- •Лепные работы при оформлении наглядных пособий Инструменты и оборудование
- •Материалы
- •Техника лепки рельефных моделей
- •Формы и их изготовление
- •Изготовление форм из гипса и отливка по ним чистовых моделей
- •Отливка чистовой модели по черновой форме из гипса
- •Техника работ с применением клеевых форм
- •Работа с папье-маше
- •Выклейка из папье-маше моделей топографического рельефа
- •Отделка изделий из папье-маше
- •Изготовление макетов
- •Лепим из пластики
- •Основные правила работы с пластикой:
- •Тема. Цитологический рисунок. Измерение объектов под микроскопом.
- •Ход работы
- •Задачи и техника биологического рисунка
- •Советы преподавателю
- •Советы начинающему рисовальщику
- •Методические и технические приемы рисования
- •Работа с рисовальным аппаратом
- •Измерение объектов под микроскопом
- •Способы подготовки к исследованию и методы изучения клетки
- •Постоянные микротомные препараты
- •Подбор объектов для исследования и подготовка их к фиксации
- •Специальная обработка объектов перед фиксацией
- •Фиксаторы, их состав и использование
- •Фиксация
- •Промывание и обезвоживание
- •Пропитывание промежуточной жидкостью и парафином
- •1. Растворители парафина и их основные свойства
- •Приготовление парафиновых блоков
- •Получение микротомных срезов
- •Последовательность работы на санном микротоме.
- •Неудачи при изготовлении срезов.
- •Наклейка парафиновых срезов на предметные стекла
- •Удаление парафина и окрашивание срезов
- •Монтирование препаратов
- •Временные препараты. Перевод их в постоянные Фиксация, хранение и мацерация объектов
- •Окрашивание препаратов
- •Приготовление красителей.
- •Ускоренный метод приготовления давленых препаратов
- •Приготовление препаратов из стеблевой меристемы
- •Приготовление препаратов из молодых листочков
- •Перевод временных препаратов в постоянные
- •1. Правила гербаризации растений
- •Простейшее оборудование для сбора гербария
- •Засушивание
- •1. Различные способы засушивания растений
- •2. Сбор растений для засушивания
- •3. Продолжительность засушивания
- •4. Закладка растений
- •5. Засушивание под прессом
- •6. Засушивание в гербарных рамках
- •7. Готовность засушенного материала
- •8. Хранение засушенного материала
- •9. Монтирование
- •10. Определение
- •11. Инсерирование гербария
Монтирование препаратов
Предметные стекла со срезами вынимают из ксилола пинцетом, вытирают с нижней стороны и кладут на ровную поверхность, покрытую белой бумагой. Затем быстро, не допуская подсыхания срезов, капают сверху одну каплю канадского бальзама и каплю чистого ксилола. Берут чистое покровное стекло, ставят его наклонно на предметное, касаясь бальзама, и осторожно опускают. Справа и слева от покровного стекла кладут кусочки фильтровальной бумаги, для удаления излишков ксилола и бальзама. Затем препарат осторожно вытирают тряпочкой, смоченной в ксилоле, и сушат в течение нескольких дней. Иногда на препараты сверху накладывают небольшие гирьки массой 5-10 г для удаления пузырьков из-под покровного стекла.
После сушки препарат окончательно протирают, просматривают под микроскопом и подписывают. На левой стороне его ставят очередной номер, который заносят в специальный каталог с указанием способа окраски и номера по журналу фиксации.
На правой стороне препарата наклеивают этикетку с указанием названия препарата, например: «Двойное оплодотворение мягкой пшеницы». Дробью указывают отмеченный срез на препарате. Например, 2/г, т. е. второй срез во втором ряду. Иногда срезы отмечают тушью с нижней стороны препарата. Готовые препараты хранят в специальных коробках.
ПОСТОЯННЫЕ ГЛИЦЕРИНОЖЕЛАТИНОВЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Для анатомических исследований в тех случаях, когда возникает необходимость быстро приготовить постоянный препарат, например с пыльцевыми зернами или прорастающими пыльцевыми трубками в пестиках пшеницы, ржи или других растений, объекты можно заключить в глицерииожелатин.
