смесь растворяют в подвижной фазе и с помощью дозатора или микрошприца вводят в специальное устройство прибора. Туда же подается под определенным давлением и с определенной скоростью подвижная фаза. По мере продвижения подвижной фазы с растворенными в ней веществами за определенный промежуток времени на колонке происходит разделение смеси. Чем больше сродство компонента к неподвижной фазе и чем меньше к подвижной, тем медленее он движется по колонке и тем дольше он в ней удерживается.
Анализ проводится в определенном режиме температур, что создается с помощью устройства термостатирования.
Сорбент, состав подвижной фазы, скорость подачи подвижной фазы, давление, температурный режим, объем вводимой пробы устанавливаются для данной конкретной пробы.
Практическое применение
ВЭЖХ используется в фармакопейном анализе при определении подлинности, испытании на чистоту и количественном определении лекарственных средств и их лекарственных форм.
Достоинства метода ВЭЖХ:
- универсальность;
- высокая скорость процесса, позволяющая сократить анализ от
нескольких часов до нескольких минут;
- высокая чувствительность и селективность;
- возможность анализа термолабильных веществ, каковыми являются
многие лекарственные вещества;
- минимальная степень размывания пиков, что дает возможность
разделять соединения близкой химической структуры;
- высокая степень механизации и автоматизации разделения и
обработки полученной информации;
- возможность использования в качестве подвижной фазы смеси
растворителей, что позволяет варьировать ее элюирующую
способность;
- одновременное разделение и анализ компонентов исследуемой смеси.
Таким образом, метод ВЭЖХ обладает такими преимуществами, которые позволили ему выдвинуться на передовые позиции как в отечественной практике, так и в развитых зарубежных странах. Данный метод включен во все ведущие фармакопеи мира.