БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ
Кафедра микробиологии
Отчёт по производственной практике по специализации
студентки 5 курса 3 группы
Королени А.А.
Руководитель практики:
Прокулевич В.А.
Научный руководитель:
кандидат биологических наук, доцент
Фомина О.В.
Минск
2011
Введение
Производственная учебная практика проходила с 14.03.11 по 16.04.11 на базе кафедры микробиологии биологического факультета Белорусского государственного университета.
Целью практики являлось исследование хитиназной и хитозаназной активности коллекции актиномицетов.
Задачи:
Освоить методы и методику для выполнения экспериментального задания.
Исследовать хитиназную и хитозаназную активности актиномицетов.
Материалы и методы исследования
Объекты исследования
В работе были использованы 79 штаммов под порядковыми номерами 1.1-1.79, относящиеся к порядку Actinomycetales, выделенные ранее из почв в районе биологического факультета, памятника природы «Дубрава», дендрария БГУ, почв окрестностей городов Несвиж, Старые Дороги, Брест, Барановичи и деревни Щомыслица.
Среды и растворы
Полноценная жидкая питательная среда
Для приготовления жидкой питательной среды брали 15 г питательного бульона на 1 л дистиллированной воды. Автоклавировали 0,5 часа при 1,5 атм.
Овсяный агар (оа)
Овсяная мука 20 г
Дистиллированная вода 1 г
Агар-агар 20 г
Овсяную муку смешивали с дистиллированной водой и кипятили в течение 30 мин при 58 0С, затем разливали по флаконам и добавляли агар-агар.
Устанавливали pH = 7,2
Стерилизовали автоклавированием 30 мин при давлении 1,5 атм.
Солевой концентрат 4х
NH4Cl 20г
NH4 NO3 4г
Na2SO4*10H2O 8г
K2HPO4*3H2O 15,7г
KH2PO4*3H2O 5,6 г
MgSO4*7H2O 0,4г
Вода дистиллированная до 1 литра
Стерилизовали автоклавированием 30 мин при давлении 1,5 атм.
Водный агар
Агар-агар 20г
Вода дистиллированная до 1 литра
Стерилизовали автоклавированием 30 мин часа при давлении 1,5 атм.
Минимальная солевая среда
Водный агар 300 мл
Солевой концентрат 4х 100 мл
Среда с каллоидным хитином/хитозаном
Водный агар 150 мл
Питательный бульон 50 мл
Раствор каллоидного хитина/хитозана 35 мл
Солевой концентрат 4х 50 мл
Стерилизовали автоклавированием 30 мин часа при давлении 1,5 атм.
Раствор каллоидного хитина/хитозана (S.C. Hsu, J.L. Lockwood)
40 грамм хитина/хитозана мелко измельчали и вносили в ёмкость, в которую затем добавляли 400 мл концентрированной соляной кислоты и оставляли на 30-50 минут. После этого суспензию каллоидного хитина/хитозана добавляли в 2 литра воды при 5-10 0С. После этого производили фильтрацию раствора несколько раз до конечного pH – 3,5. При этом сохранялось до 85% каллоидного хитина/хитозана. После производили автоклавирование на 1,5 атмосферы 30 минут.