1. Диателическая гипериммунизация.

После вечерней дойки, на «сухое вымя», через молочный катетер в каждую цистерну вводят по 10 мл алтигена (вирус-ящура, инактивированный при 37°С и рН 9,0 в течение 48— 56 часов).'

Цикл диателической иммунизации состоит из 3—5 введе­ний антигена с интервалом 3—4 дня. У коров наблюдается кратковременное. снижение продуктивности, но лактация на-3—4 день восстанавливается.

3,3.3. Получение «иммуного» молока. На второй день: по­сле окончания иммунизации из молока получают сыворотку и проверяют ее активность в реакции серозащиты на мышах. Если сыворотка окажется активной, то в течение 30 дней от коров получают «иммунное» молоко, затем цикл иммуни­зации повторяют.

4. Сепарирование «иммунного» молока (полученные сливки используют для пищевых целей).

5. Створоживание молока (путем добавления 4—5 мл 50% раствора уксусной кислоты на J л обрата).

6. Отделение молочной сыворотки (белковая масса- используется для изготовления творога).

24

7. Нейтрализация молочной сыворотки (добавлением 4—5 г соды на 1 л).

8. Фильтрование сыворотки.

9. Высушивание путем распыления в калорифере (тем­ пература воздуха в зоне распыления 56—95°С).

10. Фасовка.

10. Контроль на стерильность, безвредность и специ­ фическую активность.

Иммунолактон содержит вируснеитрализующие антитела к тем типам вируса ящура, которые были использованы для иммунизации коров.

Иммунолактон используют для профилактики и терапии ящура у телят, поросят, ягнят и козлят.

Перед применением его растворяют в стерильном фосфат-но-буферном растворе в соотношении 1:10, вводят подкожно.

3.4. КРОВЬ РЕКОНВАЛЕСЦЕНТОВ

Реконвалесцентами называют естественно переболевших животных. В крови переболевших животных накапливаются вируснеитрализующие антитела и их титры иногда не ниже, чем в крови иммунизированных животных.

Кровь получают непосредственно в хозяйстве от клини­чески здоровых, переболевших или привитых (вакцинирован­ных) животных через 3—4 недели после переболевания или последней вакцинации.

Кровь, взятую из яремной вены с соблюдением правил асептики, смешивают с заранее приготовленным глюкозно-цитратньш раствором в соотношении 1:1 — 1:2. Раствор гото­вят по прописи: натрия хлорида 8,5 г, натрия цитрат 4,0—4,5 г, глюкоза 20,0—40,0, вода дистиллированная — 1000 мл; сте­рилизуют кипячением в течение 10 мин. Для предупрежде­ния размножения в глюкозно-цитратной крови случайно по­павших микроорганизмов на 1 л раствора вносят по 250 тыс. ЕД. антибиотиков (пенициллин и стрептомицин).

Глкжозно-цитратная кровь содержит форменные элемен­ты, плазму и специфические вируснеитрализующие антитела-Ее применяют с профилактической и лечебной целью при ящуре и вирусных «пневмоэнтеритах» молодняка (ринотра-хеит крупного рогатого скота, парагрипп-3, адено-, рео-коро-навирусная, респираторно-синцитиальная инфекция, вирус­ная диарея). Вводят внутрибрюшинно, внутривенно, а ново-

25

рожденным в первые- сутки жизни ее можно выпаивать внутрь. ,

Кровь восполняет организм новорожденных питательными веществами, энергией, макро- и микроэлементами, фермента­ми, витаминами, гормонами и иммунными глобулинами, ак­тивизирует защитно-адаптационные механизмы, повышает напряженность колострального иммунитета, способствует становлению функций и преодолению морфофункциональной незрелости новорожденных животных.

Глкжозно-цитратную кровь применяют сразу же после приготовления или в течение 8—10 суток при условии хране­ния при 4—8°С

3.5. СЫВОРОТКА РЕКОНВАЛЕСЦЕНТОВ

Для получения сыворотки кровь берут от клинически здо­ровых, переболевших или вакцинированных животных, как правило, во время их убоя на мясокомбинате или убойном пункте хозяйства, а сыворотку отделяют, проверяют и вы­пускают на биопредприятиях или (чаще) в областных и зональных производственных лабораториях.

В качестве консерванта используют фенол (0,5%) или бе-тапропиолактон (0,03%).

Сыворотка реконвалесцентов пригодна для применения з течение $ месяцев со-дня изготовления при условии хра­ нения при температуре от 2 до 10°С. -.

Препарат применяют в тех хозяйствах, откуда отобраны дсшоры-реконвалесценты, переболевшие острыми респиратор­ ными и желудочно-кишечными - заболеваниями, а также в откормочных комплексах, - которые формируются за счет «сборного» поголовья. ■ ■■-.. . ' ■ .

Нельзя использовать для лечебно-профилактических целей кровь и сыворотку коров из хозяйств неблагополучных по лейкозу.

3.6. КОНТРОЛИ ИММУННЫХ СЫВОРОТОК И ГЛОБУЛИНОВ И ОСОБЕННОСТИ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

Сывороточные препараты должны быть стерильными, без­вредными и активными.

3.6.1. Контроль на стерильность. Сыворотки и глобулины не должны содержать никаких бактерий и вирусов.

