- •Микробиологические основы
- •Введение
- •1. Противомикробные мероприятия
- •Физические методы:
- •2. Химические методы:
- •1.1. Стерилизация
- •1.1.1. Физические методы стерилизации.
- •1.1.2. Химический метод стерилизации.
- •Сравнительная характеристика некоторых методов низкотемпературной стерилизации
- •1.1.3. Контроль стерильности изделий медицинского назначения.
- •1.2. Дезинфекция
- •1.2.2. Контроль качества дезинфекции.
- •1.3. Антисептика
- •1.3.1. Химические антисептические средства.
- •1.3.2. Биологические антисептические средства.
- •1.4. Механизмы антимикробного действия дезинфектантов и антисептиков
- •1.5. Резистентность микроорганизмов к антисептикам и дезинфектантам
- •1.6. Контроль за распространением устойчивых к антибиотикам,антисептикам и дезинфектантам вариантов бактерий и грибов
- •1.7. Микробиологический контроль за присутствием микроорганизмов в глф антибиотиков, антисептиков и дезинфектантов
- •1.7.1. Методика контроля стерильности противомикробных препаратов.
- •2. Методические рекомендации к самостоятельному выполнению заданий по контролю качества противомикробных мероприятий
- •2.1. Стерилизация изделий из стекла и контроль ее качества
- •2.2. Стерилизация медицинского инструментария и контроль ее качества
- •2.3. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах капельных инфекций
- •2.4. Контроль качества дезинфекции поверхностей в очагах кишечных инфекций
- •2.5. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Гигиеническая антисептика.
- •I этап:
- •II этап:
- •2.6. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Хирургическая антисептика.
- •I этап:
- •II этап:
- •2.7. Контроль стерильности готовых лекарственных форм антибиотиков и антисептиков
- •14 Дней 14 дней
- •2.8. Определение общего микробного числа в готовых лекарственных формах дезинфектантов
2.5. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Гигиеническая антисептика.
Цель: освоить методику испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения.
Материалы:
Стерильные чашки Петри – 8 шт., чашка Петри с 10-15 мл взвеси тест-культуры E. coli плотностью 109 КОЕ/мл., пробирки с 10 мл 1% пептонной воды – 8 шт., пробирки с 4,5 мл 1% пептонной воды – 32 шт., чашки с МПА – 8 шт., стерильные пипетки на 1-2 мл – 32 шт., пастеровские пипетки – 8 шт.
Методика:
I этап:
Вымыть руки теплой водой с туалетным мылом (2 минуты). Высушить руки на воздухе.
Контаминировать кожу 2-х дистальных фаланг указательного, среднего и безымянного пальцев одной руки взвесью E. coli плотностью 109 КОЕ/мл путем погружения на 10 сек. в чашку Петри с культурой. Высушить контаминированные пальцы на воздухе.
Провести смывы с контаминированных пальцев руки в чашке с 10 мл 1% пептонной воды путем втирания в дно чашки (контроль).
Выполнить обработку кожи рук антисептиком путем тщательного втирания 3 мл препарата в кожу в течение 30 секунд.
Провести смывы с контаминированных фаланг пальцев руки в чашке с 10 мл 1% пептонной воды путем втирания в дно чашки (опыт).
Выполнить посевы смывов (рис. 8).
0,5 мл смывной жидкости из чашки Петри перенести в пробирку с 4,5 мл 1% пептонной воды и далее приготовить разведения от 10-1 до 10-4.
Все разведения смывов посеять по 0,05 мл на соответствующие сектора чашек Петри с МПА.
II этап:
Подсчитать количество колоний на секторах чашек.
Определить концентрацию жизнеспособных бактерий (КОЕ/мл) в контрольных и опытных высевах и десятичные логарифмы числа выживших микробов.
Формула для определения концентрации жизнеспособных бактерий (КОЕ/мл):
N=n×20 ×10x,
где: n – число колоний на питательной среде; 20 – коэффициент перерасчета посевного объема; 10х – фактор разведения.
Рассчитать фактор редукции (разница между десятичными логарифмами КОЕ/мл в контроле и опыте).
Примеры расчета показателей:
Число колоний на секторе «10-4» в контроле 5 шт., КОЕ/мл – Nк=5×20×104=1 ×106; десятичный логарифм – lnк=6,0.
Число колоний на секторе «10-1» в опыте 4 шт., КОЕ/мл – Nо=4×20×101=0,8×103; десятичный логарифм – lnо=3,9
RF (фактор редукции) = lnк- lnо= 6,0-3,9=2,1 ln
Значения десятичных логарифмов чисел определяются по таблицам или с помощью калькулятора.
Для гигиенической антисептики активность препаратов (величина фактора редукции) по отношению к тест-культуре E. coli должна составлять > 4,0 ln.
Чашка Петри со 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл
с мывной жидкостью
0,5 мл 10-1 10-2 10-3 10-4
10-2
10-3
0,05 мл
10-1
10-4
Рис. 8. Схема выполнения посевов при испытании противомикробной активности антисептика профилактического назначения
2.6. Методика испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения. Хирургическая антисептика.
Цель: освоить методику испытания противомикробной активности антисептика профилактического назначения.
Материалы:
Стерильные чашки Петри – 8 шт., пробирки с 10 мл 1% пептонной воды – 8 шт., пробирки с 4,5 мл 1% пептонной воды – 24 шт., чашки с МПА – 8 шт., стерильные пипетки на 1-2 мл – 24 шт., пастеровские пипетки – 8 шт.