Приготовление глицериножелатина. Вносят 1 г желатина и 6 мл дистиллированной воды в небольшую колбу. Желатин набухает несколько часов. После этого в колбу добавляют 7 мл очищенного глицерина и кристаллик антисептика. Колбу ставят иа горячую водяную баню. Содержимое ее помешивают стеклянной палочкой. Через некоторое время смесь, в колбе разжижается. Ее переносят в термостат и фильтруют через бумажный фильтр в горячем виде.
Глицериножелатин может долго храниться в закрытой склянке с корковой пробкой, в которую вставлена стеклянная палочка. При необходимости склянку с глицериножелатином помещают в воду, подогреваемую на водяной бане. Глицериножелатин ,разжижается, и его используют для приготовления препаратов.
В качестве фиксирующей и просветляющей жидкости берут лактофенол Аммана. В его состав входят 1 ч. молочной кислоты, 1 ч. фенола, 2 ч. глицерина и 1 ч. воды. Красителем служит 1%-й раствор хлопчатобумажного синего, который добавляют в лактофенол.
Последовательность изготовления препаратов. Рыльце с проросшими пыльцевыми зернами помещают на предметное стекло, на которое наносят смесь лактофенола и красителя. Продолжительность одновременной фиксации и окраски 5-10 мин, затем пипеткой удаляют смесь и наносят чистый лактофенол для дифференцировки препарата. После окончательного удаления лактофенола наносят по капле теплого глицериножелатина на предметное и покровное стекла. Смонтированный препарат быстро застывает. Такие препараты сохраняются от одного года до нескольких лет.
При изготовлении глицерииожелатиновых препаратов можно воспользоваться насыщенным раствором метилового зеленого в 50%-м растворе спирта или водным раствором основного фуксина (1 г на 10 мл воды). Любой из этих красителей прибавляют к горячему глицериножелатину (20 капель фуксина на 15 мл глицериножелатина). Пыльцу помещают в центр предметного стекла и для просветления ее прибавляют 6-8 капель спирта для энтомофильных растений и 1-2 капли - для анемофильных. Затем добавляют каплю горячего глицериножелатина с красителем и помешивают пыльцу иглой. Чтобы среда быстро не застыла, стекло проносят над пламенем спиртовки.
В 1965 г. И. Д. Романов применил для изучения пыльцы картофеля следующую методику. Он окрасил сухую пыльцу из пыльников на предметном стекле 0,1%-м спиртовым раствором основного фуксина, который затем отмывал 1-2%-м раствором соды. Влажную окрашенную пыльцу заключал в глицериножелатин.
Глицериножелатиновые препараты широко применяют в анатомических исследованиях, при которых срезы желательно оставить неокрашенными или не проводить через спирты. Окрашенные в глицериножелатине такие срезы быстро обесцвечиваются. В ряде случаев при использовании метиленовой синей, кристаллвиолета, фуксина и других красителей удается сохранить окраску.
Например, чтобы изготовить глицериножелатиновые препараты для наблюдения плазмодесм в порах клеточных стенок у созревающих семян плодовых и во время выхода семян из покоя с использованием кристаллвиолета, Е.3. Окнина и Е.Н. Барская в 1956 г. готовили следующие реактивы:
первый р-р Люголя, состоящий из 0,75 г йодида калия и 1 г металлического йода, растворенных в 100 мл воды;
два раствора серной кислоты 10%-й и 5%-й;
второй раствор Люголя, состоящий из 1,25 г йодида калия и 1 г металлического йода, растворенных в 100 мл 5%-го раствора серной кислоты;
краситель - 1%-й водный раствор кристаллвиолета, который по каплям приливают к двум-трем каплям 5%-го раствора серной кислоты, пока она не окрасится в темно-зеленый цвет;
закрепляющий раствор, состоящий из 30 мл глицерина, 2 г хлорида цинка, 0,2 г металлического йода и 80 мл воды со следами йодида калия.
Последовательность работы следующая.
Свежие срезы помещают в первый раствор Люголя на 5 мин.
Переносят срезы в 10%-й раствор серной кислоты на 5 мин, а затем во второй раствор Люголя на 5 мин.
Промывают срезы 5%-м раствором серной кислоты 3 раза, до исчезновения желтой окраски.
Переносят срезы в краситель на 15-20 мин до просветления его окраски, а затем в закрепляющий раствор.
Просматривают срезы в глицерине или глицериножелатине.