26

Контроль на отсутствие бактериальной загрязненности осуществляют путем высева определенного количества сыво-26

ротки (глобулина) из каждой серии на МПБ, МПА, МППБ под вазелиновым маслом, агар Сабуро или среду Чапека. Посевы выдерживают в термостате при 37°С не менее 5 су­ток с последующим пересевом на аналогичные среды. Роста каких-либо микробов не должно быть. В случае наличия ро­ста сыворотку пропускают через фильтр Зейтца, после чего снова проверяют на стерильность. Допускается прогрев сы­вороток лошади при 58+0,5°С в течение 60 мин., сывороток кр. р. скота и свиней — при той же температуре 30 мин.

Контроль на отсутствие вирусов проводится на чувстви­ тельных лабораторных объектах (животные, развивающиеся куриные эмбрионы и культуры клеток) по отсутствию инфек­ ционного действия. ^

3.6.2. Контроль на безвредность. Его проводят на лабо­раторных животных. Морской свинке массой 350—500 г под­кожно в области живота вводят 10 мл испытуемой сыворотки; и двум белым мышам сыворотку вводят подкожно в области спины в дозе 0,5 мл: Наблюдают за животными 10 дней. Сыворотка считается безвредной, если у животных в месте введения не наблюдают воспаления, омертвления тканей и

животные остаются живы.

При получении сомнительных результатов проводят по­вторный контроль на двойном количестве животных.

3. Контроль на апирогенность. Его проводят на кро­ ликах, породы шиншилла массой 1,5—2,0 кг. Сыворотку или глобулин им водят в ушную вену в дозе 1 мл/кг массы. Че­ рез 1, 2 и 3 часа измеряют температуру тела. Она не дол­ жна повышаться более, чем на 0,8°С.

4. Контроль на специфическую активность. Этот кон­ троль проводят в зависимости от спектра патогенности воз­ будителя на чувствительных лабораторных или естественно- восприимчивых животных, эмбрионах кур или культурах: клеток путем постановки реакции нейтрализации или реак­ ции серозащиты.

В реакции нейтрализации разные разведения сыворотки (глобулина) соединяются в пробирках с заранее оттитрован­ ным количеством вируса (10, 100 или 1000 ЛД.ад), выдержи­ вают в термостате, после чего эту смесь вводят в чувстви­ тельную тест-систему. Оценка активности сыворотки осно­ вана на определении концентрации специфических антител. Чем выше разведение сыворотки, способное нейтрализовать инфекционное действие вируса, тем выше активность сыворо­ ток. . ■

В реакция серозащиты. сыворотку вводят чувствительным лабораторным или естественно восприимчивым животным, а через 20—24 час. их и контрольных (непривитых) живот­ных заражают лодтитрованнной дозой вируса, способной вы­звать заболеваемость и гибель непривитых животных.

Сыворотка считается активной и годной к практическому применению, если привитые ей животные остаются здоровы­ми (срок.наблюдения минимум 14 дней), а непривитые забо­левают и погибают (в отдельных случаях допускается пере-болевание).

На каждую проверенную серию сыворотки или глобулина заполняется паспорт, в котором указывают основные техно­логические, лечебно-профилактические и специфические по­казатели, условия хранения, и применения.

Все препараты, содержащие специфические антитела (сы­воротки, глобулины, иммунолактон) имеют, как правило, про­должительный срок хранения (до 5 лет). Они применяются главным образом для лечения. При рациональном примене­нии оказывают быстрый эффект, особенно в тех случаях, ко­гда вирус использует кровь и лимфу для распространения из места внедрения в излюбленные места локализации. Анти­тела, вступая в контакт с вирионом, блокируют его и лишают вирус способности адсорбироваться на» чувствительных клет­ках.

. С профилактической целью сывороточные препараты ис-гюльзуют в ■ тех случаях, когда у животных был контакт с возбудителем (больными животными или инфицированными объектами внешней среды) или при реальной." угрозе заноса возбудителя, т. е. для экстренной профилактики, когда необ­ходимо быстро создать состояние невосприимчивости.

Однако,' продолжительность сывороточного «пассивного» иммунитета обычно не превышает 2—3 недель, поэтому при­менение этих препаратов часто комбинируют с использова­нием вакцин.

Сыворотки и глобулины вводят, как правило, подкожно или внутримышечно, реже' внутривенно. Молодняку первых 2—3 дней жизни их целесообразно выпаивать (2—3 мл на I кг массы), так как в это время антитела способны прони­кать через слизистую оболочку в неизмененном виде.

Следует иметь в виду, что течение вирусных болезней у молодняка часто усугубляется вторичными, «секундарными» инфекциями, вызванными энтеропатогенными эшерихиямй, сальмонеллами, пастереллами, стрептококками, поэтому свое: 28

временное обоснованное применение сывороток против коли-бактериоза, сальмонеллеза, пастереллеза или стрептококка молодняка животных и подтитрованных антибиотиков или комплексных антимикробных препаратов может дать поло­жительный лечебно-профилактический эффект. Так, напри­мер, инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота, как правило, осложняется пастереллезом, поэтому раннее при­менение сыворотки против пастереллеза и подтитрованных антибиотиков ликвидирует секундарную инфекцию (пасте-реллез) и способствует .выздоровлению. При лечении вирус­ных пневмоэнтеритов можно использовать комплексный пре­парат суметролим.